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公开(公告)号：CN101881770B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN200910014999.4
申请日：2009-05-08
申请人： 青岛农业大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532 , G01N33/552 , C12P19/34 , C12N15/70 , C12P21/02 , C12R1/19
摘要： 本发明专利涉及一种猪圆环病毒2型胶体金抗体快速检测试纸条的制备方法，该方法是利用基因工程表达猪圆环病毒2型ORF2蛋白，采用酶联免疫原理和膜层析技术制成，快速检测猪血液或血清中的抗体。该测试纸条可广泛用于临床猪圆环病毒病的检测。与其他病毒无交叉反应，与ELISA、中和试验两种方法检测的符合率分别为98.63％和95.83％。与ELISA相比，重组抗原免疫胶体金具有明显的优势：安全性好，无需培养病毒本身，避免了因操作病毒造成的病毒扩散；可以大批量制备，工艺简单，生产成本低廉；抗原成分稳定均一，操作简便省力，不用仪器，检测结果特异性高，重复性好。整个实验仅需15分钟。操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定。
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公开(公告)号：CN101881770A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN200910014999.4
申请日：2009-05-08
申请人： 青岛农业大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/532 , G01N33/552 , C12P19/34 , C12N15/70 , C12P21/02 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及一种猪圆环病毒2型胶体金抗体快速检测试纸条的制备方法，该方法是利用基因工程表达猪圆环病毒2型ORF2蛋白，采用酶联免疫原理和膜层析技术制成，快速检测猪血液或血清中的抗体。该测试纸条可广泛用于临床猪圆环病毒病的检测。与其他病毒无交叉反应，与ELISA、中和试验两种方法检测的符合率分别为98.63％和95.83％。与ELISA相比，重组抗原免疫胶体金具有明显的优势：安全性好，无需培养病毒本身，避免了因操作病毒造成的病毒扩散；可以大批量制备，工艺简单，生产成本低廉；抗原成分稳定均一，操作简便省力，不用仪器，检测结果特异性高，重复性好。整个实验仅需15分钟。操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定。
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公开(公告)号：CN101219216B
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN200810013673.5
申请日：2008-01-24
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 , 青岛农业大学
摘要： 本发明提供一种共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF3及ORF5双基因核酸疫苗的制备方法，该方法是通过RT-PCR方法分别扩增PRRSV ORF3及ORF5的全基因序列，并将2个基因插入哺乳动物真核表达载体pIRES的2个多克隆位点，获得重组质粒S-W-PIRES。将重组质粒转染COS1细胞，通过RT-PCR方法检测到PRRSV ORF3及ORF5基因的转录，通过免疫组化检测到目的蛋白的瞬间表达。该核酸疫苗可在动物体内持续不断的产生GP3蛋白及GP5蛋白，使机体不断产生针对两者的抗体及细胞免疫反应，对猪体提供持久的免疫保护力，在PRRS的防控中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101219216A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200810013673.5
申请日：2008-01-24
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 , 青岛农业大学
摘要： 本发明提供一种共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF3及ORF5双基因核酸疫苗的制备方法，该方法是通过RT－PCR方法分别扩增PRRSV ORF3及ORF5的全基因序列，并将2个基因插入哺乳动物真核表达载体pIRES的2个多克隆位点，获得重组质粒S－W－PIRES。将重组质粒转染COS1细胞，通过RT－PCR方法检测到PRRSV ORF3及ORF5基因的转录，通过免疫组化检测到目的蛋白的瞬间表达。该核酸疫苗可在动物体内持续不断的产生GP3蛋白及GP5蛋白，使机体不断产生针对两者的抗体及细胞免疫反应，对猪体提供持久的免疫保护力，在PRRS的防控中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116162599A
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202211454525.3
申请日：2022-11-21
