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公开(公告)号：CN117165500A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202110998239.2
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及基因工程和微生物技术领域，具体涉及一种蛋白突变体在构建高产氨基酸的重组菌中的应用。本发明发现了BBD29_15155基因编码蛋白的第382位的突变在提高氨基酸(尤其包括L‑谷氨酸和赖氨酸)的产量中的突出作用，利用该发现可以构建和筛选高产氨基酸及其衍生物的微生物，有利于提高氨基酸及其衍生物的产量，为其工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116814514A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202110996880.2
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/31 , C07K14/245 , C12P13/08 , C12R1/19
摘要： 本发明提供一种提高大肠杆菌L‑赖氨酸发酵产量的方法，所述方法包括增强大肠杆菌中的dctA基因，获得的基因增强菌株用于L‑赖氨酸发酵生产。本发明首次发现通过增强大肠杆菌中的dctA基因，获得的基因增强菌株可用于提高L‑赖氨酸发酵产量。增强方式可以采用代谢工程领域的常规技术手段，如启动子调控区的改变，增加基因拷贝数，或氨基酸序列的改变。本发明将C4‑二羧酸转运蛋白突变体应用于大肠杆菌发酵生产赖氨酸，其赖氨酸产量明显提升。
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公开(公告)号：CN115851688A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202111117369.7
申请日：2021-09-23
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种TrpCF突变体及其应用。本发明提供一种trpCF突变体，所述突变体的氨基酸序列含有，如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的第421位甘氨酸发生突变后的氨基酸序列。具体地，本发明提供的突变体的氨基酸序列含有，如SEQ ID No.1所示氨基酸序列的第421位由甘氨酸突变为L‑丝氨酸或L‑赖氨酸后的氨基酸序列。本发明提供的突变体能够合理弱化色氨酸合成途径，进而提高谷氨酸的产量和转化率，同时还能够保证菌株的生长性能。表达本发明所述突变体的重组微生物，具有较高的谷氨酸产量和糖酸转化率，同时菌株的生长性能良好。
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公开(公告)号：CN117165565A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202110998231.6
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及苏氨酸脱水酶突变体、产支链氨基酸的重组微生物及其应用。本发明提供苏氨酸脱水酶突变体，以谷氨酸棒杆菌野生型苏氨酸脱水酶为参考序列，其含有第54位、第131位、第171位、第218位、第243位、第381、第383位突变中的任意一种或至少两种的组合。该突变体能够有效解除异亮氨酸对苏氨酸脱水酶的反馈抑制，显著提高在高浓度异亮氨酸存在时苏氨酸脱水酶的催化活性，提高微生物的异亮氨酸等支链氨基酸的合成能力、产量和转化率。本发明提供的表达该突变体的重组微生物能够高效地合成异亮氨酸，异亮氨酸的产量和转化率均显著提高。
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公开(公告)号：CN116814514B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202110996880.2
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/31 , C07K14/245 , C12P13/08 , C12R1/19
摘要： 本发明提供一种提高大肠杆菌L‑赖氨酸发酵产量的方法，所述方法包括增强大肠杆菌中的dctA基因，获得的基因增强菌株用于L‑赖氨酸发酵生产。本发明首次发现通过增强大肠杆菌中的dctA基因，获得的基因增强菌株可用于提高L‑赖氨酸发酵产量。增强方式可以采用代谢工程领域的常规技术手段，如启动子调控区的改变，增加基因拷贝数，或氨基酸序列的改变。本发明将C4‑二羧酸转运蛋白突变体应用于大肠杆菌发酵生产赖氨酸，其赖氨酸产量明显提升。
