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公开(公告)号：CN102373301B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201110386922.7
申请日：2011-11-29
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 聂福平
摘要： 本发明涉及动物疫病分子生物学检测方法及检测试剂领域，具体涉及一种猪传染性胃肠炎病毒等温扩增技术(NASBA)快速检测用引物、试剂盒及其检测方法。本发明根据猪传染性胃肠炎病毒的基因序列，用ClustalW进行多重比对，分析序列的保守区，采用Primer5.0引物设计软件，分别设计引物和探针，可特异性的实现快速对猪传染性胃肠炎病毒的检测与鉴别。配制各种反应溶液组成相应的检测试剂盒。利用本发明的试剂盒具有作简便，特异性强、灵敏度高、可重复性高，且没有复杂的后处理，适用性广等优点。
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公开(公告)号：CN102373301A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110386922.7
申请日：2011-11-29
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 聂福平
摘要： 本发明设涉及动物疫病分子生物学检测方法及检测试剂领域，具体涉及一种猪传染性胃肠炎病毒等温扩增技术(NASBA)快速检测用引物、试剂盒及其检测方法。本发明根据猪传染性胃肠炎病毒的基因序列，用ClustalW进行多重比对，分析序列的保守区，采用Primer5.0引物设计软件，分别设计引物和探针，可特异性的实现快速对猪传染性胃肠炎病毒的检测与鉴别。配制各种反应溶液组成相应的检测试剂盒。利用本发明的试剂盒具有作简便，特异性强、灵敏度高、可重复性高，且没有复杂的后处理，适用性广等优点。
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公开(公告)号：CN102367493A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110375835.1
申请日：2011-11-23
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 聂福平
摘要： 本发明设涉及动物疫病分子生物学检测方法及检测试剂领域，具体涉及一种动物TorqueTeno病毒环介导等温扩增技术快速检测用引物、试剂盒及其检测方法。本发明根据动物TorqueTeno病毒的两种不同血清型基因序列，用ClustalW进行多重比对，分析序列的保守区，采用LAMP引物设计软件，分别设计内引物和外引物，均可特异性的实现快速对TTV1和TTV2血清型的检测与鉴别。本发明公开了一种快速、灵敏度高、特异性强、操作简便、设备要求低、省时省力并且易于观察结果的环介导等温扩增技术对TorqueTeno病毒进行检测的方法，没有复杂的后处理，适用性广。
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公开(公告)号：CN102367493B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201110375835.1
申请日：2011-11-23
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 , 聂福平
摘要： 本发明设涉及动物疫病分子生物学检测方法及检测试剂领域，具体涉及一种动物Torque Teno病毒环介导等温扩增技术快速检测用引物、试剂盒及其检测方法。本发明根据动物Torque Teno病毒的两种不同血清型基因序列，用ClustalW进行多重比对，分析序列的保守区，采用LAMP引物设计软件，分别设计内引物和外引物，均可特异性的实现快速对TTV1和TTV2血清型的检测与鉴别。本发明公开了一种快速、灵敏度高、特异性强、操作简便、设备要求低、省时省力并且易于观察结果的环介导等温扩增技术对TorqueTeno病毒进行检测的方法，没有复杂的后处理，适用性广。
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公开(公告)号：CN108611432A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810448766.4
申请日：2018-05-11
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6816 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/63
摘要： 本发明公开了一种副溶血性弧菌夹心DNA杂交快速检测用探针、试剂盒和检测方法。该试剂盒根据靶序列设计2条探针(一条捕获探针和一条检测探针)，还包括一块包被了poly dT的96孔板、菌液裂解液、裂解缓冲液、杂交液、洗涤液、显色液、终止液、阳性对照液和阴性对照液。利用本试剂盒在2h内即可完成全部过程，通过加入TMB显色液观察颜色变化或多功能酶标仪测定OD值判定结果。本发明可以快速、大量、特异性地检测靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，可以凭肉眼判断结果，对操作人员没有技术上的要求，检测时间短。
