一种免疫细胞表面聚糖改造的方法及应用

    公开(公告)号:CN118853557A

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202310429040.7

    申请日:2023-04-20

    申请人: 复旦大学

    摘要: 本发明属生物技术领域,涉及一种免疫细胞表面聚糖改造的方法及应用。具体涉及一种基于唾液酸酶和半乳糖苷酶的体外细胞表面聚糖改造的方法及应用。本发明通过酶法对免疫细胞表面的聚糖进行编辑,获得均一化聚糖的细胞。细胞表面蛋白的N‑聚糖末端唾液酸被酶切水解后暴露出半乳糖,减弱了Siglecs蛋白的结合,但增加了Galectin的结合,及增加了细胞不稳定性。本方法使用唾液酸酶和β‑半乳糖苷酶双酶切细胞表面聚糖,可同时除去唾液酸和半乳糖,使得细胞获得稳定状态,以期使治疗性免疫细胞在制备,储存以及临床应用阶段保持更好的稳定性。

    一种α-L-岩藻糖苷酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN118834856A

    公开(公告)日:2024-10-25

    申请号:CN202411003888.4

    申请日:2024-07-25

    摘要: 本申请涉及微生物基因工程技术领域,尤其是涉及一种α‑L‑岩藻糖苷酶突变体及其应用。本申请提供了一种α‑L‑岩藻糖苷酶突变体,所述α‑L‑岩藻糖苷酶突变体与SEQ ID NO.2具有至少90%的核苷酸序列一致性,且包含以下至少一个的突变,所述突变位点包括SEQ ID NO.1的第292、725、847、1452位中的至少一个或者对应的位置,所述的突变位点在所述的突变位点上发生取代、插入或删除一个或多个氨基酸残基。本申请利用α‑L‑岩藻糖苷酶突变体可以有效提高重组细胞中的岩藻糖产量,岩藻糖的摇瓶发酵产量最高可达4.332g/L,与底盘菌株FUC001相比,提高了28.70%。

    一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118773169A

    公开(公告)日:2024-10-15

    申请号:CN202410935114.9

    申请日:2024-07-12

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明涉及一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用,本发明将来源于微生物Neobacillus bataviensis的菊糖蔗糖酶作为亲本,利用基因突变技术,将其149位的苏氨酸Thr替换成丝氨酸Ser,获得菊糖蔗糖酶的突变体酶,其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;本发明获得的菊糖蔗糖酶的突变体酶在最适催化条件下催化底物蔗糖合成菊糖过程中,相对总酶活相较于未突变前提升了57%,极大的加快了菊糖酶法合成的工业化进程。

    一种用于酶固定的载体及制备海藻糖的方法

    公开(公告)号:CN118755715A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202411241726.4

    申请日:2024-09-05

    摘要: 本发明公开一种用于酶固定的载体的制备方法,包括以下步骤:S11、向去离子水中加入插层剂、氯化镁与蒙脱土,超声分散,均匀混合;S12、将S11混合均匀的物料置于微波反应器中,在微波的作用下,插层剂和氯化镁进入至蒙脱土层间;S13、蒸发去离子水获得固体;S14、煅烧S13所得固体,得到改性蒙脱土混合物;淬火;球磨粉碎,得到粒径为600nm至800nm的改性蒙脱土载体粉料;本发明还公开使用改性蒙脱土载体粉料用于固定酶,将淀粉转化为海藻糖的制备方法;本发明利用氯化镁改善蒙脱土的形貌,提升酶固定载体的比表面积,增大固定于载体的酶与反应液的接触面积,提升反应效率,缩短生产时间。

    N-乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体、重组表达载体及菌和应用

    公开(公告)号:CN116555229B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202310600333.7

    申请日:2023-05-25

    摘要: 本发明公开了N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体、重组表达载体及菌和应用,属于基因工程技术领域,所述的N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体MutNΔ4的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。通过上述方式,本发明提供了一种催化效率提高的N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体,该突变体命名为MutNΔ4;本发明利用基因工程技术,删除野生酶JB10NagA‑opt的N端氨基酸序列“ELAL”,获得了突变体MutNΔ4,其最适温度为50℃,最适pH为7.0,其催化效率为874.6s‑1mM‑1,相比野生N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶(野生酶JB10NagA‑opt)催化效率提高了4倍,为其在医学或功能性食品生产提供了有效保障。

    一种酪醇衍生物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN115947771B

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202210821496.3

    申请日:2022-07-12

    发明人: 卢丽丽 孙桐

    摘要: 本发明涉及一种酪醇衍生物及其制备方法与应用。所述酪醇‑α‑半乳糖苷的制备方法包括:构建蜜二糖浓度为0.25~1.5M、酪醇浓度为10~500mM、α‑半乳糖苷酶浓度为1.25~10U/mL的反应体系,然后在40~75℃条件下反应0.5~6h,升温至90~100℃终止反应,离心,将上清液真空冷冻干燥后,经分离制得酪醇‑α‑半乳糖苷;所述α‑半乳糖苷酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示,核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的酪醇‑α‑半乳糖苷对于神经炎症具有抑制作用,可作为新的治疗神经炎症的先导化合物。并且本发明是采用特定的α‑半乳糖苷酶,以蜜二糖为糖基供体,一步高效合成酪醇‑α‑半乳糖苷,条件温和,环保绿色,步骤简单,大大降低了生产成本,应用前景广阔。