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公开(公告)号：CN118745411A
公开(公告)日：2024-10-08
申请号：CN202410954691.2
申请日：2024-07-17
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16‑3(以下简称Hsp16‑3)过表达的结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌(以下简称H37Ra菌)菌株的构建及其应用。首次利用电穿孔技术，将构建的大肠杆菌‑结核杆菌重组穿梭质粒载体pMV361‑Hsp16‑3，转入H37Ra菌，筛选并鉴定，确定成功构建的菌株，为Hsp16‑3基因过表达的H37Ra菌株。本发明构建的Hsp16‑3过表达的H37Ra菌，增强了Hsp16‑3基因的表达，将提升H37Ra菌对机体的免疫反应，为探索研究Hsp16‑3对H37Ra菌的致病性、免疫保护作用等方面的调控作用，以及新型结核病疫苗研发奠定基础。
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公开(公告)号：CN118389487A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410549952.2
申请日：2024-05-06
申请人： 石河子大学
IPC分类号： C12N13/00 , A61K39/104 , A61P31/04 , C12N1/20 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了一种新型鲍曼不动杆菌灭活全菌疫苗的制备及其应用，属于疫苗制备技术领域。包括以下步骤：使用预处理剂对鲍曼不动杆菌进行预处理，再以溶菌酶进行酶解，制备原生质体，对制备的原生质体进行超声微气泡物理损伤处理，获得免疫原性细胞死亡的鲍曼不动杆菌灭活全菌体，进而制备成新型鲍曼不动杆菌灭活全菌疫苗。本发明应用超声微气泡物理损伤技术，研制出了免疫原性细胞死亡的鲍曼不动杆菌灭活全菌体，该灭活全菌体可以作为疫苗应用于鲍曼不动杆菌感染的防控，从而改善鲍曼不动杆菌多重耐药和泛耐药的现状。
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公开(公告)号：CN115747202A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211580405.8
申请日：2022-12-07
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明公开了一种免疫原性细胞死亡的新型结核杆菌融合菌株的制备方法及应用，涉及生物技术领域。该免疫原性细胞死亡的新型结核杆菌融合菌株的制备方法包括以下步骤：(1)将结核分枝杆菌H37Ra菌株和卡介苗BCG菌株进行原生质体融合，得到新型结核杆菌融合菌株；(2)所述新型结核杆菌融合菌株经过超声微气泡物理损伤，得到所述免疫原性细胞死亡的新型结核杆菌融合菌株；所述超声微气泡物理损伤采用的微气泡材料为氟碳质相变钠米粒。本发明应用超声微气泡物理损伤技术，研制出了免疫原性细胞死亡的结核杆菌融合菌株，该菌株经蛋白提取和纯化，可以应用于制备结核病疫苗和抗结核药物。
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公开(公告)号：CN118359675A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410549991.2
申请日：2024-05-06
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种新型结核杆菌融合菌株活性蛋白衍生物的制备及其应用。本发明结合原生质体制备技术、水浴超声破碎物理损伤技术以及活性蛋白提取技术，提取得到活性蛋白衍生物，并将该蛋白衍生物接种于C57BL/6小鼠后不影响小鼠一般生长发育及生存时间，即在毒力水平方面，免疫原性细胞死亡的新型结核杆菌融合菌株与新型结核杆菌融合菌株相比较，更为安全可靠。由此可见，本发明提供的新型结核杆菌融合菌株活性蛋白衍生物为研制新型、安全和高效的结核病疫苗或生物制剂奠定基础，对结核病的有效防治或诊断具有重要的科学价值和社会意义。
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公开(公告)号：CN115976091A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211563847.1
申请日：2022-12-07
