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公开(公告)号：CN118109412A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410173336.1
申请日：2024-02-07
申请人： 中国人民解放军海军军医大学
IPC分类号： C12N5/0786 , C12N5/09 , C12N15/06 , C12N5/22
摘要： 本发明涉及生物技术领域，提供了THP‑1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬‑肿瘤杂合细胞模型中的应用。诱导分化方法如下：(1)将处于对数生长期的THP‑1细胞离心，用含10％胎牛血清以及1％双抗的RPMI 1640培养基重悬，并在培养基中加入诱导剂；(2)细胞经计数后，用含所述诱导剂的RPMI 1640培养基调整THP‑1细胞密度为5×105个/mL，并将细胞种入六孔板，培养一定时间后，显微镜下观察THP‑1细胞由悬浮细胞分化为贴壁细胞，说明巨噬细胞诱导成功；采用含吞噬活性促进剂的培养基换液处理获得目标巨噬细胞。巨噬‑肿瘤杂合细胞模型构建方法如下：将巨噬细胞和癌细胞均消化为单细胞后，以密度比为1:4的比例将巨噬细胞和癌细胞于低粘附U型底孔板中进行共培养2小时。本发明获取具有高吞噬活性的巨噬细胞前后需要3天的时间，操作简单、快速、背景噪声低，同时避免伦理学限制。同时本发明杂合细胞的融合率可达5％～10％，较其他方法提高5倍左右。
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公开(公告)号：CN116813753A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310718819.0
申请日：2023-06-16
申请人： 苏州逻晟生物医药有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速免疫获取小鼠杂交瘤抗体的方法，包括以下步骤：对小鼠进行快速免疫操作：每间隔1‑2天向小鼠皮下多位点免疫，首次免疫注射腋窝/腹股沟淋巴结周边皮下，从第2次免疫开始采用腋窝/腹股沟淋巴结周边皮下和小鼠腹背部皮下交替注射免疫；在第7次免疫4天后采血检测血清效价，再对小鼠进行冲击免疫；本发明的有益效果为：本发明所述的方法采用腋窝腹股沟淋巴结附近皮下相同位点与腹背部的皮下不同位点交替免疫，并选择蛋白抗原与细胞混合冲击免疫的免疫方式，选择脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获取杂交瘤抗体，解决了RIMMS免疫途径中淋巴结摘取困难的缺点，所获杂交瘤抗体多样性好，位点更加丰富且亲和力更高。
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公开(公告)号：CN109022415B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN201710439386.X
申请日：2017-06-12
申请人： 上海睿智化学研究有限公司 , 凯惠睿智生物科技(上海)有限公司
摘要： 本发明公开了PDGFRβ单克隆重链抗体杂交瘤细胞及其制备方法和应用。该制备方法包括如下步骤：(1)制备免疫原，所述的免疫原的结构通式为：PDGFRβ胞外区域‑恒定区Fc；(2)利用免疫原免疫HCAb小鼠；(3)对HCAb小鼠进行1～7次加强免疫；(4)制备HCAb小鼠的脾细胞悬液并与小鼠骨髓瘤细胞融合得杂交瘤细胞；(5)鉴定杂交瘤细胞。将该杂交瘤用于PDGFRβ单克隆重链抗体的制备成本低、步骤简便，且抗体性质优异，能与人PDGFRβ的胞外区相结合，并高效抑制或阻断PDGFb与PDGFRβ结合，从而下调或切断相应的信号通路。
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公开(公告)号：CN115947861A
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202210878628.6
申请日：2022-07-25
申请人： 南京佰抗生物科技有限公司
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/867 , C12N15/06
摘要： 本发明公开了一种高效杂交瘤融合方法，具体方法为构建IL2信号肽、特定的CD19scfv蛋白和CD28跨膜结构域融合表达质粒载体；上述载体在骨髓瘤细胞SP2/0中转录翻译形成融合蛋白（命名为MGCP）并被转运至细胞表面；骨髓瘤细胞表面的MGCP蛋白可识别结合小鼠脾细胞表面的CD19蛋白，通过上述两种蛋白的结合可实现骨髓瘤细胞和脾细胞在物理空间上的定向紧密贴合；在PEG和电击诱导融合时，两种细胞的融合效率可提升10‑20倍。
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公开(公告)号：CN115322970A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202211157731.8
申请日：2022-09-22
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/44 , C12N15/06 , C07K19/00 , G01N33/53 , G01N33/577 , C07C303/22 , C07C309/50
摘要： 本发明公开了一株分泌偶氮玉红单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用，属于食品安全免疫检测领域。本发明的偶氮玉红半抗原通过多次筛选和实验获得，再由该半抗原制备偶氮玉红完全抗原，并以该完全抗原免疫动物获得杂交瘤细胞株，由该细胞株分泌的偶氮玉红单克隆抗体对偶氮玉红具有优异的亲和力和灵敏度，对偶氮玉红的IC50达到0.2ng/mL，可用于制备偶氮玉红的免疫检测产品，为食品中偶氮玉红的残留检测提供高效的检测方法及手段。
