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公开(公告)号：CN113121703B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202110236741.X
申请日：2021-03-03
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种具有结核杆菌免疫原性的融合蛋白及其应用，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。其具有结核杆菌的免疫原性，相较于常用结核免疫原ESAT6该融合蛋白具有更明显的免疫原性，可作为结核免疫原蛋白初步筛选中的阳性标志物。从而为进一步结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN111303301B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202010193338.9
申请日：2020-03-18
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6的制备方法。本发明提供了一种CFP10‑ESAT6重组融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该重组融合蛋白表达量高且为上清表达、活性好；纯化该重组融合蛋白后，经酶切、镍柱分离，洗脱，制备得到了结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6；该方法制备得到的ESAT6蛋白的表达量高、抗原性好、活性好、纯度高，解决了ESAT6蛋白抗原性较差、可溶性不好、原核表达大部分为包涵体的问题，为结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN113416745A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110322361.8
申请日：2021-03-25
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的游离型质粒，建立了一种游离型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统，本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测：Rv3875基因的表达量提高了5.95倍，荧光检测强度eGFP基因的表达量提高了100％。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台。
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公开(公告)号：CN111303301A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN202010193338.9
申请日：2020-03-18
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6的制备方法。本发明提供了一种CFP10-ESAT6重组融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该重组融合蛋白表达量高且为上清表达、活性好；纯化该重组融合蛋白后，经酶切、镍柱分离，洗脱，制备得到了结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6；该方法制备得到的ESAT6蛋白的表达量高、抗原性好、活性好、纯度高，解决了ESAT6蛋白抗原性较差、可溶性不好、原核表达大部分为包涵体的问题，为结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN108330094B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201810022610.X
申请日：2018-01-10
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种产烟酸的游离型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组游离型质粒，其中重组游离型质粒含有nudC基因，nudC基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3‑氰基吡啶，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号：CN109385439A
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201811088220.9
申请日：2018-09-18
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一个用于构建NADH脱氢酶基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括16个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因家族16个成员基因两侧的同源臂序列。本发明为了方便NADH脱氢酶基因功能研究及疫苗开发，构建了一个同源重组噬菌体文库，该文库可以用于结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因敲除，验证基因是否必需基因，构建NADH脱氢酶敲除菌株，用于BCG疫苗优化改良。利用本发明所述噬菌体文库进行敲除时，敲除特异性好，阳性率高。
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公开(公告)号：CN108330094A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201810022610.X
申请日：2018-01-10
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种产烟酸的游离型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组游离型质粒，其中重组游离型质粒含有nudC基因，nudC基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3-氰基吡啶，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号：CN108191979B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201711296510.8
申请日：2017-12-08
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种利用荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法。一种用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合，包括蛋白CXCR2‑VC和蛋白β‑Arrestin2‑VN，蛋白CXCR2‑VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白β‑Arrestin2‑VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过优化黄色荧光蛋白Venus的拆分位点和linker序列的选择，成功的构建了用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合。通过两个重组载体分别转化，克服了两个重组载体共转化本底荧光较强无法达到检测目的的问题。本发明构建的融合蛋白组进行趋化因子的活性检测，简单易行，步骤简单，检测效果好，结果可靠。
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公开(公告)号：CN108504677B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201810183494.X
申请日：2018-03-06
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一个用于构建谷氨酸基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括19个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌谷氨酸家族19个成员基因两侧的同源臂序列。本发明构建的重组TM4噬菌体文库可以用于这些基因的敲除，验证这些基因是否是结核分枝杆菌的必需基因，用于构建基因突变替换菌株，用于构建基因敲除突变菌株，临床分离这些基因突变后对突变基因酶活性功能的研究，为结核分枝杆菌氨基酸代谢药物开发提供潜在靶点。
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公开(公告)号：CN108359666A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810023635.1
申请日：2018-01-10
申请人： 上海晶诺生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种nudC基因及其在制备烟酸方面的应用。所述nudC基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，其编码蛋白nudC蛋白的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。利用本发明发现的nudC基因构建的工程菌可以一步直接获得烟酸，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广价值。
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