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明公开了Pup基因敲除的结核分枝杆菌H37Ra菌株的制备方法及应用，属于基因工程领域。上述制备方法包括以下步骤：(1)扩增Pup基因上下游同源臂，并将上下游同源臂构建到Cosmid质粒上，构建重组质粒；(2)将所述重组质粒转导λ噬菌体，构建重组噬菌体；(3)将所述重组噬菌体转染H37Ra菌株，制备Pup基因敲除的结核分枝杆菌H37Ra菌株。进一步通过小鼠体内实验研究，结果发现：本发明制备的Pup基因敲除的结核分枝杆菌H37Ra菌株可以显著降低结核分枝杆菌的感染，并且在小鼠体内表现出长效性和稳定性，可以作为结核病疫苗的潜在菌株。这为结核病发病机制的研究和抗结核药物的研发提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN111978381A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN202010860005.7
申请日：2020-08-25
申请人： 石河子大学
IPC分类号： C07K14/35 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/04 , A61P31/06
摘要： 本发明涉及一种结核分枝杆菌特异性T细胞表位多肽及应用，公开了表位肽P62的氨基酸序列为KAALTRTASNMNAAA，分子量为1490.71。本发明筛选出的表位肽P62与HLA分子之间具有高亲和力，该表位产生了较强抗原特异性的外周血单个核细胞增殖，同时该表位肽P62的敏感性为91.66％，特异性为46.87％，AUC值为0.649，具有较好的临床诊断价值。表位肽P62未见文献报道及研究，本发明的优点在于首次报道了表位肽P62用于结核病的血清学诊断，具有较高的敏感性和特异性。本发明表位肽P62的确定，可应用于T细胞表位肽疫苗的制备，为结核病特异诊断试剂和新型结核病表位疫苗的研发提供了潜在的候选表位多肽，在结核病特异性免疫预防和治疗领域中有着良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN118384267A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410550033.7
申请日：2024-05-06
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明公开了一种新型结核杆菌灭活全菌疫苗的制备及其应用，属于生物技术领域。所述新型结核杆菌灭活全菌疫苗的制备方法包括以下步骤：结核杆菌的原生质体悬液经间歇式超声处理，得到所述新型结核杆菌灭活全菌疫苗。并经实验验证，本发明制备得到的新型结核杆菌灭活全菌疫苗毒力水平降低，安全性初步验证为可靠，且诱导细胞免疫应答水平较结核杆菌菌株显著增强。本发明为研制特异、安全、高效的结核病疫苗奠定基础，对结核病的有效防治具有重要的科学价值和社会意义。
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公开(公告)号：CN112280729A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011278428.4
申请日：2020-11-16
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16‑3（以下简称Hsp16‑3）过表达的结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌（以下简称H37Ra菌）菌株的构建及其应用。首次利用电穿孔技术，将构建的大肠杆菌‑结核杆菌重组穿梭质粒载体pMV361‑Hsp16‑3，转入H37Ra菌，筛选并鉴定，确定成功构建的菌株，为Hsp16‑3基因过表达的H37Ra菌株。本发明构建的Hsp16‑3过表达的H37Ra菌，增强了Hsp16‑3基因的表达，将提升H37Ra菌对机体的免疫反应，为探索研究Hsp16‑3对H37Ra菌的致病性、免疫保护作用等方面的调控作用，以及新型结核病疫苗研发奠定基础。
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公开(公告)号：CN111848760A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010629222.5
申请日：2020-07-03
申请人： 石河子大学
摘要： 本发明涉及一种结核分枝杆菌特异性T细胞表位多肽及应用，公开了表位肽P39的氨基酸序列为LQGQWRGAAGTAAQA，分子量为1485.63。本发明筛选出的表位肽P39与HLA分子之间具有高亲和力，该表位产生了较强抗原特异性的外周血单个核细胞增殖，同时该表位肽P39的敏感性为75％，特异性为67.71％，AUC值为0.8435，具有较好的临床诊断价值。表位肽P39未见文献报道及研究，本发明的优点在于首次报道了表位肽P39用于结核病的血清学诊断，具有较高的敏感性和特异性。本发明表位肽P39的确定，可应用于T细胞表位肽疫苗的制备，为结核病特异诊断试剂和新型结核病表位疫苗的研发提供了潜在的候选表位多肽，在结核病特异性免疫预防和治疗领域中有着良好的开发应用前景。
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