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，提供了GSK3β在增强塞内卡病毒复制中的用途。还提供了一种提高塞内卡病毒滴度的方法：（1）构建过表达GSK3β的宿主细胞；（2）培养过表达GSK3β的宿主细胞并接种塞内卡病毒。本发明利用分子生物学技术成功构建了GSK3β的表达载体pCMV‑Myc‑GSK3β；并构建了GSK3β基因过表达的BHK‑21细胞系；该细胞系在接种塞内卡病毒后，病毒复制速率加快，病毒滴度显著提高，可用于塞内卡疫苗的商业化生产。
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公开(公告)号：CN115927210A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211422548.6
申请日：2022-11-15
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
摘要： 本发明属于分子生物学和兽医药领域，提供了HSP70及其抑制剂在调控塞尼卡病毒复制中的应用。HSP70抑制剂可用于制备抑制塞尼卡病毒药剂，HSP70及其编码基因可用于筛选治疗或预防塞尼卡病毒药剂。本发明提供的HSP70及其抑制剂能够调控塞尼卡病毒的复制过程，对塞尼卡病毒的致病机理、疫苗研发具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111455101A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010271723.0
申请日：2020-04-09
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
摘要： 本发明提供了一种检测猪圆环病毒的实时荧光定量PCR试剂盒，包括1条上游引物、3条下游引物和SYBR Green I染料，可以同时检测PCV1、PCV2、PCV3。本发明提供的引物与试剂盒的检测特异性好、灵敏度高，适用于实验室或者临床中准确、快速检测1、2、3型猪圆环病毒。
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公开(公告)号：CN111187353A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN202010052203.0
申请日：2020-01-17
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N5/10 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20
摘要： 本发明提供了一种高效表达PCV2 Cap、PCV3 Cap融合蛋白的方法，首先构建了一株高效表达PCV2Cap蛋白和PCV3Cap蛋白的重组杆状病毒：将截去核定位信号的PCV2Cap蛋白的核苷酸序列与PCV3Cap蛋白的核苷酸序连接，中间用一段疏水的柔性蛋白linker序列连接，在PCV2Cap蛋白和PCV3Cap蛋白序列的N端加入蜂素信号肽序列，促使其分泌表达。重组阳性杆状病毒感染sf9昆虫细胞表达的蛋白进行了多种翻译后修饰，接近于天然的病毒编码蛋白，具有较高的生物学活性，而且杆状病毒具有高度的种属特异性，仅感染昆虫细胞，对脊椎动物细胞无感染性，其表达产物安全可靠，经简单处理即可用于后续试验。因此，本发明的方法表达PCV2 Cap和PCV3 Cap融合蛋白，比传统方式更加安全有效。
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公开(公告)号：CN104988233B
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201510411069.8
申请日：2015-07-14
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12Q1/6844
摘要： 本发明涉及一种利用线粒体DNA鉴别牛羊肉中狗肉的LAMP检测方法，属于分子生物学检测技术领域。本发明的检测方法以待测肉品的DNA作为模板、以DF3、DB3、DFIP、DBIP为引物构建LAMP检测体系；LAMP检测体系于64℃恒温水浴中反应40min，反应结束后向反应液中加入1 uL荧光染料SYBR GREEN Ⅰ；若反应液变成绿色，说明待测肉品中存在狗肉；若为橘黄色，则待测肉品中不存在狗肉。本发明的检测方法与传统PCR相比，在普通恒温水浴锅中反应40 min即可完成，而且可以通过在终产物中加入染料的方法直接用肉眼观察结果，能快速准确地鉴定出动物源性成分；具备操作简便、对实验仪器要求较低、结果判定容易的优点。
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公开(公告)号：CN105112565A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510563614.5
申请日：2015-09-07
申请人： 山东省农业科学院畜牧兽医研究所
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
摘要： 为了快速、高效地检测猪伪狂犬病毒(PRV)，本发明采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术建立了一种针对伪狂犬病毒的可视、灵敏、快速、特异的检测方法。本发明提取的是临床样本DNA，更切合实际，只需要在65℃下恒温反应60min就能检测到结果，并且具有操作简便的优点，适合基层养殖场使用。
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