公开(公告)号：CN113862254B

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202010607601.4

申请日：2020-06-30

申请人： 苏州桑尼赛尔生物医药有限公司

发明人： 彭作翰 ,  李玏 ,  张蕊 ,  刘瑗 ,  豆亚丽 ,  叶亚平

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/6853 ,  C12N15/90 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  A61K39/00 ,  A61P35/00 ,  A61P35/02

摘要： 本发明涉及非病毒式定点敲入方法及其在CAR‑T细胞治疗中的应用。具体地，本发明利用修饰的引物进行模版DNA的PCR扩增，并且使用修饰的模版DNA作为供体DNA进行基因定点敲入，其中所述修饰的引物包含：i)5’‑硫代磷酸(PS)修饰连同5’‑生物素‑三甘醇(Biotin‑TEG)修饰；或ii)5’‑锁核酸(LNA)修饰。相较于先前方法，本发明的方法实现了更高效的精确转导方式、更简单的CAR‑T细胞制备方式、更安全且更持久的表达以及更多变的设计。

公开(公告)号：CN114317607B

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202111663968.9

申请日：2021-12-31

申请人： 苏州桑尼赛尔生物医药有限公司

发明人： 彭作翰 ,  刘佳玫 ,  豆亚丽 ,  刘敏 ,  李玏

IPC分类号： C12N15/864 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  A61K35/17 ,  A61K39/00 ,  A61K48/00 ,  A61P31/18 ,  A61P35/00 ,  A61P35/02 ,  A61P37/02

摘要： 本发明涉及融合一代靶向CD7 CAR和二代靶向BCMA的双靶点通用CAR‑T细胞及制备方法。所述方法包括：将基因编辑物质递送至T细胞以剪切TRAC和CD7基因组DNA或剪切TRAC、CD7和B2M基因组DNA，以及使用重组腺相关病毒递送模版DNA以将靶向CD7‑BCMA双靶点CAR基因定点整合入TRAC、CD7或B2M基因组位点。本发明的方法更安全，具有高细胞得率、简易的工艺步骤和安全的基因编辑方式，并且所得的双特异通用型CAR‑T细胞具有更好的疗效。