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    一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法
    3.
    发明公开
    一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN107287151A

    公开(公告)日：2017-10-24

    申请号：CN201710460505.X

    申请日：2017-06-18

    申请人： 广东博溪生物科技有限公司

    发明人： 车景敏 ,  卢永波

    IPC分类号： C12N5/071

    CPC分类号： C12N5/0698 ,  C12N5/0626 ,  C12N5/0629 ,  C12N2500/14 ,  C12N2500/84 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/33 ,  C12N2502/00 ,  C12N2503/06

    摘要： 本发明公开了一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法，使用人表皮角质形成细胞的培养基作为基础液，分别配置培养基a和培养基b；将角质形成细胞与黑素细胞分别采用培养基a制成细胞悬液，分别接种到均匀接种到Transwell小室中，再加入培养基a在37℃，5%CO2培养箱中进行浸没式培养1~5天，形成含黑色素细胞的表皮层结构；将其置于培养器皿内的培养支架表面，加入培养基b进行气液面培养，置于37℃、5%CO2培养箱中培养5~15天，得到所述含黑色素的皮肤测试模型。该方法模型稳定性高，黑素细胞对外界的刺激更为灵敏，可准确用于化妆品的安全与功效评价的检测，同时原料成本低，制作周期短，稳定性良好，可大量生产。

    一种通过检测细胞模型中的TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法
    4.
    发明公开
    一种通过检测细胞模型中的TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法 无效

    公开(公告)号：CN109554446A

    公开(公告)日：2019-04-02

    申请号：CN201710881653.9

    申请日：2017-09-26

    申请人： 东莞自然衡健康科技有限公司

    发明人： 董玲娟 ,  明磊国 ,  李晓宁

    IPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q1/02 ,  C12N5/071

    CPC分类号： C12Q1/686 ,  C12N5/0626 ,  C12N2502/09 ,  C12Q2521/107

    摘要： 本发明实施例提供一种通过检测细胞模型中TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法，涉及生物技术领域，解决了冻干粉活性评价的问题，克服了毛囊干细胞和毛乳头细胞不易分离，难培养的困扰，并且TGF-β作为一种细胞因子来体外评价生发冻干粉的活性，其操作方法简单，实用性强，可作为后期不同批次冻干粉使用前活性评价的参考依据。该通过检测细胞模型中TGF-β表达量评价冻干粉活性的方法为首先制备人源性ADSCs冻干粉，并分别将生长期的表皮干细胞和黑色素细胞胰酶消化后制备单细胞悬液，先后取两种细胞单细胞悬液混合培养构建表皮-黑色素细胞模型，之后在此模型上给与冻干粉共培养，RT-PCR方法进行TGF-β的表达量检测。

    一种细胞复苏方法
    5.
    发明公开
    一种细胞复苏方法 无效

    公开(公告)号：CN107164307A

    公开(公告)日：2017-09-15

    申请号：CN201710460513.4

    申请日：2017-06-18

    申请人： 广东博溪生物科技有限公司

    发明人： 张和平 ,  卢永波

    IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/077 ,  C12N5/0775 ,  C12N5/079

    CPC分类号： C12N5/0625 ,  C12N5/0621 ,  C12N5/0626 ,  C12N5/0632 ,  C12N5/0656 ,  C12N5/0667 ,  C12N2501/115

    摘要： 本发明实施例提供一种细胞复苏方法，涉及细胞培养技术领域，能够使复苏后细胞活率高、不易老化、增殖能力好，满足多种不同细胞冻存后复苏的需要。该细胞复苏方法包括以下三个步骤：步骤一、将冻存的细胞取出后，放入50℃以下的恒温水中震荡温育50‑60s；步骤二、获取经过步骤一处理后的细胞，经过1500rpm离心3分钟后去上清，加入无血清的DMEM培养基37℃孵育2分钟，其中，DMEM培养基中包括浓度为1‑15ng/mL的bFGF；步骤三、获取经过步骤二处理后的细胞，经过800rpm离心2分钟后去上清，加入无血清的DMEM/F12培养基孵育3分钟。

    一种兔黑色素细胞的体外分离培养方法
    8.
    发明公开
    一种兔黑色素细胞的体外分离培养方法 无效

    公开(公告)号：CN106520671A

    公开(公告)日：2017-03-22

    申请号：CN201611066353.7

    申请日：2016-11-24

    申请人： 扬州大学

    发明人： 陈阳 ,  穆琳 ,  赵博昊 ,  胡帅帅 ,  赵斌 ,  杨乃苏 ,  王曼曼 ,  郝晔 ,  朱杰 ,  吴信生

    IPC分类号： C12N5/071

    CPC分类号： C12N5/0626 ,  C12N2509/00

    摘要： 本发明涉及一种原代兔黑色素细胞的分离培养方法，该方法通过酶消化法分离兔黑色素细胞，经M254完全培养基培养后更换M254/HMGS培养基培养至汇合度达到80％～90％，再利用差速消化法去除其他细胞获得纯化的黑色素细胞。大大提高了黑色素细胞的纯度，通过细胞形态观察、L-DOPA染色、半定量、抗S-100免疫细胞化学染色法对培养的细胞进行鉴定，结果显示分离的原代黑色素细胞多呈树突状和细长的梭状，L-DOPA染色呈棕黑色，RT-PCR分析表明分离的细胞表达黑色素细胞的标志基因，S-100染色胞质呈棕色。

    皮肤色素沉着体外细胞模型及其制作方法
    9.
    发明公开
    皮肤色素沉着体外细胞模型及其制作方法 无效

    公开(公告)号：CN105734010A

    公开(公告)日：2016-07-06

    申请号：CN201610214338.6

    申请日：2016-04-08

    申请人： 新疆医科大学第一附属医院

    发明人： 杨建华 ,  胡君萍 ,  居博伟 ,  吴姗姗 ,  俞婧

    IPC分类号： C12N5/071

    CPC分类号： C12N5/0626 ,  C12N2509/10 ,  C12N2529/10

    摘要： 本发明涉及色素沉着模型及其制作方法技术领域，是一种皮肤色素沉着体外细胞模型及其制作方法，该皮肤色素沉着体外细胞模型，按下述步骤得到：第一步，将外科手术环切得到的幼儿新鲜包皮采用含有青霉素和链霉素的磷酸盐缓冲液进行清洗。本发明首次采用人皮肤黑色素细胞构建本发明所述的皮肤色素沉着体外细胞模型，使本发明所述的皮肤色素沉着体外细胞模型相对于现有皮肤色素沉着细胞模型而言，更加接近患有色素增加性等疾病的人皮肤，更加真实的模拟皮肤色素沉着后人皮肤的生理状况，为治疗色素增加性疾病的药物或改善皮肤色素沉着的化妆品制剂以及色素代谢障碍性疾病的筛选及评价研究提供了更加真实的参考依据。