一种大肠埃希氏菌多重PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN102690889B

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201210199925.4

    申请日:2012-06-18

    IPC分类号: C12Q1/68 C12R1/19

    摘要: 本发明提供了一种大肠埃希氏菌PCR检测试剂盒,包括10×PCR反应缓冲液,dNTP,引物和DNA聚合酶,其中,引物包括检测ompT基因的引物、检测chuA基因的引物、检测yjaA基因的引物和检测TSPE4.C2基因的引物。本发明在大肠埃希氏菌三个种系发育群判定基因chuA,yjaA和TSPE4.C2基础上引入E.coli特异性基因ompT片段,建立四重PCR扩增体系,四对引物联合使用,能够对待测样品是否为大肠埃希氏菌以及属于A、B1、B2、D哪个种系发育群进行快速鉴定,特异性高,可检测出样品中的痕量DNA,能够用于食品以及疾病诊断治疗应用。

    一种FIS-PLGA纳米微球及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN117717540A

    公开(公告)日:2024-03-19

    申请号:CN202311733397.0

    申请日:2023-12-18

    摘要: 本发明公开了一种FIS‑PLGA纳米微球及其制备方法与应用,属于药物制剂技术领域,FIS‑PLGA纳米微球包括油相体系和水相体系,油相体系包括PLGA30‑60mg和FIS 5‑15mg,FIS被包载在PLGA中,水相体系为PVA的水溶液;本发明通过合成FIS‑PLGA,对其进行物理化学的表征以及体外释放特性,得到其能够降低脾淋巴细胞的数量和IFN‑γ、TNF‑α、IL‑2、IL‑1β细胞因子分泌,抑制JAK2‑STAT3/STAT5和NF‑κB通路的激活,通过增加FIS的溶解度、提高生物利用度,能够应用于制备针对ACD疾病的药物,为变应性接触性皮炎的临床治疗思路提供新的选择。

    大肠埃希氏菌OmpT抗体间接ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102707054B

    公开(公告)日:2014-11-05

    申请号:CN201210199910.8

    申请日:2012-06-18

    IPC分类号: G01N33/569 G01N33/531

    摘要: 本发明提供了一种大肠埃希氏菌OmpT抗体间接ELISA检测方法,所述的ELISA中酶标板上的检测抗原为OmpT重组蛋白。检测方法包括以下步骤:待检血清按照1:640稀释后,与酶标板上的OmpT重组蛋白37℃孵育1.5h,洗板三次;加入辣根过氧化物酶标的兔抗牛lgG与待检血清37℃孵育1.5h;加入TMB底物进行显色10min;终止反应后检测OD450,OD450值≥0.335为阳性,OD450值<0.335为阴性。本发明用大肠埃希氏菌的标志性基因OmpT制备的重组蛋白作为ELISA的检测抗原,该重组抗原可规模化、标准化生产,且特异性强,适于大肠埃希氏菌属所有血清型细菌感染后抗体检测。

    金黄色葡萄球菌TRAP靶向重组蛋白抗原及其用途

    公开(公告)号:CN114437237B

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202210030392.0

    申请日:2022-01-12

    摘要: 本发明涉及一种靶向树突细胞DEC205受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还涉及一种靶向提呈细胞FC受体的金黄色葡萄球菌TRAP重组蛋白抗原,其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明将TRAP蛋白和靶向抗原提呈细胞的受体肽段重组在一起,不仅增强了小鼠机体的体液免疫应答水平,更显著增强了小鼠的细胞免疫应答水平,这有利于解决金黄色葡萄球菌在胞内感染寄生的问题;该方法不仅显著降低了疫苗的免疫计量,提高了疫苗的利用效率,而且其免疫保护率上升至90%,显著高于未靶向的TRAP蛋白,这有利于降低免疫成本,加快预防奶牛乳房炎的疫苗普及。

