一种提高微藻生物量及其生理活性产物产量的方法

    公开(公告)号:CN100344746C

    公开(公告)日:2007-10-24

    申请号:CN200510080859.9

    申请日:2005-06-28

    发明人: 陈必链 王娟 黄键

    IPC分类号: C12N1/12 C12N13/00

    摘要: 本发明涉及采用超声波处理提高微藻生物量及其生理活性产物产量的方法。本发明参照均匀设计表实验方案,通过均匀设计优化,运用DPS软件进行回归分析并建立相应的模型,确定在微藻生长过程不同的时间段所采用的超声波处理微藻时的电流、处理时间和脉冲时间的剂量,具体是:将微藻培养液装于250ml三角瓶中培养,于培养周期中的1-6天内某一时间段,用电流为21-39%、脉冲5.0-9.5s和处理时间45-205s的某一因素值进行超声波处理,其生物量、胞外多糖、藻胆蛋白、不饱和脂肪酸的含量分别有较大的提高。本发明所采用的超声波处理处理方法,具有设备简单、方法易行、操作安全,可使微藻生物量、胞外多糖、藻胆蛋白、不饱和脂肪酸等生理活性产物产量提高10%-60%,有较大推广价值。

    一种采用微波法提高微藻生物量的方法

    公开(公告)号:CN101016514A

    公开(公告)日:2007-08-15

    申请号:CN200710008489.7

    申请日:2007-01-26

    发明人: 陈必链 余颖 黄键

    IPC分类号: C12N1/12 C12N13/00

    摘要: 本发明涉及采用微波处理提高微藻生物量的方法。本发明参照均匀设计表实验方案,通过均匀设计优化,运用DPS软件进行回归分析并建立相应的模型,确定在微藻生长过程不同的时间段所采用的微波处理微藻时的功率、处理时间。具体是:吸取藻液,注入底部平整的平皿中,调整微波炉功率及处理时间为功率:162~900w,处理时间:12s~60s,处理期间用冰水浴防止温度过高;将处理过的藻液接入新鲜培养基中,培养至对数早期进行分析测试。若多次辐射藻细胞,则将第一次辐射后的藻培养至对数早期,从中取10mL再次进行辐射,第二次、第三、四次同此法。本发明所采用的方法,具有设备简单、方法易行、操作安全,可使产物产量提高10%-60%,有较大推广价值。

    激光-微波诱变选育富硒紫球藻变株的方法

    公开(公告)号:CN1563375A

    公开(公告)日:2005-01-12

    申请号:CN200410039822.7

    申请日:2004-03-19

    发明人: 陈必链 黄键 王娟

    IPC分类号: C12N13/00 C12N1/12

    摘要: 本发明涉及利用激光和微波诱变结合富硒驯化,筛选富硒紫球藻变株的方法。首先利用微波(功率600W,脉冲频率2450MHz)进行20-60s辐射处理,或再利用YAG(λ=1060nm)激光对紫球藻进行10-80s辐照;经处理的紫球藻置于浓度为15-500mg/L亚硒酸钠的培养液中培养,获得富硒紫球藻突变株。本发明通过诱变和富硒驯化方法,选育出富硒紫球藻变株,该突变株对无机硒的转化率高,当培养液的硒浓度为80mg/L,藻粉的硒含量为4500μg/g;所采用的激光、微波诱变设备简单、操作安全、诱变效果远较传统的理化因子好,在微藻藻种选育中有较大的推广价值。动物实验表明,富硒紫球藻及其富硒多糖对实验动物血糖、血脂、肿瘤细胞的调节、抗流感病毒等作用明显。

    一种封闭式光生物反应器藻细胞无损输送系统

    公开(公告)号:CN103436431A

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201310348303.8

    申请日:2013-08-12

    摘要: 本发明涉及一种封闭式光生物反应器藻细胞无损循环输送系统,特别是一种涉及针对封闭式藻类光生物反应器系统采用压力提升式的藻细胞无损循环输送系统。该系统由高位储液槽、低位缓冲槽、耐压罐、管道式光生物反应器、空气压缩机和智能水位控制单元组成,其中高位储液槽位于耐压罐的上方,高位储液槽经进液口、耐压罐经出液口通过输液管1相连;低位缓冲槽位于耐压罐的次上方,低位缓冲槽经出液口、耐压罐经进液口通过带有电子阀的输液管2相连;空气压缩机通过输气管与耐压罐相连,输气管开口于耐压罐的内上部。采用本发明所述的系统,对藻细胞无损伤,收获时藻的生物量较采用泵循环的管道式光生物反应器的生物量提高70%。

    一种基于固定化方法的脂肪酶固定方法及其在阿魏酸酯化反应中的应用

    公开(公告)号:CN101712951A

    公开(公告)日:2010-05-26

    申请号:CN200910112638.3

    申请日:2009-10-15

    IPC分类号: C12N11/08 C12P33/00

    摘要: 本发明涉及一种采用大孔隙离子交换树脂D403固定脂肪酶的方法并用该酶催化酯化反应。技术方案是将离子交换树脂,用热水浸洗;水洗后,先后使用NaOH溶液、NaCl溶液、盐酸预处理,得到大孔吸附树脂备用;将脂肪酶粉溶于磷酸盐缓冲液中,离心弃沉淀后,取上清酶液并加入大孔吸附树脂,置于恒温振荡摇床中平衡吸附;过滤后得大孔吸附树脂固定化的脂肪酶。阿魏酸酯化反应可以采用双有机试剂异辛烷/丁酮或以纯离子液1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([Omim]PF6)为溶剂;采用本发明所述的方法,吸附树脂材料易得,同时以离子交换树脂为载体的固定化的脂肪酶在阿魏酸酯化反应中,阿魏酸转化为阿魏酸酯的转化率最高可达93%,具有良好的应用前景。

