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公开(公告)号:CN100368522C
公开(公告)日:2008-02-13
申请号:CN200510057330.5
申请日:2005-10-18
申请人: 重庆大学 , 重庆重大生物技术发展有限公司
摘要: 本发明涉及一种提高金龟子绿僵菌孢子储藏稳定性的方法。它首先是构建金龟子绿僵菌中性海藻糖酶RNA干扰载体,然后再建立分生孢子转化体系。所得转化子利用DNA印迹鉴定,RNA印迹检测转化子中性海藻糖酶基因的表达量,比较转化子和出发菌株孢子内海藻糖含量、耐贮性、耐热性,可以得知转化子与出发菌株孢子的海藻糖含量、耐贮性和耐热性都有很大的差异。通过这种方法可使金龟子绿僵菌孢子的耐贮性、耐热性得到很大的提高。
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公开(公告)号:CN1778891A
公开(公告)日:2006-05-31
申请号:CN200510057330.5
申请日:2005-10-18
申请人: 重庆大学 , 重庆重大生物技术发展有限公司
摘要: 本发明涉及一种提高金龟子绿僵菌孢子储藏稳定性的方法。它首先是构建金龟子绿僵菌中性海藻糖酶RNA干扰载体,然后再建立分生孢子转化体系。所得转化子利用DNA印迹鉴定,RNA印迹检测转化子中性海藻糖酶基因的表达量,比较转化子和出发菌株孢子内海藻糖含量、耐贮性、耐热性,可以得知转化子与出发菌株孢子的海藻糖含量、耐贮性和耐热性都有很大的差异。通过这种方法可使金龟子绿僵菌孢子的耐贮性、耐热性得到很大的提高。
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公开(公告)号:CN113913544A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111202883.0
申请日:2021-10-15
申请人: 重庆大学
IPC分类号: C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要: 本发明涉及一种鉴别有毒植物的DNA条形码及其检测方法,以待检测的有毒植物DNA为模板,对有毒植物的DNA条形码进行PCR扩增,并进行电泳检测,电泳结果中存在与所述DNA条形码对应的DNA条带,进一步对扩增产物进行测序,对扩增产物序列的比对分析,通过DNA条形码的碱基序列差异进行鉴定。本发明由于采用的DNA条形码碱基序列长度较短,仅需1到2小时即可获得扩增条带,扩增条带测序过程仅需1小时左右,因此可以用于有毒植物种类的快速鉴定;又因为在DNA水平的检测结果对于该物种是唯一且不变的,因此可以实现准确鉴定。
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公开(公告)号:CN103966235A
公开(公告)日:2014-08-06
申请号:CN201410230344.1
申请日:2014-05-28
申请人: 重庆大学
摘要: 本发明公开了茄子花青素合成相关基因SmMYB1及其重组表达载体和在培育紫色番茄中的应用,茄子花青素合成相关基因SmMYB1的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,将该基因构建为重组表达载体然后通过农杆菌介导转化番茄,获得转基因番茄,获得转基因番茄的花瓣,柱头,花药,果实,根,茎及叶片表型为紫色,可以作为观赏植物栽培,并且转基因番茄的果实中花色苷含量较高,可以降低罹患癌症和心血管疾病的风险,具有很好的观赏和食用价值。
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公开(公告)号:CN101514231B
公开(公告)日:2011-04-27
申请号:CN200810237257.3
申请日:2008-12-26
申请人: 重庆大学
IPC分类号: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , A61K38/16 , A61P7/02
摘要: 本发明公开了一种靶向性抗血栓形成的融合蛋白,包括以下部分:(a)线虫抗凝血肽5功能结构域,其氨基酸序列与SEQ?ID?NO.1所示序列具有至少80%相同性;(b)水蛭肽功能结构域,其氨基酸序列与SEQ?ID?NO.2所示序列具有至少80%相同性;(c)RGD肽功能结构域,由3~10个氨基酸组成且含有Arg-Gly-Asp序列;(d)人凝血因子Xa识别位点,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.3所示;还公开了编码该融合蛋白的基因、含有该基因的重组表达载体、含有该重组表达载体的转化体以及制备该融合蛋白的方法;所得融合蛋白能从多个途径抑制血栓的形成及发展,并且能够靶向性地在血栓部位发挥作用,适用于预防和治疗血栓性疾病。
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公开(公告)号:CN101285076A
公开(公告)日:2008-10-15
申请号:CN200810069805.6
申请日:2008-06-05
