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    MICRORNA AFFINITY ASSAY AND USES THEREOF
    1.
    发明申请
    MICRORNA AFFINITY ASSAY AND USES THEREOF 有权
    MICRORNA AFFINITY测定及其用途

    公开(公告)号：US20120264619A1

    公开(公告)日：2012-10-18

    申请号：US13500083

    申请日：2010-10-18

    申请人： Simon D. Spivack ,  Miao Shi ,  Weiguo Han

    发明人： Simon D. Spivack ,  Miao Shi ,  Weiguo Han

    IPC分类号： C40B20/00 ,  C12Q1/68 ,  C40B60/10 ,  G01N33/53

    CPC分类号： C12N15/111 ,  C12N2310/141 ,  C12N2320/11 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q1/6858

    摘要： The present invention provides methods and kits for determining which microRNAs bind to a target mRNA where the methods comprise the steps of (a) creating a bait sequence from the target mRNA, where the bait sequence comprises a label that binds to a binding agent; (b) adding a mixture of microRNAs to the bait sequence; (c) separating the microRNAs that bind to the bait sequence from those microRNAs that do not bind; and (d) identifying the microRNAs that bind to the bait sequence, wherein the microRNAs identified are those that bind to the target mRNA.

    摘要翻译： 本发明提供用于确定哪些微小RNA结合靶mRNA的方法和试剂盒，其中所述方法包括以下步骤：（a）从靶mRNA产生诱饵序列，其中诱饵序列包含与结合剂结合的标记; （b）将微RNA混合物加入诱饵序列; （c）将与诱饵序列结合的微RNA与不结合的微RNA分离; 和（d）鉴定结合诱饵序列的微小RNA，其中鉴定的微小RNA是与靶mRNA结合的微RNA。

    Method for functional testing of site-specific DNA methylation
    2.
    发明授权
    Method for functional testing of site-specific DNA methylation 有权
    场地特异性DNA甲基化功能测试方法

    公开(公告)号：US08993242B2

    公开(公告)日：2015-03-31

    申请号：US13349745

    申请日：2012-01-13

    申请人： Weiguo Han ,  Simon D. Spivack ,  Miao Kevin Shi

    发明人： Weiguo Han ,  Simon D. Spivack ,  Miao Kevin Shi

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12P19/34

    CPC分类号： C12Q1/6869 ,  C12Q2521/125 ,  C12Q2521/319 ,  C12Q2521/501 ,  C12Q2523/125

    摘要： Methods and kits are provided for testing the functional effect of methylating different cytosine residues, for testing patterns of DNA methylation on gene expression, and for site-specific methylation, as well as methylated DNA constructs. Methods are provided that include steps of denaturing a circular double-stranded DNA construct; hybridizing primers to separate strands of the denatured circular DNA construct; contacting the hybridized primers with a DNA polymerase, deoxynucleoside triphosphates, and copies of the primers; contacting nicked copies with a DNA ligase so as to form a copy of the circular DNA construct; contacting the copy of the circular DNA construct with a methyltransferase enzyme; transfecting a cell with C-5 methylated circular DNA construct; and quantifying expression of a gene of interest, thereby determining the effect of C-5 methylating cytosine nucleotide residues of DNA on expression of the gene of interest.

    摘要翻译： 提供了方法和试剂盒，用于测试甲基化不同胞嘧啶残基的功能效应，用于测试DNA甲基化对基因表达和位点特异性甲基化的模式，以及甲基化DNA构建体。 提供了包括使环状双链DNA构建体变性的步骤的方法; 将引物杂交到分离的变性环状DNA构建体的链; 使杂交引物与DNA聚合酶，脱氧核苷三磷酸和引物拷贝接触; 将切口拷贝与DNA连接酶接触，形成环状DNA构建体的拷贝; 使循环DNA构建体的拷贝与甲基转移酶接触; 用C-5甲基化环状DNA构建体转染细胞; 并定量目的基因的表达，从而确定DNA的C-5甲基化胞嘧啶核苷酸残基对感兴趣的基因表达的影响。

    MicroRNA affinity assay and uses thereof
    4.
    发明授权
    MicroRNA affinity assay and uses thereof 有权
    MicroRNA亲和力测定及其用途

    公开(公告)号：US08846350B2

    公开(公告)日：2014-09-30

    申请号：US13500083

    申请日：2010-10-18

    申请人： Simon D. Spivack ,  Miao Shi ,  Weiguo Han

    发明人： Simon D. Spivack ,  Miao Shi ,  Weiguo Han

    IPC分类号： C12P19/34 ,  C07H21/02 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

    CPC分类号： C12N15/111 ,  C12N2310/141 ,  C12N2320/11 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q1/6858

    摘要： The present invention provides methods and kits for determining which microRNAs bind to a target mRNA where the methods comprise the steps of (a) creating a bait sequence from the target mRNA, where the bait sequence comprises a label that binds to a binding agent; (b) adding a mixture of microRNAs to the bait sequence; (c) separating the microRNAs that bind to the bait sequence from those microRNAs that do not bind; and (d) identifying the microRNAs that bind to the bait sequence, wherein the microRNAs identified are those that bind to the target mRNA.

    摘要翻译： 本发明提供用于确定哪些微小RNA结合靶mRNA的方法和试剂盒，其中所述方法包括以下步骤：（a）从靶mRNA产生诱饵序列，其中诱饵序列包含与结合剂结合的标记; （b）将微RNA混合物加入诱饵序列; （c）将与诱饵序列结合的微RNA与不结合的微RNA分离; 和（d）鉴定结合诱饵序列的微小RNA，其中鉴定的微小RNA是与靶mRNA结合的微RNA。