SpGRF4-SpGIF1融合蛋白及其编码基因在提高伴矿景天遗传转化效率中的应用

    公开(公告)号:CN118420776A

    公开(公告)日:2024-08-02

    申请号:CN202410334659.4

    申请日:2024-03-22

    摘要: 本发明公开了SpGRF4‑SpGIF1融合蛋白及其编码基因在提高伴矿景天遗传转化效率中的应用。本发明通过在伴矿景天中过表达SpGRF4‑SpGIF1融合蛋白,发现SpGRF4‑SpGIF1基因与目标基因共表达导致了伴矿景天更高的遗传转化效率,说明SpGRF4‑SpGIF1基因可提高伴矿景天的遗传转化效率。此外,与丛生芽相比,叶柄和茎段作为外植体在伴矿景天遗传转化中表现出更高的遗传转化效率。本发明提供的SpGRF4‑SpGIF1融合蛋白及伴矿景天遗传转化方法有效改善了伴矿景天遗传转化效率低、稳定性差的问题,为伴矿景天育种和种质创新提供了应用基础。

    一种快速获得大量转基因佛甲草新品种的分子育种方法

    公开(公告)号:CN105063086B

    公开(公告)日:2018-03-16

    申请号:CN201510518685.3

    申请日:2015-08-21

    发明人: 吴国江 李美茹

    IPC分类号: C12N15/84 A01H5/00 A01H6/32

    摘要: 本发明公开了一种快速获得大量转基因佛甲草新品种的分子育种方法。本发明以无菌苗的叶片、叶柄、茎为转化受体,根据育种目的的需要构建目标基因的植物表达载体,通过根癌农杆菌介导方法将目标基因导入佛甲草基因组,通过芽器官发生途径分化形成再生植株;在转化芽诱导、转化芽伸长及生根时添加筛选标记基因的相应的抗生素筛选转化体,通过Southern杂交、GUS染色证明所获得的抗性株均为转化株。本发明方法9周即可获得大量的转目标基因的佛甲草新品种,可满足目前佛甲草优良株系培育、种质资源创新研究的迫切需要。本发明在佛甲草可持续发展中具有显著的生态、经济和社会效益意义。

    一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法

    公开(公告)号:CN106119277B

    公开(公告)日:2019-12-13

    申请号:CN201610505628.6

    申请日:2016-06-30

    摘要: 本发明公开一种建立农杆菌介导观音莲高效转染体系的方法,所述方法包括以下步骤:侵染和共培养阶段:将观音莲无菌苗叶片块放入三角瓶中,倒入农杆菌菌液,三角瓶口密封进行侵染,侵染后倒去菌液,将叶片晾干,转接到共培养培养基中进行暗培养得到愈伤组织;筛选阶段:将共培养获得的愈伤组织转接到筛选培养基中进行两次筛选得到幼芽;抗性苗培养阶段:将获得的幼芽转接到抗性苗培养基培养得到抗性苗;阳性苗检测阶段。本发明使用农杆菌介导观音莲转化,打通观音莲农杆菌介导高效转染体系,这是通过农杆菌转染体系培育新型观音莲最为重要的一步。本发明能够突破观音莲自身遗传屏障,获得难以通过传统育种方式生产的新品种。

    一种利用发根农杆菌快速获取景天科植物转基因根的方法

    公开(公告)号:CN118703553A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202410982193.9

    申请日:2024-07-22

    IPC分类号: C12N15/82 A01H5/06 A01H6/32

    摘要: 本发明公开一种利用发根农杆菌快速获取景天科植物转基因根的方法,包括以下步骤:将发根农杆菌在LB固体培养基上划线培养,获得单菌落,挑取单菌落在LB液体培养基中进行培养,得到活化后的发根农杆菌溶液;景天科植物叶片浸泡发根农杆菌;正常叶插,20‑25天即可获得转基因根。本发明以景天科植物叶片进行转化,取材及转化操作简单,无需组织培养,也无需真空浸染。该方法操作方便快捷,所需设备简单,周期短、效率高,易于生产实践的推广,具有广阔的开发应用前景。

    一种快速高效的落地生根毛状根诱导和扩繁方法

    公开(公告)号:CN109628482A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201910032214.X

    申请日:2019-01-14

    IPC分类号: C12N15/82 A01H5/06 A01H6/32

    CPC分类号: C12N15/8205 C12N15/8261

    摘要: 本发明提供一种快速高效的落地生根毛状根诱导和扩繁方法,包括:(1)将无菌的落地生根外植体用野生型和含有GUS报告基因A4农杆菌侵染液侵染;(2)侵染后的外植体置于无抗MS固体培养基上,黑暗条件下进行共培养,再在有抗MS固体培养基中进行共培养;(3)在有抗MS固体培养基上进行筛选培养,(4)在有抗MS固体培养基上进行继代培养;(5)在MS液体培养基上进行扩大培养;(6)对含有GUS报告基因的毛状根进行GUS染色探究转化效率。本发明方法适用于多种落地生根品种毛状根的诱导,具有取材方便、适用性强、操作简便、诱导速度快、遗传稳定及节约成本等优点。

    一种大花红景天快速繁殖的方法

    公开(公告)号:CN115486371B

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202211362068.5

    申请日:2022-11-02

    IPC分类号: C12N5/04 A01H4/00 A01H6/32

    摘要: 本发明涉及一种快速培养大花红景天温室苗的方法。该方法包括以下步骤:(1)种子萌发获得大花红景天无菌苗;(2)进行种子萌发的无菌苗培养;(3)无菌苗叶片外植体再生成完整小植株;(4)再生小植株移栽到温室;(5)温室苗培育;(6)温室苗茎段再生成完整植株。本发明还提供了一种用于快速培养大花红景的联合用培养基。本发明克服了现有大花红景天组织培养依赖种子萌发的繁殖周期长、难以由愈伤组织再生成苗、繁殖率低等缺点和不足。