Gentamicin-Resistenzgene und ihre Verwendung als Marker
    11.
    发明公开
    Gentamicin-Resistenzgene und ihre Verwendung als Marker 失效
    庆大霉素抗性基因和它们作为标记使用。

    公开(公告)号:EP0248207A2

    公开(公告)日:1987-12-09

    申请号:EP87106204.8

    申请日:1987-04-29

    IPC分类号: C12N15/76

    摘要: S. ghanaensis DSM 2932 besitzt eine Resistenz gegenüber Gentamycin bis 20 µg/ml. Durch Totalverdauung der genomi­schen DNA mit Bgl II, Einbau der Restriktionsfragmente in ein geeignetes Plasmid und Selektion gegen Gentamycin erhält man Gentamycin-resistente Klone, die ein 7 kb-Frag­ment mit dem Gentamycin-Resistenzgen enthalten. Das Plas­mid pPH1JI enthält ebenfalls ein Resistenzgen gegen Genta­mycin, das auf einem 2,3 kb- Hin dIII- Bam HI-Fragment liegt. Diese Gene eignen sich als Marker, insbesondere für Streptomyceten-Vektoren.

    摘要翻译: S. ghanaensis DSM 2932具有耐庆大霉素至20微克/毫升。 通过用Bgl II,在合适的质粒的限制性片段的掺入和选择针对其包含含有庆大霉素抗性基因的7 kb的片段庆大霉素得到庆大霉素抗性克隆的基因组DNA的总消化。 质粒pPH1JI还包含用于为庆大霉素,其位于一个2.3kb的HindIII位-BamHI片段抗性的基因。 这些基因可以被用作标记物,特别是用于链霉菌的载体。

    Plasmid p SG 2 und Verfahren zu seiner Gewinnung
    13.
    发明公开
    Plasmid p SG 2 und Verfahren zu seiner Gewinnung 失效
    化质粒P SG 2,和方法,用于其生产。

    公开(公告)号:EP0066701A2

    公开(公告)日:1982-12-15

    申请号:EP82103443.6

    申请日:1982-04-23

    IPC分类号: C12N15/00

    CPC分类号: C12N15/76

    摘要: as neue Streptomyces-Plasmid pSG 2 mit einem Molekulargewicht von 9,2 Megadalton, einer Konturlänge von 4.58 µm und einer Moleküllänge von etwa 13,8 Kilobasen sowie seine Gewinnung aus einer Kultur von Streptomyces ghanaensis ATCC 14672 werden beschrieben.

    摘要翻译: 具有分子量为9.2 megadaltons,4.58微米的轮廓长度和大约13.8千碱基的分子长度和从链霉菌的培养物的回收新链霉菌质粒的pSG 2 ghanaensis ATCC 14672中描述。

    Farbmarker für Klonierungen in Streptomyces lividans
    19.
    发明公开
    Farbmarker für Klonierungen in Streptomyces lividans 失效
    FarbmarkerfürKlonierungen in Streptomyces lividans。

    公开(公告)号:EP0257416A2

    公开(公告)日:1988-03-02

    申请号:EP87111508.5

    申请日:1987-08-08

    IPC分类号: C12N15/65

    摘要: Aus Streptomyces coelicolor DSM 3030 erhält man durch totale Verdauung der Gesamt-DNA, Klonierung in einen geeigneten Vektor und Transformation von Streptomyces lividans intensiv purpurrote Kolonien. Durch Reisolierung der Plasmid-DNA und Schneiden mit Bam HI erhält man Fragmente von etwa 3,4 bis 9 kb Länge, auf denen das für die Farbstoffproduktion maßgebliche Gen lokalisiert ist. Dieses eignet sich als Marker, insbesondere als Inaktivierungsmarker, in Streptomyceten.

    摘要翻译: 将Streptomyces coelicolor DSM 3030用于完全消化完整的DNA,克隆到合适的载体中并且变换链霉菌链霉菌导致具有强烈深红色的菌落。 质粒DNA的重新分离和用BamHI切割产生的长度为3.4至9kb的片段,其中对于颜料生产至关重要的基因位于其上。 后者适合作为标记物,特别是作为灭活标记物,在链霉菌中。

    Verfahren zur Isolierung von Mutanten, mutierten Genen sowie der entsprechenden Wildtyp-Gene
    20.
    发明公开
    Verfahren zur Isolierung von Mutanten, mutierten Genen sowie der entsprechenden Wildtyp-Gene 失效
    一种用于突变体,突变的基因,与相应的野生型基因的分离过程。

    公开(公告)号:EP0243856A2

    公开(公告)日:1987-11-04

    申请号:EP87105865.7

    申请日:1987-04-22

    IPC分类号: C12N15/00

    摘要: Mutanten lassen sich sehr einfach dadurch gewinnen, daß man aus dem zu mutierenden Stamm die gesamte DNA isoliert, diese nach Spalten in kleine Fragmente in ein temperatursensitives Plasmid mit einem weiteren Selektionsmarker integriert, die so erhaltene Hybridplasmid-Population in den Ausgangsstamm transformiert, durch Selektion auf den Marker die Transformanten selektiert, durch Erhöhung der Temperatur über den Schwellenwert des temperatursensitiven Plasmids die Hybridplasmide eliminiert und durch erneute Selektion auf den Marker die Mutanten selektiert. Da auf diese Weise das mutierte Gen markiert ist, kann dieses leicht isoliert und durch Hybridisierung aus einer Genbank des Wildtyps das nicht mutierte Gen isoliert werden.

    摘要翻译: 突变体可以以非常简单的方式通过从该菌株中分离全DNA待突变,使用另外的选择标记裂解此DNA成小碎片并INTEGRA婷它变成一个温度敏感质粒,转化所得到的杂交质粒人口入来获得 原菌株,通过选择选择转化体的标记物,通过提高温度的温度敏感质粒的阈值以上,并且通过重选的标记选择的突变体消除的杂交质粒。 由于突变的基因被标记以这种方式,它可以被容易地分离和未突变的基因可以从野生型通过杂交的基因库中分离出来。