申请人: 重庆大学
摘要: 本发明公开了一种番茄红素的制备方法,利用PCR技术扩增出Erwinia herbicola的crtI基因并连接到含强启动子Puc的表达载体pRKR5上,构建表达质粒pRKR5-crtI,通过接合转移的方式将其导入光合细菌Rhodobacter sphaeroides突变株TC72中,由于启动子Puc在厌氧条件下高效表达,调控氧浓度可诱导工程菌累积红色色素,经HPLC和吸收光谱分析,工程菌中合成的色素为番茄红素,工程菌的生物量(干重)为2.36gDCW/L,番茄红素含量可达1.52mg/gDCW,该发明为实现工业化生产番茄红素奠定了初步的基础,在生产实践中具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号:CN101407812B
公开(公告)日:2011-11-16
申请号:CN200810069952.3
申请日:2008-07-09
申请人: 重庆大学
IPC分类号: C12N15/19 , C12N15/81 , C07K14/52 , A61K38/19 , A61P19/02 , A61P29/00 , A61P37/06 , A61P9/00 , A61P35/00 , A61P31/18
摘要: 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系,通过RT-PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融合蛋白的甲醇诱导表达以及纯化鉴定等分子生物学技术和蛋白表达与纯化技术,实现人RANTES蛋白的分泌表达。为了便于人RANTES蛋白的分离纯化,在目的蛋白N端融合一个6×His纯化标签,并在His-tag和RANTES蛋白之间加入肠激酶(EK)酶切位点构建RANTES融合蛋白,然后通过亲和层析和EK酶切得到纯度较高、产量较大的人RANTES蛋白,该蛋白可用于制备治疗多发性硬化关节炎、类风湿性关节炎、器官移植排斥、心脑血管疾病、肿瘤以及HIV药物的用途。
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公开(公告)号:CN101307082B
公开(公告)日:2011-04-20
申请号:CN200810069951.9
申请日:2008-07-09
申请人: 重庆大学
IPC分类号: C07H17/04 , C12P19/60 , A61K31/7048 , A61P35/00
摘要: 本发明涉及一种半乳糖-青蒿素及其制备方法,有以下步骤:(1)制备二氢青蒿素;(2)UDP-半乳糖的制备;(3)半乳糖-青蒿素的制备。本发明利用糖基转移酶催化青蒿素的糖基化反应,其合成过程条件温和,操作方便,产物纯度高,收率较高。经初步细胞实验证明,对正常细胞无毒副作用,而抑制肿瘤细胞Hela的活性比青蒿素母体更好。采用本发明方法制备的半乳糖-青蒿素易于制剂,具有成药的前景。
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公开(公告)号:CN101717785A
公开(公告)日:2010-06-02
申请号:CN200910191952.5
申请日:2009-12-16
申请人: 重庆大学
摘要: 本发明公开了一种利用基因工程技术获得高抗病毒马铃薯植株的方法,包括Tm-22基因的克隆及其超表达载体的构建、农杆菌的侵染转化、高抗病毒马铃薯植株的检测;本发明根据已知番茄抗病基因Tm-22抗病机理及其对病毒(如TMV、ToMV等)的高抗特性,利用番茄与马铃薯亲缘关系较近特点,采用基因工程技术将Tm-22基因转入马铃薯,并通过筛选、鉴定而获得已表达Tm-22基因的高抗病毒马铃薯植株,提高了马铃薯植株对常见病毒的抗性;本发明通过植物基因转化马铃薯,能够避免环境风险及食用安全风险,有助于把马铃薯抗病研究推向一个新的台阶,为实际应用于农业生产作出了积极探索。
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公开(公告)号:CN101591622A
公开(公告)日:2009-12-02
申请号:CN200910104221.2
申请日:2009-06-30
申请人: 重庆大学
摘要: 本发明公开了一种蜂毒肽基因裂殖酵母工程菌及其构建方法和应用,该工程菌是由蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体转化的裂殖酵母;其构建方法包括构建蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体、用蜂毒肽基因裂殖酵母重组表达载体转化裂殖酵母共2个步骤;应用该工程菌生产蜂毒肽的方法包括蜂毒肽的表达、蜂毒肽的分离纯化共2个步骤;操作简便易行,蜂毒肽表达水平高、易于分离纯化、活性强,生产周期短,成本低,弥补了现有蜂毒肽制备方法以及原核表达系统和其它酵母表达系统的不足,可以在降低蜂毒肽对宿主细胞致死性的同时保证蜂毒肽的天然构象和活性,解决蜂毒肽提取纯化困难、合成成本过高等问题,从而为蜂毒肽的基础研究和生产应用提供有力的工具。
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