公开(公告)号：JP2009544293A

公开(公告)日：2009-12-17

申请号：JP2009521178

申请日：2007-06-15

申请人： ベーリンガー インゲルハイム ファルマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト

发明人： バーバラ エネンケル ,  ケルシュティン ザウター

IPC分类号： C12N15/09 ,  A61K31/7088 ,  A61K48/00 ,  A61P43/00 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C07K14/47 ,  C12N15/63 ,  C12N2800/107 ,  C12N2830/46 ,  C12N2830/85

摘要： 本発明はDNA配列に関し、特に転写または発現促進領域(TE配列要素)ならびにエンハンサー、プロモーター、産物遺伝子および選択マーカーと併用した、発現ベクターへのそれらの使用に関する。 本発明は、配列番号1およびTE配列要素TE-01、-02、-03、-04、-06、-07、-08、-10、-11または-12を記載している。 サイズが小さいので、TE-06、TE-07またはTE-08が特に好ましい。 配列番号1は、CHO細胞由来のUb/S27a遺伝子のコード領域の上流に位置する配列領域に由来する。 TE配列要素は、真核生物ゲノム、好ましくはCHO-DG44ゲノムに安定に組み込まれたとき、産物遺伝子の発現の増加をもたらす。 それによって、染色体位置効果は克服され、遮蔽され、排除される。 このようにして、トランスフェクション混合物における高産生クローンの割合ばかりでなく絶対発現レベルもまた15倍に増加する。
【選択図】なし

公开(公告)号：JP2008518613A

公开(公告)日：2008-06-05

申请号：JP2007539588

申请日：2005-11-07

申请人： クロマジェニックス ベー ヴェー

发明人： ピーター オッテ アリー ,  ヘンドリクス ヤコブス ワクス セオドラス ,  ヨハネス マリア ファン ブロクランド ヘンリカス ,  ゲオルグ アントニウス ベルナルダス セワルト リカルド

IPC分类号： C12N15/09 ,  C07K14/435 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02 ,  C12Q1/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C12N2830/46 ,  C12N2840/20 ,  C12N2840/206

摘要： The invention provides a DNA molecule comprising a multicistronic transcription unit coding for i) a polypeptide of interest, and for ii) a selectable marker polypeptide functional in a eukaryotic host cell, wherein the polypeptide of interest has a translation initiation sequence separate from that of the selectable marker polypeptide, and wherein the coding sequence for the polypeptide of interest is upstream from the coding sequence for the selectable marker polypeptide in said multicistronic transcription unit, and wherein an internal ribosome entry site (IRES) is present downstream from the coding sequence for the polypeptide of interest and upstream from the coding sequence for the selectable marker polypeptide, and wherein the nucleic acid sequence coding for the selectable marker polypeptide in the coding strand comprises a GTG or a TTG startcodon. The invention also provides methods for obtaining host cells expressing a polypeptide of interest, said host cells comprising the DNA molecules of the invention. The invention further provides the production of polypeptides of interest, comprising culturing host cells comprising the DNA molecules according to the invention.

公开(公告)号：JP2008109931A

公开(公告)日：2008-05-15

申请号：JP2007285560

申请日：2007-11-01

申请人： Millipore Corp ,  ミリポア・コーポレイションMillipore Corporation

发明人： ANTONIOU MICHAEL ,  CROMBIE ROBERT

IPC分类号： A01K67/027 ,  C12N15/09 ,  A61K31/7088 ,  A61K35/12 ,  A61K35/74 ,  A61K35/76 ,  A61K48/00 ,  A61P35/00 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/02 ,  C12Q1/68

CPC分类号： C12N15/11 ,  A01K2217/05 ,  A61K48/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  C12N2799/027 ,  C12N2800/108 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/205 ,  C12N2830/42 ,  C12N2830/46 ,  C12N2830/85 ,  C12N2840/20 ,  C12N2840/203 ,  C12N2840/44

摘要： PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a polynucleotide containing a ubiquitous chromatin-opening element which is not derived from an LCR (locus control region). SOLUTION: This isolated polynucleotide is provided by containing wide CpG islands without being methylated, except for a case that a DNase I highly susceptible part is correlated with a promotor characterized by a point that the polynucleotide opens the chromatin or maintains the chromatin in an open state, and facilitates the reproducible expression of an operably linked gene, and deleting the DNase I highly susceptible part. COPYRIGHT: (C)2008,JPO&INPIT

