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公开(公告)号：CN103923957A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410192536.8
申请日：2014-05-08
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P17/12
CPC分类号： C12P17/12 , C12P41/002
摘要： 本发明涉及一组重组酮还原酶的蛋白序列，以及利用该系列酮还原酶制备手性N-保护哌啶醇的方法，其以N-保护哌啶酮为底物，使该底物在重组酮还原酶、辅因子及异丙醇的存在下发生不对称还原反应生成手性N-保护哌啶醇，所述不对称还原反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液中、温度20℃~45℃下进行。本发明方法通过采用特定的重组酮还原酶来代替现有生物法所用的来源不稳定的催化剂，成功制备出光学纯度高的手性N-保护哌啶醇。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，特别是，反应底物的浓度可提高至10%以上，大大提高了制备手性N-保护哌啶醇的效率和降低了反应的成本，具有重要的实际工业应用价值。
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公开(公告)号：CN102925501A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210465009.0
申请日：2012-11-19
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
摘要： 本发明涉及一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法，其以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物，使该底物在生物催化剂、辅因子及氢供体的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，生物催化剂为重组酮还原酶，氢供体为异丙醇，所述不对称还原反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液和甲苯的混合体系中进行，水相缓冲液与甲苯的体积比为4~20:1。本发明方法解决了传统生物法中需要额外加入辅酶体系、有机溶剂加入过多、催化效率低以及成本高的问题。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，反应底物的浓度可以提高至40%，大大提高了制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的效率和降低了反应的成本。
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公开(公告)号：CN104404098A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410776657.7
申请日：2014-12-15
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P17/00
摘要： 本发明涉及一种硫辛酸的生物制备方法，其通过使硫辛酸酯在生物催化剂存在下、在pH8~10的水相体系中以及温度30~50℃下发生水解反应生成硫辛酸，所述生物催化剂为脂肪酶或蛋白酶，其中：脂肪酶选自来源于米黑根毛酶、南极假丝酵母、洋葱假单胞菌、荧光假单胞菌、嗜热真菌、枯草杆菌、腐皮镰刀菌、茄病镰刀菌的脂肪酶中的一种；蛋白酶选自来源于枯草杆菌(Bacillussubtilis)、黑曲霉(Aspergillusniger)的蛋白酶中的一种。
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公开(公告)号：CN102605011A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210069347.2
申请日：2012-03-16
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法，其以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物，使该底物在生物催化剂和氢供体的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，特别是，所述生物催化剂为酮还原酶KRED102，所述氢供体为异丙醇，所述不对称还原反应在pH为5.0~9.0的水相缓冲液中进行，并且反应体系中添加有聚乙二醇400作为底物分散剂以及二价金属离子作为酶活力增强剂。本发明方法通过添加廉价且来源广泛的辅料，有效地改进了传统酶催化生产过程中底物浓度低、酶反应耗时长等缺点，且操作简单，特别适合在制药工业中推广应用。
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公开(公告)号：CN102978251A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210508084.0
申请日：2012-12-03
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P13/04
摘要： 本发明涉及生物制药和生物化工领域，具体涉及一种L-叔亮氨酸的生产方法，所述方法由L-亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶酶法合成L-叔亮氨酸。酶催化步骤中酶投料量为底物的4%(w/w)，辅酶投料量为底物的0.2%(w/w)，时空产率为100g/d/L，产品纯度>98%，光学纯度>99%。本发明与传统的制备工艺相比，有效减少了催化剂酶的用量，产品纯度高、产率高，工艺流程简单，对设备无特殊要求，适用于工业化生产，产品可广泛应用于化工中间体和医药中间体。
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公开(公告)号：CN102605011B
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201210069347.2
申请日：2012-03-16
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P7/62
摘要： 本发明涉及一种(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的生物制备方法，其以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物，使该底物在生物催化剂和氢供体的存在下发生不对称还原反应生成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，特别是，所述生物催化剂为酮还原酶KRED102，所述氢供体为异丙醇，所述不对称还原反应在pH为5.0~9.0的水相缓冲液中进行，并且反应体系中添加有聚乙二醇400作为底物分散剂以及二价金属离子作为酶活力增强剂。本发明方法通过添加廉价且来源广泛的辅料，有效地改进了传统酶催化生产过程中底物浓度低、酶反应耗时长等缺点，且操作简单，特别适合在制药工业中推广应用。
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公开(公告)号：CN103276027A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310173088.2
申请日：2013-05-10
申请人： 苏州汉酶生物技术有限公司
IPC分类号： C12P17/12
CPC分类号： C12P17/12 , C12P41/002
摘要： 本发明涉及一种手性N-保护哌啶醇的生物制备方法，其以N-保护哌啶酮为底物，使该底物在重组酮还原酶、辅因子及异丙醇的存在下发生不对称还原反应生成手性N-保护哌啶醇，所述不对称还原反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液中、温度25℃~45℃下进行。本发明方法通过采用特定的重组酮还原酶来代替现有生物法所用的来源不稳定的催化剂，成功制备出光学纯度高的手性N-保护哌啶醇。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，特别是，反应底物的浓度可以提高至20%，大大提高了制备手性N-保护哌啶醇的效率和降低了反应的成本，具有重要的实际工业应用价值。
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