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公开(公告)号：CN106543289A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201611055465.2
申请日：2016-11-25
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明公开了雷公藤倍半萜合酶TwNES及其编码基因与应用。本发明从雷公藤悬浮细胞中克隆得到Twnes基因。该基因是首次从雷公藤中得到的倍半萜类成分合成的关键酶基因。通过实验证明：本发明的TwNES蛋白既能够催化FPP形成橙花叔醇((E)-nerolidol)，也能催化GGPP形成香叶基芳樟醇((E,E)-geranyllinalool)，不仅对雷公藤中倍半萜类生物碱合成具有重要作用，也对于调节和生产植物倍半萜类化合物及培育高品质的雷公藤具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN111548946B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202010240128.0
申请日：2020-03-31
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明涉及一种用于生产次丹参酮二烯的重组酵母工程菌，所述工程菌能发酵生产GGPP，通过将不同植物来源的II类二萜合酶基因和I类二萜合酶基因插入到底盘菌中，如将来源于毛喉鞘蕊花的CfTPS1和来源于丹参的SmCPS1二萜合酶进行组合，可获得高产丹参酮二烯的重组工程菌，而当将二者以SmCPS1‑CfTPS1形式融合时，次丹参酮二烯产量可以进一步升高。
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公开(公告)号：CN106520745B
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201611055471.8
申请日：2016-11-25
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明公开了雷公藤二萜合酶TwGES1及其编码基因与应用。本发明从雷公藤悬浮细胞中克隆得到Twges1基因，该基因是首次从雷公藤中得到的二萜类成分合成的关键酶基因。通过实验证明：本发明的TwGES1蛋白能够催化GGPP形成香叶基芳樟醇((E,E)‑geranyllinalool)，也能催化FPP形成橙花叔醇((E)‑nerolidol)，不仅对雷公藤中的雷公藤甲素等二萜类化合物的生物合成具有重要作用，也对于调节和生产植物二萜类化合物及培育高品质的雷公藤具有重要的理论及实际意义。
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公开(公告)号：CN108866029B
公开(公告)日：2019-06-04
申请号：CN201810895867.6
申请日：2018-08-08
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明涉及一种雷公藤三萜合酶TwOSC3蛋白及其编码基因，将Twosc3基因的cDNA克隆到真核表达载体pYES2，构建带有Twosc3基因的重组表达载体，转入酵母表达宿主菌，可生产得到木栓酮。通过突变研究结果表明，Twosc3基因编码的氨基酸482为关键位点，可以提高或降低木栓酮或香树素的产量。通过基因枪介导的干扰实验表明，Twosc3基因的干扰对于雷公藤中雷公藤红素的合成有明显的抑制作用，本发明TwOSC3蛋白及其编码基因可用于生物合成植物三萜类化合物，以及培育高品质的雷公藤。
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公开(公告)号：CN108866029A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810895867.6
申请日：2018-08-08
申请人： 首都医科大学
CPC分类号： C12N9/90 , C12P33/00 , C12Y504/99007
摘要： 本发明涉及一种雷公藤三萜合酶TwOSC3蛋白及其编码基因，将Twosc3基因的cDNA克隆到真核表达载体pYES2，构建带有Twosc3基因的重组表达载体，转入酵母表达宿主菌，可生产得到木栓酮。通过突变研究结果表明，Twosc3基因编码的氨基酸482为关键位点，可以提高或降低木栓酮或香树素的产量。通过基因枪介导的干扰实验表明，Twosc3基因的干扰对于雷公藤中雷公藤红素的合成有明显的抑制作用，本发明TwOSC3蛋白及其编码基因可用于生物合成植物三萜类化合物，以及培育高品质的雷公藤。
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公开(公告)号：CN108395997A
公开(公告)日：2018-08-14
申请号：CN201810177892.0
申请日：2018-03-05
申请人： 首都医科大学
CPC分类号： C12P15/00 , C12N9/00 , C12N9/0006 , C12N15/905 , C12P9/00 , C12Y101/01034
摘要： 本发明涉及一种高产二萜类化合物的酵母工程菌，所述酵母工程菌包括过表达GGPP代谢流的基因，并且敲除了ROX1、YJL064w、YPL062w或ERG9p基因中的任意一种或多种。经本发明改造的酵母工程菌，与未改造前的酵母工程菌相比，具有更高的GGPP表达水平，并且，在改造后的酵母工程菌中导入二萜类化合物合成酶基因，所得的菌株具有更高的生产二萜类化合物的水平。
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公开(公告)号：CN106399223A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201611055464.8
申请日：2016-11-25
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明公开了一种雷公藤原生质体的分离及瞬时转化方法。通过实验证明：利用本发明的分离方法得到的原生质体的产量为4.24×105/g FW，活力为94.5％，通过PEG4000介导转化的方法成功将外源质粒转化到本发明提取的原生质体中并顺利表达，成功的建立了雷公藤悬浮细胞原生质体瞬时转化体系。本发明为深入开展雷公藤的功能基因组学研究奠定了基础，同时也为雷公藤进行基因编辑、亚细胞定位、基因过表达和干扰等研究提供了物质基础。
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公开(公告)号：CN111548946A
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN202010240128.0
申请日：2020-03-31
申请人： 首都医科大学
摘要： 本发明涉及一种用于生产次丹参酮二烯的重组酵母工程菌，所述工程菌能发酵生产GGPP，通过将不同植物来源的II类二萜合酶基因和I类二萜合酶基因插入到底盘菌中，如将来源于毛喉鞘蕊花的CfTPS1和来源于丹参的SmCPS1二萜合酶进行组合，可获得高产丹参酮二烯的重组工程菌，而当将二者以SmCPS1-CfTPS1形式融合时，次丹参酮二烯产量可以进一步升高。
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