猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN119086906B

    公开(公告)日:2025-01-10

    申请号:CN202411569891.2

    申请日:2024-11-06

    Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条及其制备方法,属于兽医生物技术领域。本发明通过优化免疫肽序列并构建重组抗原蛋白表达载体,成功实现了目的蛋白P1NP2的高效表达和纯化。利用Western blot技术验证了重组抗原蛋白与PRRSV抗体的特异结合,证明了其在抗体检测中的可靠性和准确性。通过利用抗原检测胶体金试纸条原理,建立了一种简便、快速且高效的PRRSV抗体检测胶体金试纸条检测方法,并对其性能进行了充分的评估验证。本发明成功开发出了一种猪繁殖与呼吸综合征抗体检测胶体金试纸条并成功的制备了可以商品化的胶体金试纸条盒子,对PRRSV的诊断和防控具有重要意义。

    PRRSV广谱中和单克隆抗体5D9及其应用

    公开(公告)号:CN111087468B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010069336.9

    申请日:2020-01-21

    Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体5D9。用ELISA技术测定该单克隆抗体5D9的亚型为IgM型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体5D9对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。

    一种PRRSV广谱中和单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN111471104B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010355075.7

    申请日:2020-04-29

    Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体MAB‑GP3。用ELISA技术测定该单克隆抗体MAB‑GP3的亚型为IgG2b型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体MAB‑GP3对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。

    一种猪血清样中病原抗体ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112285347A

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN202011062115.5

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,以寻找可被病原感染的猪血清样本识别的CD4+T表位抗原肽序列,进一步将所有抗体ELISA检测为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性抗体检测。

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