摘要翻译： 待解决的问题：提供不含LCR（基因座控制区域）的普遍存在的染色质开放元件的多核苷酸。 解决方案：除了DNA酶I高度敏感部分与启动子相关的情况之外，通过含有宽甲基化CpG岛提供该分离的多核苷酸，其特征在于多核苷酸打开染色质或维持染色质 开放状态，并促进可操作地连接的基因的可重复表达，以及缺失DNase I高度敏感的部分。 版权所有（C）2008，JPO＆INPIT

公开(公告)号：JP2005500019A

公开(公告)日：2005-01-06

申请号：JP2002580040

申请日：2002-04-05

申请人： エムエル ラボラトリーズ ピーエルシー

发明人： ステファン ゲレイント ウィリアム， ,  ロバート ラハラン クロムビー，

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K31/7052 ,  A61K35/12 ,  A61K35/76 ,  A61K48/00 ,  A61P43/00 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/00 ,  C12N15/85 ,  C12P21/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C12N2830/46

摘要： ５'側の伸長されたメチル化されていないＣｐＧアイランドおよび３'側の選択マーカーエレメントに隣接した発現可能な核酸を含むポリヌクレオチドおよびベクターが、開示される。 このようなポリヌクレオチドおよびベクターは、隣接した発現可能な核酸の高レベルな発現を取得するための手段を提供する。 好ましい実施形態は、５'側の伸長されたメチル化されていないＣｐＧアイランドおよび３'側の抗生物質耐性遺伝子の組合せを含む。 単離されたポリヌクレオチドであって、以下：ａ． 伸長されたメチル化されていないＣｐＧアイランド、ｂ． ポリアデニル化シグナルによって終結される発現可能な核酸、ｃ． プロモーターに作動可能に連結された選択マーカーを含む。

公开(公告)号：KR102235603B1

公开(公告)日：2021-04-05

申请号：KR1020157022393A

申请日：2014-02-01

申请人： 셀렉시스 에스. 에이.

发明人： 발레리 르 폰 ,  니콜라 멜모드 ,  알렉썽드르 레가메 ,  몽스 부스타 ,  디보하 레이 ,  니암 하라기 ,  카자 코스틸코 ,  피에르-알랭 지호 ,  다비드 칼라브러스

IPC分类号： C12N15/85 ,  C07K16/00 ,  C07K16/24 ,  C07K16/32 ,  C12N15/90

CPC分类号： C12N15/85 ,  C07K16/00 ,  C07K16/241 ,  C07K16/32 ,  C12N15/90 ,  C07K2317/10 ,  C07K2317/24 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/90 ,  C12N2830/46

摘要： 발현의 고안정성을 포함하는 발현의 양 및 품질, 적절하다면 발현 산물의 세포 밖으로의 수송에 관해 이점을 나타내는 특히 비-영장류 진핵 숙주 세포에서 관심 대상 DNA를 발현시키기 위한 작제물 및 방법이 개시된다.

公开(公告)号：JP2017515492A

公开(公告)日：2017-06-15

申请号：JP2016568645

申请日：2015-05-18

申请人： エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft ,  エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft

发明人： ウルリヒ ゴエプフェルト ,  ウルリヒ ゴエプフェルト ,  ベンヤミン モリッツ ,  ベンヤミン モリッツ

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N5/10 ,  C12P21/08

CPC分类号： C12P21/00 ,  C07K16/00 ,  C07K2317/14 ,  C12N7/00 ,  C12N15/85 ,  C12N2710/16122 ,  C12N2710/16143 ,  C12N2800/107 ,  C12N2830/46 ,  C12N2830/60

摘要： 本発明は、転写開始部位に対する-41位および/または-179位にC→G点変異を有するヒトCMV主要前初期(hCMV-MIE)プロモーター/エンハンサーである、SEQ ID NO:02またはSEQ ID NO:03の核酸配列を有するプロモーターを報告する。この新しいプロモーターは、低下したプロモーターサイレンシングおよび改善されたポリペプチド産生を示すため、ポリペプチドの大規模産生のために特に有用である。

公开(公告)号：JP2016504922A

公开(公告)日：2016-02-18

申请号：JP2015555816

申请日：2014-02-01

申请人： セレクシス エス.エー. ,  セレクシス エス.エー.

