一种全人源重组CD40L单抗Fab片段及其制备方法

    公开(公告)号:CN106967171B

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN201710099395.9

    申请日:2017-02-23

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种全人源重组CD40L单抗Fab片段及其制备方法专利申请。所述Fab片段包括重链Fd与轻链;表达制备Fab片段时,在重链Fd的N端增加信号肽PelB,C端连接蛋白酶TEV酶切位点和组氨酸融合标签;在轻链的N端增加信号肽OmpA,然后构建与带有双启动子的大肠杆菌表达载体pETDuet‑1载体进行连接,构建重组表达载体,并进一步表达制备Fab片段。本申请通过对Fab片段进行优化,结合对宿主细胞、表达载体、表达条件和纯化条件的改造及优化,能够较为快速的制备Fab片段,具有纯度高、成本低、效果稳定等技术优势,对于相关疾病的预防控制具有较好的应用价值。

    具有催化活性的人源尿酸氧化酶及其应用

    公开(公告)号:CN111269899A

    公开(公告)日:2020-06-12

    申请号:CN202010095288.0

    申请日:2020-02-17

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于蛋白质工程技术领域,具体涉及具有催化活性的人源尿酸氧化酶,编码所述人源尿酸氧化酶的基因序列,上述人源尿酸氧化酶的制备方法,及其在用于降低尿酸的药物制备中的应用。该酶的序列为SED ID NO:1所示序列进行若干位点氨基酸或氨基酸残基替换所得的重组氨基酸序列,所述替换至少包含8个位点氨基酸或氨基酸残基的替换。本发明所述人源尿酸氧化酶免疫原性较低,经过动物学验证,可切实有效的降低体内尿酸值,从而为制备低免疫原性甚至无免疫原性的降低尿酸的药物制剂奠定基础。

    一种全人源重组CD40L单抗Fab片段及其制备方法

    公开(公告)号:CN106967171A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710099395.9

    申请日:2017-02-23

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种全人源重组CD40L单抗Fab片段及其制备方法专利申请。所述Fab片段包括重链Fd与轻链;表达制备Fab片段时,在重链Fd的N端增加信号肽PelB,C端连接蛋白酶TEV酶切位点和组氨酸融合标签;在轻链的N端增加信号肽OmpA,然后构建与带有双启动子的大肠杆菌表达载体pETDuet‑1载体进行连接,构建重组表达载体,并进一步表达制备Fab片段。本申请通过对Fab片段进行优化,结合对宿主细胞、表达载体、表达条件和纯化条件的改造及优化,能够较为快速的制备Fab片段,具有纯度高、成本低、效果稳定等技术优势,对于相关疾病的预防控制具有较好的应用价值。

    一种提高Fab抗体表达量的方法

    公开(公告)号:CN106967658B

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN201710099209.1

    申请日:2017-02-23

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种基因工程中提高Fab抗体表达量的方法。该方法包括:构建重组质粒pVEGF‑Fab,制备特定的蛋白酶缺陷性细胞突变株(△pepN、△DegQ、△dcp和△pepP),转化,诱导表达Fab抗体等步骤。本申请对于宿主细胞株的改造较为特殊和新颖,所制备宿主细胞株由于特定蛋白酶缺失,可较好解除对Fab表达后抑制或降解作用,从而提高Fab表达量,因而对于特定的Fab抗体表达制备具有较好地应用价值,同时也为其他抗体蛋白表达和制备提供了较好的借鉴和参考,因而具有较好的实用价值和科研意义。

    一种抗PD-L1单克隆抗体以及在制备抗癌药物方面的应用

    公开(公告)号:CN111018989A

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201911288345.0

    申请日:2019-12-16

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明公开了一种抗PD-L1单克隆抗体,通过使用PD-L1蛋白免疫小鼠,确定免疫成功后,分离出小鼠脾脏,提取总RNA,反转录为cDNA,通过PCR扩增出抗体轻、重链基因,然后构建单链抗体噬菌体库,通过筛选获得目标抗体。本发明从噬菌体抗体库筛选出的抗PD-L1单克隆抗体对PD-L1具有良好的亲和力,并能够抑制PD-L1和PD-1的结合。该抗PD-L1单克隆抗体进一步人源化后作为免疫检查点抑制剂,可用于癌症及感染性疾病的治疗。

    具有催化活性的人源尿酸氧化酶及其应用

    公开(公告)号:CN111269899B

    公开(公告)日:2023-01-31

    申请号:CN202010095288.0

    申请日:2020-02-17

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于蛋白质工程技术领域,具体涉及具有催化活性的人源尿酸氧化酶,编码所述人源尿酸氧化酶的基因序列,上述人源尿酸氧化酶的制备方法,及其在用于降低尿酸的药物制备中的应用。该酶的序列为SED ID NO:1所示序列进行若干位点氨基酸或氨基酸残基替换所得的重组氨基酸序列,所述替换至少包含8个位点氨基酸或氨基酸残基的替换。本发明所述人源尿酸氧化酶免疫原性较低,经过动物学验证,可切实有效的降低体内尿酸值,从而为制备低免疫原性甚至无免疫原性的降低尿酸的药物制剂奠定基础。

    一种提高Fab抗体表达量的方法

    公开(公告)号:CN106967658A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710099209.1

    申请日:2017-02-23

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种基因工程中提高Fab抗体表达量的方法。该方法包括:构建重组质粒pVEGF‑Fab,制备特定的蛋白酶缺陷性细胞突变株(△pepN、△DegQ、△dcp和△pepP),转化,诱导表达Fab抗体等步骤。本申请对于宿主细胞株的改造较为特殊和新颖,所制备宿主细胞株由于特定蛋白酶缺失,可较好解除对Fab表达后抑制或降解作用,从而提高Fab表达量,因而对于特定的Fab抗体表达制备具有较好地应用价值,同时也为其他抗体蛋白表达和制备提供了较好的借鉴和参考,因而具有较好的实用价值和科研意义。

    一种抗PD-L1单克隆抗体以及在制备抗癌药物方面的应用

    公开(公告)号:CN111018989B

    公开(公告)日:2021-03-23

    申请号:CN201911288345.0

    申请日:2019-12-16

    申请人: 郑州大学

    摘要: 本发明公开了一种抗PD‑L1单克隆抗体,通过使用PD‑L1蛋白免疫小鼠,确定免疫成功后,分离出小鼠脾脏,提取总RNA,反转录为cDNA,通过PCR扩增出抗体轻、重链基因,然后构建单链抗体噬菌体库,通过筛选获得目标抗体。本发明从噬菌体抗体库筛选出的抗PD‑L1单克隆抗体对PD‑L1具有良好的亲和力,并能够抑制PD‑L1和PD‑1的结合。该抗PD‑L1单克隆抗体进一步人源化后作为免疫检查点抑制剂,可用于癌症及感染性疾病的治疗。