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公开(公告)号：CN101881770B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN200910014999.4
申请日：2009-05-08
申请人： 青岛农业大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532 , G01N33/552 , C12P19/34 , C12N15/70 , C12P21/02 , C12R1/19
摘要： 本发明专利涉及一种猪圆环病毒2型胶体金抗体快速检测试纸条的制备方法，该方法是利用基因工程表达猪圆环病毒2型ORF2蛋白，采用酶联免疫原理和膜层析技术制成，快速检测猪血液或血清中的抗体。该测试纸条可广泛用于临床猪圆环病毒病的检测。与其他病毒无交叉反应，与ELISA、中和试验两种方法检测的符合率分别为98.63％和95.83％。与ELISA相比，重组抗原免疫胶体金具有明显的优势：安全性好，无需培养病毒本身，避免了因操作病毒造成的病毒扩散；可以大批量制备，工艺简单，生产成本低廉；抗原成分稳定均一，操作简便省力，不用仪器，检测结果特异性高，重复性好。整个实验仅需15分钟。操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定。
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公开(公告)号：CN101881770A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN200910014999.4
申请日：2009-05-08
申请人： 青岛农业大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532 , G01N33/552 , C12P19/34 , C12N15/70 , C12P21/02 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及一种猪圆环病毒2型胶体金抗体快速检测试纸条的制备方法，该方法是利用基因工程表达猪圆环病毒2型ORF2蛋白，采用酶联免疫原理和膜层析技术制成，快速检测猪血液或血清中的抗体。该测试纸条可广泛用于临床猪圆环病毒病的检测。与其他病毒无交叉反应，与ELISA、中和试验两种方法检测的符合率分别为98.63％和95.83％。与ELISA相比，重组抗原免疫胶体金具有明显的优势：安全性好，无需培养病毒本身，避免了因操作病毒造成的病毒扩散；可以大批量制备，工艺简单，生产成本低廉；抗原成分稳定均一，操作简便省力，不用仪器，检测结果特异性高，重复性好。整个实验仅需15分钟。操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定。
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公开(公告)号：CN101216489A
公开(公告)日：2008-07-09
申请号：CN200810000449.2
申请日：2008-01-10
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
发明人： 崔尚金
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/52 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪瘟抗体的试纸条及其制备方法。本发明试纸条由样品垫(4)、玻璃纤维膜(3)、硝酸纤维素膜(2)、吸水垫(1)和支持物(5)组成；所述的硝酸纤维素膜含有一条由猪瘟E2蛋白包被而成的检测线(6)和由兔抗猪瘟抗体包被而成的对照线(7)；所述的玻璃纤维膜结合有胶体金标记的猪瘟E2蛋白。本发明试纸条可快速检测样本中可能存在的猪瘟抗体，达到快速检测、及时控制疫情的目的，为下一步的分离鉴定创造有利条件。使用方便、快速、简便，不需特殊仪器设备，不需专业技术人员操作，结果清晰易辨，易于推广，适合基层以及突发事件的大批量现场检测，适合流行病调查，对猪瘟病毒感染诊断可起到辅助作用。
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公开(公告)号：CN1458167A
公开(公告)日：2003-11-26
申请号：CN03132413.4
申请日：2003-06-02
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC分类号： C07K14/005 , G01N33/569 , G01N33/531 , A61K39/12 , A61P31/12
摘要： 截短表达的猪圆环病毒II型衣壳蛋白抗原及其应用。PCV－2基因组含ORF1和ORF2，ORF1编码病毒的复制酶，ORF2编码病毒衣壳蛋白，也是研究诊断和疫苗的唯一靶抗原。本发明利用原核表达系统克隆表达PCV－2衣壳蛋白基因(Cap)羧基端393bp部分，表达的产物经纯化后用作诊断PCV感染的抗原或制备亚单位疫苗。经用PCV阳性血清检测，表达的部分衣壳蛋白具有良好的抗原反应性，可作为诊断抗原应用于琼扩诊断技术，酶联免疫吸附试验，斑点酶联免疫吸附试验，免疫荧光检测等检测PCV－2感染产生的抗体，此外，表达的衣壳蛋白可进一步配以佐剂制备亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN102757483A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210257507.6
申请日：2012-07-24
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
发明人： 崔尚金
IPC分类号： C07K14/085 , C12N15/41 , C12N15/63 , C12N15/861 , C12N5/10 , G01N33/68 , A61K39/125 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12N15/66 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了表达猪捷申病毒8型VP1蛋白的重组腺病毒及其应用。本发明根据VP1基因序列设计一对引物扩增出VP1基因（SEQ ID NO.1所示）。将克隆获得的VP1基因插入腺病毒穿梭载体中，获得重组穿梭载体，经Pme Ⅰ线性化后电转化至携带有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌中，并在细菌内发生同源重组产生含有VP1基因的重组腺病毒载体，经Pac Ⅰ线性化，转染293细胞，成功包装出含VP1基因的重组腺病毒。将本发明的rAdv-VP1以肌肉注射途径免疫3周龄仔猪，可诱导猪体产生特异体液免疫和细胞免疫应答，并能抵抗现地分离株的攻击，表明本发明的重组腺病毒rAdv-VP1可应用于猪捷申病的防治。