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公开(公告)号：CN107475411A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710848179.X
申请日：2017-09-19
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2561/113 , C12Q2561/101
摘要： 本发明公开了一种检测伯氏疏螺旋体核酸的Taqman实时荧光PCR检测方法，属于生物检测技术领域，本发明应用一对伯氏疏螺旋体特异性引物(SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2)和一条荧光标记探针(SEQ ID NO.3)进行实时荧光PCR扩增，检测扩增产物荧光信号，来判断样品中是否携带伯氏疏螺旋体病原。检测方法简单、快速、灵敏、准确、特异，与模板互补配对的荧光探针提高了特异性，有效地避免假阳性和假阴性，检测时荧光信号自动收集，避免普通PCR反应后电泳分析中人为因素干扰，检测过程完全闭管，不需电泳等后处理，消除了PCR产物的污染。本发明检测方法具有特异性高、稳定性好的特点。
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公开(公告)号：CN104152585B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201410394168.5
申请日：2014-08-12
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要： 本发明公开了一种绵羊痘病毒Taqman—MGB探针实时荧光定量PCR检测用引物、试剂盒和检测方法。本方法根据靶序列的1个区域设计2条引物和一条探针，该试剂盒包括2×Premix Ex TaqTM缓冲液、阳性对照、阴性对照和灭菌去离子水。本发明只需要两步法扩增法及简单的反应条件就可以快速、高效、特异性、高灵敏度地检测目的靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，对操作人员没有技术上的要求，检测成本低，检测时间短。
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公开(公告)号：CN103555841B
公开(公告)日：2016-02-17
申请号：CN201310540047.2
申请日：2013-11-05
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要： 本发明公开了一种家畜衣原体Taqman-MGB探针实时荧光定量PCR检测用引物、试剂盒和方法。该试剂盒根据靶序列上MOMP的1个区域设计2条引物和一条探针，可特异性的扩增家畜衣原体。该试剂盒包括扩增反应液、阳性对照、阴性对照和灭菌去离子水。本发明只需要两步法扩增法及简单的反应条件就可以快速、高效、特异性、高灵敏度地检测目的靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，对操作人员没有技术上的要求，检测成本低，检测时间短。
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公开(公告)号：CN103555842B
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201310540233.6
申请日：2013-11-05
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要： 本发明公开了一种动物衣原体Taqman—MGB探针多重实时荧光定量PCR检测用引物、试剂盒和方法。多重Taqman-MGB探针实时荧光PCR方法可对流产嗜衣原体（Ch. abortus）、家畜嗜衣原体(Ch. pecorum)、鹦鹉热嗜衣原体（Ch. psittaci）进行快速检测。本检测方法以三种衣原体靶序列MOMP的保守区域为基础，设计3对引物和3条Taqman-MGB探针。本发明只需要两步法扩增法及简单的反应条件就可以快速、高效、特异性、高灵敏度地检测目的靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，对操作人员没有技术上的要求，检测成本低，检测时间短。可避免因进行琼脂糖电泳而可能造成的交叉污染，从而提高检测的准确率和可信度。
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公开(公告)号：CN104630360A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510057974.8
申请日：2015-02-04
申请人： 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种HPS等温扩增快速检测用引物、试剂盒和检测方法。该试剂盒根据靶序列上8个区域设计6条引物，2条外引物、2条内引物和2条环引物，还包括2×LAMP buffer、Bst DNA聚合酶管、阳性对照、阴性对照和灭菌去离子水。利用本试剂盒在65℃左右的温度下经10～25min的反应后，便可以根据肉眼观察反应结果判断是否含有副猪嗜血杆菌。本发明可以在等温条件下快速、高效、特异性地扩增靶序列，且操作简便，不需要昂贵的仪器和试剂，可以凭肉眼判断结果，对操作人员没有技术上的要求，检测成本低，检测时间短。
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