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公开(公告)号：CN115161311A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202211007203.4
申请日：2022-08-22
申请人： 广东忠信生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了高效筛选分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞的方法及其应用，涉及免疫学技术领域。本发明的方法通过将Oleyl‑PEG‑NHS与抗原偶联后，得到Oleyl‑PEG‑NHS‑抗原，在待筛选的脾脏细胞中加入Oleyl‑PEG‑NHS‑抗原培养，弃上清，清洗；再加入荧光物质标记的抗鼠二抗孵育，弃上清，清洗；加入基础培养基，用流式细胞仪对要筛选的细胞进行分选，获得有荧光标记的细胞，即为特异性浆细胞群，将特异性浆细胞群与骨髓瘤细胞融合，在暗场下使用单细胞挑取仪对染色后的强阳性杂交瘤细胞进行挑取，即可得到分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。该方法高效快捷、准确率高，可用于快速筛选得到分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，从而能用于高效制备鼠源单克隆抗体。
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公开(公告)号：CN113891935A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202080018775.5
申请日：2020-01-03
申请人： 瑞佩尔托利免疫医药股份有限公司
摘要： 本发明涉及肽文库及其用途。
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公开(公告)号：CN109097337B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201810772538.2
申请日：2018-07-13
申请人： 广州医科大学附属第一医院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , C12N15/06 , A61K39/395 , A61P31/20
摘要： 本发明涉及一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及其制备方法和应用。一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C201875。上述杂交瘤细胞分泌得到的抗Ad3FK的单克隆抗体，具有高特异性、性能稳定等优点，能够特异性地结合人3型腺病毒，可广泛应用在制备治疗感染人3型腺病毒的相关疾病的药物中，也可用于制备检测人3型腺病毒的检测试剂或检测设备中。
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公开(公告)号：CN113416255A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110613590.5
申请日：2021-06-02
申请人： 广西大学
IPC分类号： C07K16/40 , C12N15/06 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/543
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种抗大片形吸虫Cat L1单克隆抗体及其制备方法与应用，所述抗大片形吸虫Cat L1单克隆抗体的制备方法包括：进行小鼠免疫；构建杂交瘤细胞株；单克隆抗体制备及敏感性鉴定。本发明利用表达rFgCat L1免疫5只BALB/c小鼠，取其中抗体反应最高的小鼠，并分离脾细胞与SP 2/0细胞融合，构建阳性杂交瘤细胞株。利用该方法检测了前期经间接ELISA法检测为阳性的47份水牛血清及47份山羊血清，阳性结果符合率达72.3％及78.7％。本发明成功制备抗rFgCatL1单克隆抗体并构建大片形吸虫病双抗夹心ELISA检测法，为研发低成本、快速诊断试剂盒提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN109738648B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN201811641675.9
申请日：2018-12-29
申请人： 山东莱博生物科技有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , C07K14/18 , C12N15/06 , G01N33/68 , G01N33/576
摘要： 本发明公开了一对稳定高效表达丙型肝炎病毒核心抗原抗体的工程细胞株，其中一株是中国仓鼠卵巢细胞株CHO/3A2，其能产生抗体3A2，另一株是中国仓鼠卵巢细胞株CHO/5H7，其能产生抗体5H7，所述细胞株已于2018年12月12日保藏于中国典型培养物保藏中心，保存编号依次为CCTCC NO.C2018188与NO.C2018226。实验证实利用本发明的两株细胞制备抗体量约为2g/L，较之前杂交瘤细胞的产量提高100倍，且抗体敏感性与之前的单克隆抗体一致，其组成抗体对与HCV‑cAg特异性结合，可进行ELISA检测。
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