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公开(公告)号：CN101831506B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010146353.4
申请日：2010-04-14
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开一种快速检测和鉴别伪狂犬病病毒(PRV)gE缺失疫苗株和野毒株的环介导等温扩增试剂盒，其组成成分包括：等温反应混合缓冲液，DNA聚合酶，蒸馏水，引物混合物1和引物混合物2，所述的引物混合物1由3对引物组成，引物混合物2由3对引物组成。本发明采用环介导等温扩增(LAMP)技术，特异性强，且比PCR检测方法有更高的灵敏度，不需昂贵的PCR仪，只需普通的金属浴或水浴箱，可用凝胶电泳方法来观察检测结果，也可通过离心的方法来观察沉淀，简单而快速，既可用于PRV野毒的检测，也可用于PRV gE缺失疫苗株和野毒株的鉴别检测，特别适合于基层兽医检测机构和规模化养猪场对于PRV的检测。
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公开(公告)号：CN101216488A
公开(公告)日：2008-07-09
申请号：CN200810000443.5
申请日：2008-01-10
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
发明人： 崔尚金
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/52 , G01N33/531
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)抗体的试纸条及其制备方法。本发明试纸条由样品垫(4)、玻璃纤维膜(3)、硝酸纤维素膜(2)、吸水垫(1)和支持物(5)组成；其中，所述的硝酸纤维素膜含有一条由PRRSVM蛋白包被而成的检测线(6)和由兔抗PRRSV抗体包被而成的对照线(7)；所述的玻璃纤维膜结合有胶体金标记的PRRSV N蛋白。本发明试纸条可以大批量制备，工艺简单，生产成本低廉。利用本发明试纸条检测猪繁殖与呼吸综合症，无需培养病毒本身，安全性好。本发明试纸条灵敏度高、重复性好，操作简便、快速、准确，直观，结果容易判定。
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公开(公告)号：CN103936839A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410142613.9
申请日：2014-04-09
发明人： 崔尚金
IPC分类号： C07K14/015 , C12N15/35 , C12N7/01 , C12N15/866 , C12P21/02 , A61K39/23 , A61P31/20 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC分类号： C07K14/005 , A61K39/00 , C12N2750/14322 , C12N2750/14334 , G01N33/56983 , G01N2333/015
摘要： 本发明公开了一种重组猪细小病毒VP2蛋白、表达该蛋白的重组多角体病毒及其在疫苗制备和病毒诊断中的应用。通过对原始VP2蛋白进行改造，使得改造后的VP2蛋白HA效价由213提高到218，进一步的，本发明还获得了表达该重组猪细小病毒VP2蛋白的重组多角体病毒，实验证明，通过该病毒表达的重组VP2蛋白具有免疫原性好、效价高等优点。使用由本发明的VP2蛋白制备得到的猪细小病毒VP2亚单位疫苗免疫初产健康阴性母猪能够预防由猪细小病毒引起的疾病，而且具有安全、产生抗体快、免疫期持久等优点。此外，本发明应用改造后的VP2蛋白作为抗原包被酶标板，建立了猪细小病毒抗体的间接ELISA方法，灵敏度高、特异性好，为猪细小病毒的诊断以及检测提供了一种良好的技术手段。
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公开(公告)号：CN102719407A
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN201210166453.2
申请日：2012-05-25
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
发明人： 崔尚金
摘要： 本发明公开了猪细小病毒BQ-C株及其在制备猪细小病毒灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗领域。本发明的猪细小病毒BQ-C株具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的猪细小病毒（BQ-C株）接种ST细胞，收获培养物，用二乙烯亚胺（BEI）灭活后，与法国赛比克公司的商品化MontanideTM ISA15AVG佐剂混合乳化制成猪细小病毒灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的猪细小病毒灭活疫苗免疫初产健康阴性母猪能够预防由猪细小病毒引起的疾病，而且此疫苗具有安全、产生抗体快、免疫期持久等优点。
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公开(公告)号：CN101818212B
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN201010146356.8
申请日：2010-04-14
申请人： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种快速检测猪细小病毒的环介导等温扩增试剂盒，包括：等温反应缓冲液，DNA聚合酶，dNTP，硫酸镁，由3对引物所组成的混合物，甜菜碱，蒸馏水和荧光染料；其中，第1对引物序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，第2对引物序列为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示，第3对引物序列为SEQ IDNO：5和SEQ ID NO：6所示。本发明根据猪细小病毒的基因保守区设计了引物，采用LAMP技术进行检测，特异性强，灵敏度高，具有快速，准确性高、灵敏性好，现场应用方便等优点，解决了现有技术中存在的周期长、灵敏度较低、成本高、现场应用困难等缺陷。
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