    一种牛源噬菌体单链抗体库及其构建

    公开(公告)号:CN116041491A

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN202211451721.5

    申请日:2022-11-21

    IPC分类号: C07K16/08 C12N15/11

    摘要: 本发明涉及一种牛源噬菌体单链抗体库,该抗体库是由噬菌体表面展示牛源单链抗体构建而成,所述的单链抗体是由重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因通过一个柔性Linker拼接构建而成。本发明还涉及了上述牛源噬菌体单链抗体库的构建方法。本发明构建的牛源噬菌体单链抗体库解决了牛源性抗体的制备问题,可以根据需要改造抗体的性能,并能通过体外免疫实现在体外制备各种抗体,为筛选特异性抗体研究提供了新的思路。

    大肠埃希氏菌OmpT抗体间接ELISA检测方法

    公开(公告)号:CN102707054A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210199910.8

    申请日:2012-06-18

    IPC分类号: G01N33/569 G01N33/531

    摘要: 本发明提供了一种大肠埃希氏菌OmpT抗体间接ELISA检测方法,所述的ELISA中酶标板上的检测抗原为OmpT重组蛋白。检测方法包括以下步骤:待检血清按照1:640稀释后,与酶标板上的OmpT重组蛋白37℃孵育1.5h,洗板三次;加入辣根过氧化物酶标的兔抗牛lgG与待检血清37℃孵育1.5h;加入TMB底物进行显色10min;终止反应后检测OD450,OD450值≥0.335为阳性,OD450值<0.335为阴性。本发明用大肠埃希氏菌的标志性基因OmpT制备的重组蛋白作为ELISA的检测抗原,该重组抗原可规模化、标准化生产,且特异性强,适于大肠埃希氏菌属所有血清型细菌感染后抗体检测。

    靶向巨噬细胞CD169受体的多肽及其应用

    公开(公告)号:CN117886891B

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410294507.6

    申请日:2024-03-15

    摘要: 本发明公开了靶向巨噬细胞CD169受体的多肽及其应用。所述多肽的氨基酸序列如序列2所示。本发明还公开了基于所述多肽制备的重组蛋白抗原。通过实验证明:本发明提供的多肽与抗原蛋白进行融合表达得到的融合蛋白与巨噬细胞进行孵育后显示该多肽可将抗原蛋白递送至巨噬细胞。本发明提供的重组蛋白抗原可诱导机体产生更高水平的体液免疫应答和细胞免疫应答。本发明多肽的靶向性作用将在抗原递送中发挥巨大作用,可显著提高抗原利用率,增强机体细胞免疫及体液免疫应答水平,加强靶向药物或免疫制剂的使用效果。

    一种大肠埃希氏菌多重PCR试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN102690889A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210199925.4

    申请日:2012-06-18

    IPC分类号: C12Q1/68 C12R1/19

    摘要: 本发明提供了一种大肠埃希氏菌PCR检测试剂盒,包括10×PCR反应缓冲液,dNTP,引物和DNA聚合酶,其中,引物包括检测ompT基因的引物、检测chuA基因的引物、检测yjaA基因的引物和检测TSPE4.C2基因的引物。本发明在大肠埃希氏菌三个种系发育群判定基因chuA,yjaA和TSPE4.C2基础上引入E.coli特异性基因ompT片段,建立四重PCR扩增体系,四对引物联合使用,能够对待测样品是否为大肠埃希氏菌以及属于A、B1、B2、D哪个种系发育群进行快速鉴定,特异性高,可检测出样品中的痕量DNA,能够用于食品以及疾病诊断治疗应用。

    靶向巨噬细胞CD169受体的多肽及其应用

    公开(公告)号:CN117886891A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410294507.6

    申请日:2024-03-15

    摘要: 本发明公开了靶向巨噬细胞CD169受体的多肽及其应用。所述多肽的氨基酸序列如序列2所示。本发明还公开了基于所述多肽制备的重组蛋白抗原。通过实验证明:本发明提供的多肽与抗原蛋白进行融合表达得到的融合蛋白与巨噬细胞进行孵育后显示该多肽可将抗原蛋白递送至巨噬细胞。本发明提供的重组蛋白抗原可诱导机体产生更高水平的体液免疫应答和细胞免疫应答。本发明多肽的靶向性作用将在抗原递送中发挥巨大作用,可显著提高抗原利用率,增强机体细胞免疫及体液免疫应答水平,加强靶向药物或免疫制剂的使用效果。