一种HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合模型、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111778279B

    公开(公告)日:2023-04-28

    申请号:CN202010658045.3

    申请日:2020-07-09

    Abstract: 本发明属于生物医学技术领域,尤其涉及一种HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV‑1 Env基因片段,并替换载体pSRHS‑Tat‑EnvHIV‑1的HIV‑1 Env基因中对应的gp145片段,转染效应细胞COS‑1,并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM‑bl细胞共培养;通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV‑1 Env介导的细胞‑细胞融合能力。利用抑制多肽P‑400的对该融合系统进行验证,表明该系统非常适用于针对HTLV‑1病毒进入抑制剂的筛选和验证,以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。

    一种HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合模型、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN111778279A

    公开(公告)日:2020-10-16

    申请号:CN202010658045.3

    申请日:2020-07-09

    Abstract: 本发明属于生物医学技术领域,尤其涉及一种HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合模型、制备方法及应用。本申请中获得HTLV-1 Env基因片段,并替换载体pSRHS-Tat-EnvHIV-1的HIV-1 Env基因中对应的gp145片段,转染效应细胞COS-1,并与基因组中整合有LTR及其下游串联着的萤火虫荧光素酶报告基因的TZM-bl细胞共培养;通过检测萤火虫荧光素酶的活性间接检测HTLV-1 Env介导的细胞-细胞融合能力。利用抑制多肽P-400的对该融合系统进行验证,表明该系统非常适用于针对HTLV-1病毒进入抑制剂的筛选和验证,以及对进入抑制剂有效浓度和毒性等指标进行评估。

    一种用于光镊精品细胞进行融合包装的方法及装置

    公开(公告)号:CN108841817A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810741236.9

    申请日:2018-07-08

    Inventor: 林建铃

    Abstract: 本发明提供一种用于光镊精品细胞进行融合包装的方法及装置,所述方法包括细胞群的选取、细胞的光镊提取、细胞膜的催化、细胞的融合及修复和异核细胞的保存,所述装置包括装置固定架、光辐射压力机和直流脉冲接头,所述装置固定架上通过螺栓连接有自调固定器,所述直流脉冲接头通过螺栓连接在自调固定器的顶部,所述自调固定器的一侧通过螺栓连接有电动震荡架,所述自调固定器的另一侧设有倾斜调节器,所述装置固定架的底部设有自调式水平底座,该用于光镊精品细胞进行融合包装的方法及装置设计新颖,结构合理,能够高精准度的将被研究细胞隔空镊取到催化皿中,避免损伤其细胞膜。

    一种融合细胞及其制备方法和其作为肿瘤疫苗的应用

    公开(公告)号:CN105063013B

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201510556878.8

    申请日:2015-09-02

    Inventor: 盖丽云 李刚毅

    Abstract: 本发明公开了一种融合细胞及其制备方法和其作为肿瘤疫苗的应用,该方法包括以下步骤:(1)制备NDV‑Ulster病毒株修饰的肿瘤细胞;(2)制备采用磷酸抗原或双膦酸盐类药物刺激活化的新型抗原递呈细胞γδT‑APC;(3)制备γδT‑APC和NDV‑Ulser修饰的肿瘤细胞的融合细胞;(4)纯化融合细胞;(5)融合细胞的培养;(6)融合细胞产品的制备。本发明方法能得到更多的新型抗原递呈细胞γδT‑APC,γδT‑APC和经过修饰的肿瘤细胞的融合率高,本发明所得融合细胞的肿瘤抗原效价更完整、免疫源性更强、肿瘤抗原负载率高。

    细胞转核诱导体细胞成多能二倍体干细胞的方法

    公开(公告)号:CN102329788B

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201110243239.8

    申请日:2006-10-16

    CPC classification number: C12N5/16 C12N5/0696 C12N2502/02 C12N2506/00

    Abstract: 本发明公开了一种通过非人类ESC细胞与哺乳动物体细胞融合而形成用于自体移植的、多潜能、二倍体ESL细胞的方法,包括如下步骤:a.提供非人类ESC;b.废除ESC中的DNA复制能力;c.将非复制ESC与多个体细胞混合;d.通过向其中加入聚乙二醇,将非复制ESC和体细胞融合;e.将已融合细胞倒置悬滴培养,以生产聚集细胞;f.在稀释的琼脂糖凝胶上混悬培养聚集细胞,以生产EB,持续1-10代;g.在饲养细胞、涂层板和皿、或者在补充了生长因子的适宜培养基中的基质胶上培养EB;而且,h.选择具有与干细胞相同形态学特征并且包含哺乳动物特异性二倍体ESL细胞的、患者特异性ESL细胞的细胞集落。

    一种重组人血小板生成素及其制剂的生产方法

    公开(公告)号:CN1058992C

    公开(公告)日:2000-11-29

    申请号:CN96114273.1

    申请日:1996-12-25

    Applicant: 史江 吴海燕

    Abstract: 本发明公开了一种采用基因工程的方法,大量获得人血小板生成素(rhTPO)及其制剂的生产工艺。在宿主细胞扩增培养阶段,细胞接种量为1.5×104/cm2-2.5×104/cm2,小牛血清含量为8-10%,细胞贴壁时间缩短至72小时以下长成单层,单层细胞停留时间延长至20-24天,使CHO细胞对TPO的分泌表达量提高,从而大大提高了TPO的得率。对培养所得物分离纯化rhTPO是按“阴离子交换层析-疏水层析-分子筛凝胶层析”三步骤进行的。简化了分离纯化工艺,缩短了分离纯化时间,避免了目的蛋白在极性条件下的作用,增加了TPO的稳定性。终产品的得率从常规方法的30%左右提高到45%左右。使用本方法生产的TPO终产品,加入适量人血清白蛋白作保护剂,再加入1%甘露醇配制成注射液,可以用于治疗各种原因引起的血小板减少症。

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