    一种微藻藻红蛋白分离纯化技术

    公开(公告)号:CN1587275A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410063071.2

    申请日:2004-07-13

    IPC分类号: C07K14/405 C07K1/36

    摘要: 本发明涉及一种采用蒸馏水浸提、硫酸铵分级沉淀和离子交换柱层析分离纯化微藻藻红蛋白的技术。冻干藻粉及藻泥加蒸馏水于4℃过夜浸提、高速冷冻离心,加入固体硫酸铵至一定的饱和度时进行分级沉淀,磷酸钠缓冲液平衡透析,离心20min后,采用离子交换柱层析将上清液一步纯化,得到藻红蛋白。本发明通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析一步纯化得到藻红蛋白,具有纯化效果好、上样量大、样品得率较高且可用于放大生产等特点,所分离得藻红蛋白纯度达到4.85,总收率52%,聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示一条带。

    一种利用藻油制备富含ω-3脂肪酸磷脂的方法

    公开(公告)号:CN105296556A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510873970.7

    申请日:2015-12-03

    摘要: 本发明涉及一种利用藻油制备富含ω-3脂肪酸磷脂的方法。取微藻藻粉,以乙醇作为萃取剂,萃取获得藻油;在藻油中加入食品级丙酮,混匀,30min后离心得藻油磷脂粗品;利用硅胶色谱柱分离上述藻油磷脂粗品得到纯化的磷脂酰胆碱;将上述提取的藻油磷脂粗品或磷脂酰胆碱与乙醇混合,再加入脂肪酶和水,醇解反应得到富含ω-3脂肪酸的功能性溶血磷脂液;功能性溶血磷脂液与食品级正己烷混合提取3次,收集乙醇相,去除乙醇和水后获得提纯后的富含ω-3脂肪酸的功能性溶血磷脂。采用本发明方法,溶血磷脂中ω-3脂肪酸的总含量可达40%以上。以磷脂酰胆碱为合成原料时,酶催化反应后溶血磷脂中ω-3脂肪酸的总含量可达60%以上。

    基于农用复合肥的用于微藻培养的工业培养基的制备

    公开(公告)号:CN101451106A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200810072521.2

    申请日:2008-12-31

    IPC分类号: C12N1/12

    摘要: 本发明涉及采用以农用复合肥的可循环使用的用于微藻培养的工业培养基的配制。本发明采用技术方案是:采用N、P、K含量不同的农用复合肥作为培养基的组成成分,在添加柠檬酸铁、工业盐、农用尿素、碳酸氢钠、混合的农用复合肥后,配制出适用于微藻工业化培养的初始液体培养基,同时,将回收培养基残液,经与新配制的初始液体培养基参合,制成可循环使用的再生培养基。使用本发明所述的培养基,所收获的微藻生物量和代谢产物产量有不同程度的提高,所采用的农用复合肥替代微藻培养配方中的化学纯或分析纯成分,具有方法易行、操作安全,可大幅度降低生产成本30%-60%。

    一种微藻藻红蛋白分离纯化方法

    公开(公告)号:CN1243015C

    公开(公告)日:2006-02-22

    申请号:CN200410063071.2

    申请日:2004-07-13

    IPC分类号: C07K14/405 C07K1/36

    摘要: 本发明涉及一种采用蒸馏水浸提、硫酸铵分级沉淀和离子交换柱层析分离纯化微藻藻红蛋白的方法。冻干藻粉及藻泥加蒸馏水于4℃过夜浸提、高速冷冻离心,加入固体硫酸铵至一定的饱和度时进行分级沉淀,磷酸钠缓冲液平衡透析,离心20min后,采用离子交换柱层析将上清液一步纯化,得到藻红蛋白。本发明通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析一步纯化得到藻红蛋白,具有纯化效果好、上样量大、样品得率较高且可用于放大生产等特点,所分离得藻红蛋白纯度达到4.85,总收率52%,聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示一条带。

    一种协同提取湿藻体藻红蛋白和油脂的方法

    公开(公告)号:CN111978383A

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN202010914299.7

    申请日:2020-09-03

    摘要: 本发明公开了一种协同提取湿藻体藻红蛋白和油脂的方法,包括如下步骤:S1、微藻培养;S2、湿藻体收集;S3、三相分离协同提取藻红蛋白和油脂;S4、油脂的收集与提纯;S5、藻红蛋白的收集与提纯;S6、藻红蛋白干燥。本发明以湿藻体为原料,无需对藻细胞进行破壁,采用三相分离技术,可一步协同提取藻红蛋白和含ARA与EPA藻油,通过本发明获得的藻油提取率最高可为98%,藻红蛋白纯度A565/A280最高可为6,具有短时高效、绿色安全和节能的优点。