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    Process for detecting specific nucleotide variations and genetic polymorphisms present in nucleic acids and kits therefor
    3.
    发明公开
    Process for detecting specific nucleotide variations and genetic polymorphisms present in nucleic acids and kits therefor 失效
    方法和设备，用于确定在核酸中特定核苷酸变异和遗传多态性。

    公开(公告)号：EP0237362A1

    公开(公告)日：1987-09-16

    申请号：EP87302196.8

    申请日：1987-03-13

    申请人： F. HOFFMANN-LA ROCHE AG

    发明人： Erlich, Henry Anthony ,  Saiki, Randall Keichi ,  Horn, Glenn Thomas ,  Mullis, Kary Banks

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12Q1/70

    CPC分类号： C12Q1/6837 ,  C07K14/70539 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6881 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q2600/156

    摘要： Single or multiple nucleotide variations in nucleic acid sequence can be detected in nucleic acids by a process whereby the sample suspected of containing the relevant nucleic acid is repeatedly treated with primers, nucleotide triphosphates, and an agent for polymerization of the triphosphates and then denatured, in a process which amplifies the sequence containing the nucleotide variation if it is present. In one embodiment, the sample is spotted on a membrane and treated with a labeled sequence-specific oligonucleotide probe. Hybridization of the probe to the sample is detected by the label on the probe.

    摘要翻译： 一种用于检测样品中的一种或多种核酸在序列的至少一个核苷酸变异的存在或不存在的方法包括：（a）用四个不同的核苷酸三磷酸（I），（代理处理所述样品，一起或相继II ）为（I），并且对于每个核酸疑似contg中的每一个海滩寡核苷酸引物的聚合。 的变化（多个）混合伊辛的条件下，做检查每个海滩contg。 上延伸PROD每个不同的变化。 各引物的被sinthesised所有这一切是将每个海滩，其中所述引物（或多个）被选择为每个海滩contg互补的互补性。 每一个变化，寻求扩展做了刺。 从一个引物，当创业轩合成。 从它的补充，可以作为扩展PROD的合成模板。 另一引物的; （B）在变性条件下以分离引物延伸电棒处理样品。 从他们的模板如果变化（多个）存在（c）处理所述样品，一起或依次与四个（I），（II）和寡核苷酸引物检测没有引物延伸刺。 使用每个中的（b）中产生的单链的，并重复（b）和（c）中，得到核酸contg的可检测的扩增合成。 的变化（一个或多个），如果存在的话; （D）固定所述刺。 的（c）中的膜; （E）处理杂交条件下将膜与能够与杂交的扩增的核酸contg伊辛的标记序列-Specific寡核苷酸探针。 的变化（一个或多个），如果存在的话; （D）固定所述刺。 的（c）中的膜; （E）处理杂交条件下将膜与能够与混合只有当探针的序列与扩增序列的区域互补的扩增的核酸序列的伊辛标记的序列特异性寡核苷酸探针; 和（f）检测杂交的存在。

    Process for amplifying and detecting nucleic acid sequences
    6.
    发明公开
    Process for amplifying and detecting nucleic acid sequences 失效
    Verfahren zur Amplifizierung und zum Nachweis vonNukleinsäuresequenzen。

    公开(公告)号：EP0509612A2

    公开(公告)日：1992-10-21

    申请号：EP92201243.0

    申请日：1986-03-27

    申请人： F. HOFFMANN-LA ROCHE AG

    发明人： Mullis, Kary Banks ,  Arnheim, Norman ,  Saiki, Randall Keichi ,  Erlich, Henry Anthony ,  Horn, Glenn Thomas ,  Scharf, Stephen Joel

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12P19/34

    CPC分类号： C12N15/10 ,  B01J2219/00495 ,  B01J2219/0059 ,  B01J2219/00722 ,  B01L7/52 ,  C07K14/805 ,  C12Q1/6853 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/689 ,  C40B40/06 ,  C40B60/14 ,  C12Q2525/131 ,  C12Q2521/513

    摘要： The present invention provides a process for detecting the presence or absence of at least one specific nucleic acid sequence in a sample or distinguishing between two different nucleic acid sequences in said sample, wherein each nucleic acid sequence to be detected consists of two separate strands, which process comprises amplifying the specific sequence or sequences (if present) by

    (a) treating the sample with one oligonucleotide primer for each of the two strands of each different specific nucleic acid sequence being detected under hybridizing conditions such that for each strand of each different sequence being detected an extension product of each primer is synthesized which is complementary to each nucleic acid strand, wherein said primers are selected so as to be substantially complementary to each strand of each specific sequence such that the extension product synthesized from one primer, when it is separated from its complement, serves as a template for synthesis of an extension product of the other primer;
    (b) treating the product of step (a) under denaturing conditions to separate the primer extension products from their templates;
    (c) treating the product of step (b) with oligonucleotide primers such that a primer extension product is synthesized using each of the single strands produced in step (b) as a template; and
    detecting the thus amplified sequence or sequences (if present).

    摘要翻译： 本发明提供了检测样品中至少一种特定核酸序列的存在或不存在或区分所述样品中两种不同核酸序列的方法，其中待检测的每个核酸序列由两条单独的链组成，其中 方法包括通过以下步骤扩增特异性序列或序列（如果存在）：（a）在杂交条件下检测每个不同特异性核酸序列的两条链中的每条链，用一个寡核苷酸引物处理样品，使得对于每个不同序列的每条链 被检测出与各核酸链互补的每个引物的延伸产物被合成，其中所述引物被选择为与每个特定序列的每条链基本互补，使得从一个引物合成的延伸产物 与其补体分开，用作合成延伸的模板 其他引物的离子产物; （b）在变性条件下处理步骤（a）的产物以将引物延伸产物与其模板分离; （c）用寡核苷酸引物处理步骤（b）的产物，使得使用步骤（b）中制备的每条单链合成引物延伸产物作为模板; 并检测由此扩增的序列或序列（如果存在）。