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公开(公告)号：CN110951799A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911340672.6
申请日：2019-12-23
申请人： 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
摘要： 本发明提供了“一菌多酶”全细胞不对称合成(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸的方法，属于生物催化和酶工程领域。通过在大肠杆菌BL21（DE3）工程菌中同时表达L-苏氨酸转醛酶（PsLTTA）、乙醇脱氢酶（ApADH）和甲酸脱氢酶（CbFDH），实现(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸的不对称高效生物合成。本发明在常温常压下通过一步反应便可获得β-氨基醇类抗生素的关键手性砌块(2S，3R)-对甲砜基苯丝氨酸，同时解除了副产物乙醛对PsLTTA的抑制作用，为一种高效绿色生物合成途径。
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公开(公告)号：CN110904188A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911342288.X
申请日：2019-12-23
申请人： 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
摘要： 本发明公开了一种L-苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法，属于生物化学和酶工程领域。本发明取乙醛及乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均反应速率VOD340nm，以乙醛浓度为自变量x，VOD340nm为因变量y，得到回归方程y＝ax，以及乙醛标准曲线。转醛反应液、L-苏氨酸转醛酶突变体全细胞反应液，充分混匀反应结束后，离心除去细胞沉淀，取上清液和乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均速率VOD340nm；通过VOD340nm计算得到反应液中乙醛的浓度，以乙醛浓度的高低来筛选L-苏氨酸转醛酶突变体。本发明不受反应液中的杂质干扰，灵敏度和准确性高，重复性好，操作简便，便于推广应用。
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公开(公告)号：CN110951799B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201911340672.6
申请日：2019-12-23
申请人： 福州大学 , 福建昌生生物科技发展有限公司
摘要： 本发明提供了“一菌多酶”全细胞不对称合成(2S，3R)‑对甲砜基苯丝氨酸的方法，属于生物催化和酶工程领域。通过在大肠杆菌BL21（DE3）工程菌中同时表达L‑苏氨酸转醛酶（PsLTTA）、乙醇脱氢酶（ApADH）和甲酸脱氢酶（CbFDH），实现(2S，3R)‑对甲砜基苯丝氨酸的不对称高效生物合成。本发明在常温常压下通过一步反应便可获得β‑氨基醇类抗生素的关键手性砌块(2S，3R)‑对甲砜基苯丝氨酸，同时解除了副产物乙醛对PsLTTA的抑制作用，为一种高效绿色生物合成途径。
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公开(公告)号：CN110004134A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910425967.7
申请日：2019-05-21
申请人： 福州大学
摘要： 本发明涉及一种褐藻胶裂解酶突变体及应用，属于酶工程和基因工程领域，该突变体在序列SEQ ID NO.3基础上将第226位E突变为K，经过表达，突变体酶活提高1.11倍，粗酶液经过纯化后比活力较截短酶AlgL-T157N提高1.03倍；突变体最适温度55℃，在pH 6.0-8.0内保温1 h酶活力基本不变，具有较强pH稳定性；突变体对褐藻酸钠、Poly M和Poly G的催化效率Kcat/Km分别比AlgL-T157N提高10.22、8.59、2.97倍。本发明采用结构序列分析和软件辅助筛选相结合的方法，确定突变位点，通过PCR定点突变得到催化活性提高的突变体，为其进一步的工业化应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN109371001A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811408665.0
申请日：2018-11-23
申请人： 福州大学
摘要： 本发明提供一种功能性κ-卡拉胶寡糖的酶解制备方法，属于生物工程领域。以麒麟菜为原料采用高温水提法提取卡拉胶，利用发酵制备获得的κ-卡拉胶裂解酶降解卡拉胶制备κ-卡拉胶寡糖。本发明通过开发可生物降解卡拉胶多糖的κ-卡拉胶裂解酶，再利用酶工程技术取代传统的化学降解法制备κ-卡拉胶寡糖，使不易被人体吸收利用的高黏度多糖降解成富含生理活性的卡拉胶寡糖，以及一些小分子活性物质，实现红藻资源的高值化利用。