发明人： フォルン，ヴァレリー ル ,  フォルン，ヴァレリー ル ,  メルモ，ニコラス ,  レガメー，アレキサンドレ ,  ブセタ，モンセ ,  レイ，デボラ ,  ハーラギー，ニアム ,  コスティルコ，カジャ ,  ジロー，ピエール‐アラン ,  カラブレーゼ，デヴィッド

IPC分类号： C12N15/113 ,  C07K14/47 ,  C12N5/10

CPC分类号： C12N15/85 ,  C07K16/00 ,  C07K16/241 ,  C07K16/32 ,  C07K2317/10 ,  C07K2317/24 ,  C12N15/90 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/90 ,  C12N2830/46

摘要： 発現の量および質に関しての利点(発現の高い安定性を含む)を示し、また、適切な場合には、細胞外への発現産物の輸送に関して利点を示す、特に、非霊長類真核宿主細胞において目的のDNAを発現させるための構築物および方法を開示する。【選択図】図1

摘要翻译： 示出了在数量和表达的质量方面的优点（包括表达的高稳定性），并且如果合适的话，显示相对于所述表达产物的运输至细胞外，特别是非灵长类动物真核宿主细胞的优点 它公开了一种用于表达兴趣的DNA结构和方法。 点域1

公开(公告)号：JP5291341B2

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：JP2007539588

申请日：2005-11-07

申请人： クロマジェニックス ベー ヴェー

发明人： ピーター オッテ アリー ,  ヨハネス マリア ファン ブロクランド ヘンリカス ,  ヘンドリクス ヤコブス ワクス セオドラス ,  ゲオルグ アントニウス ベルナルダス セワルト リカルド

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C12N2830/46 ,  C12N2840/20 ,  C12N2840/206

摘要： The invention provides a DNA molecule comprising a multicistronic transcription unit coding for i) a polypeptide of interest, and for ii) a selectable marker polypeptide functional in a eukaryotic host cell, wherein the polypeptide of interest has a translation initiation sequence separate from that of the selectable marker polypeptide, and wherein the coding sequence for the polypeptide of interest is upstream from the coding sequence for the selectable marker polypeptide in said multicistronic transcription unit, and wherein an internal ribosome entry site (IRES) is present downstream from the coding sequence for the polypeptide of interest and upstream from the coding sequence for the selectable marker polypeptide, and wherein the nucleic acid sequence coding for the selectable marker polypeptide in the coding strand comprises a GTG or a TTG startcodon. The invention also provides methods for obtaining host cells expressing a polypeptide of interest, said host cells comprising the DNA molecules of the invention. The invention further provides the production of polypeptides of interest, comprising culturing host cells comprising the DNA molecules according to the invention.

公开(公告)号：JP2012521779A

公开(公告)日：2012-09-20

申请号：JP2012503316

申请日：2010-03-30

申请人： セルトリオン・インコーポレイテッド

发明人： キム，ジョン‐ムク ,  キム，マンス ,  ソン，ヨー・チョル ,  チャン，ミン・ショク ,  チョウ，ミュンサム ,  リー，ヒュンジョー

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N5/10 ,  C12P21/08

CPC分类号： C12N15/65 ,  C12N15/1086 ,  C12N15/69 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/24 ,  C12N2830/46 ,  C12N2830/50 ,  C12P21/02

摘要： The present invention relates to a method of selecting high producer clones by using an expression vector, the expression vector comprising: (i) a gene expression cassette comprising a selectable marker gene to which polyA has been inoperably linked; and (ii) a gene expression cassette which encodes a recombinant protein of interest and to which polyA has been operably linked. According to the invention, high producer clones can be selected from cell populations at least 10 times fewer than in the existing methods of selecting cell lines. Particularly, high producer clones can be selected using a low concentration of MTX compared to a conventional stepwise gene amplification strategy which comprises carrying out multiple amplification steps while increasing the concentration of MTX. Accordingly, the development period of cell lines can be shortened and the labor and cost required for selection of high-productivity cell clones can be reduced, whereby more efficient production of proteins is possible even when general selectable marker genes other than MTX are used.

公开(公告)号：JP4642865B2

公开(公告)日：2011-03-02

申请号：JP2007554658

申请日：2006-03-03

申请人： ミリポア・コーポレイションMillipore Corporation

发明人： アリステア シンプソン アービン， ,  スティーブン ジェレイント ウィリアムス， ,  ジョナサン ガウン，

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12P21/02

CPC分类号： C12N15/85 ,  C12N2830/46 ,  C12N2840/20