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公开(公告)号：CN117165546A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202111115579.2
申请日：2021-09-23
申请人： 胡丹
IPC分类号： C12N9/10 , C12N15/54 , C12N9/02 , C12N1/21 , C12N15/77 , C12P13/08 , C12P13/06 , C12P13/12 , C12R1/15
摘要： 本发明提供一种提高L‑氨基酸发酵产量的方法，丙酮酸脱氢酶和支链氨基酸转氨酶在提高L‑氨基酸发酵产量方面至关重要，通过对两种酶进行改造，并以谷氨酸棒状杆菌MHZ‑1200‑5为出发菌验证aceEP910S突变体、aceEdel‑1517‑1524突变体和ilvEF203E突变体对亮氨酸产量的影响。结果表明，aceEP910S突变体、aceEdel‑1517‑1524突变体和/或ilvEF203E突变体使得亮氨酸的产量大幅提高，获得一株L‑亮氨酸高产的菌株，该菌株能够实现发酵过程中L‑亮氨酸的高效积累，L‑亮氨酸可达10.3g/L，较出发菌提高1.4倍。本发明为提高L‑氨基酸发酵产量提供有力工具。
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公开(公告)号：CN117165545A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202110996580.4
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及α‑异丙基苹果酸合酶突变体、重组微生物及其应用。本发明提供α‑异丙基苹果酸合酶突变体，以谷氨酸棒杆菌野生型α‑异丙基苹果酸合酶为参考序列，其含有第87位脯氨酸被除脯氨酸以外的氨基酸取代的突变。该突变体能够使微生物的亮氨酸合成能力显著下降，减少发酵过程中亮氨酸的积累，同时使微生物合成缬氨酸、异亮氨酸的能力显著增强，缬氨酸、异亮氨酸的产量和转化率显著提高。本发明提供的重组微生物能够高效地合成缬氨酸，缬氨酸产量和转化率均显著提高，且具有较好的生长性能，同时副产物亮氨酸的积累量显著降低，更有利于目标产物的分离纯化。
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公开(公告)号：CN116656580A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202111117368.2
申请日：2021-09-23
申请人： 胡丹
摘要： 本发明提供一种高产天冬氨酸衍生物的重组菌及其制备方法与应用。所述重组菌是通过增强谷氨酸棒杆菌中的aspA基因以及与乙醛酸循环途径相关的基因(aceA、aceB)得到的。本发明通过强化天冬氨酸铵离子裂合酶(由aspA基因编码)活性，同时强化乙醛酸循环，促进天冬氨酸家族氨基酸(如L‑赖氨酸、L‑苏氨酸)的高效生产，同时菌体生长得以改善，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117165540A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202110998221.2
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种降低氨基酸生产菌株中L‑亮氨酸的方法与应用。本发明的方法使氨基酸生产菌株表达异丙基苹果酸脱氢酶突变体，所述异丙基苹果酸脱氢酶突变体以氨基酸生产菌株野生型异丙基苹果酸脱氢酶的氨基酸序列为参考序列，含有第324位脯氨酸被其他氨基酸取代的突变。本发明的方法显著降低L‑谷氨酸、赖氨酸或脯氨酸工业生产菌株中L‑亮氨酸的产量，提高了谷氨酸、赖氨酸或脯氨酸的产量及转化率，降低了工业化提取谷氨酸、赖氨酸或脯氨酸时分离亮氨酸的成本。
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公开(公告)号：CN117165499A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202110998236.9
申请日：2021-08-27
申请人： 胡丹
摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种降低氨基酸生产菌株中L‑脯氨酸的方法与应用。本发明的方法使氨基酸生产菌株表达脯氨酸特异性透过酶突变体，所述脯氨酸特异性透过酶突变体以氨基酸生产菌株野生型脯氨酸特异性透过酶的氨基酸序列为参考序列，含有第194位甘氨酸被其他氨基酸取代的突变。本发明的方法显著降低L‑谷氨酸或赖氨酸工业生产菌株中L‑脯氨酸的产量，提高了谷氨酸或赖氨酸的产量及转化率，降低了工业化提取谷氨酸或赖氨酸时分离脯氨酸的成本。
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