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公开(公告)号：CN118126971A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410373351.0
申请日：2024-03-29
申请人： 福州大学
摘要： 本发明公开了一种多环酮单加氧酶突变体及其在睾内酯合成中的应用，本发明通过分子改造方法获得多环酮单加氧酶突变体，提升酶活力，并通过与3‑甾酮‑C1，2位脱氢酶和羰基还原酶共表达，构建单细胞多酶催化体系，实现常温常压下合成睾内酯。该生物酶法合成睾内酯具有操作简单、污染小、合成效率高、无甾体副产物生成等优势，是一种全新的睾内酯合成技术。
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公开(公告)号：CN111073821B
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202010113602.3
申请日：2020-02-24
申请人： 福州大学
摘要： 本发明涉及一种高产洛伐他汀不产桔霉素红色红曲霉菌株的构建方法，包括以下步骤：（1）构建ctnR基因敲除质粒pGKO2‑Neo‑up‑ctnR‑dn；（2）构建ctnR基因敲除菌株GN‑01△ctnR；（3）敲除菌株GN‑01△ctnR的验证；（4）构建mokC基因过表达质粒；（5）在基因敲除菌株GN‑01△ctnR中导入mokC基因过表达质粒，获得mokC过表达菌株；（6）mokC过表达菌株的验证。本发明通过代谢产物验证，构建的GN‑01△ctnR基因缺失菌株已不产桔霉素，GN‑01△ctnR‑mokC过表达菌株产Monacolin K的能力较野生菌株提高了30%，达到267 mg/L。
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公开(公告)号：CN115786292B
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202211028698.9
申请日：2022-08-25
申请人： 福州大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR及其在制备去氢表雄酮中的应用。本发明将3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR与葡萄糖脱氢酶BtGDH在大肠埃希氏菌中共表达，并以共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂协同酯酶Z03共同催化3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮合成去氢表雄酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性，可以在6 h以内完全转化32.8 g/L的3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮生成目标产物去氢表雄酮，无需添加有机溶剂且无副产物产生，经过分离纯化，产物回收率高达95%以上，说明该生物催化剂是去氢表雄酮绿色合成的高效催化剂。
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公开(公告)号：CN113430216B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202110845214.9
申请日：2021-07-26
申请人： 福州大学
摘要： 本发明提供一种苯丙酮单加氧酶，其氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得，并公开基于该苯丙酮单加氧酶的不对称生物催化合成亚砜类药物的技术方法。本发明通过基因挖掘筛选获得来源于Limnobacter sp.的苯丙酮单加氧酶基因，采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株，通过分子改造技术实现酶活力和立体选择性的提高。同时构建了单加氧酶突变体与不同脱氢酶的共表达菌株。以奥美拉唑硫醚为原料，采用全细胞或酶蛋白催化的方法，不对称催化合成光学纯埃索美拉唑。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物，没有副产物奥美拉唑砜，同时环境友好，是一种绿色生物催化合成途径。
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公开(公告)号：CN105566268B
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201610130764.1
申请日：2016-03-09
申请人： 福州大学
IPC分类号： C07D309/30
摘要： 本发明属于药物的提取纯化领域，具体涉及一种红曲洛伐他汀的纯化制备方法。先采用硅胶柱对红曲霉液态发酵液的上清液进行分离，依次选用乙酸乙酯、乙酸乙酯和甲醇按体积比2:1混合的溶剂、乙酸乙酯和甲醇按体积比3:1混合的溶剂进行梯度洗脱，得溶解液；然后再采用LH20柱对溶解液进行分离，依次选用超纯水、20%（v/v）甲醇溶液、50%（v/v）甲醇溶液进行梯度洗脱，得到纯化的洛伐他汀溶液。本发明避免使用毒性较大的溶剂，分离效率明显提高（纯度可达95%），解决了工艺复杂、成本高的问题，适于工业化生产。
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