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    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION
    2.
    发明申请
    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION 审中-公开
    排放比例指示剂

    公开(公告)号：WO02095058A9

    公开(公告)日：2003-11-13

    申请号：PCT/US0216955

    申请日：2002-05-24

    Applicant: UNIV CALIFORNIA ,  TSIEN ROGER Y ,  TING ALICE Y ,  ZHANG JIN

    Inventor： TSIEN ROGER Y ,  TING ALICE Y ,  ZHANG JIN

    IPC: G01N21/78 ,  C07K14/435 ,  C07K19/00 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/00 ,  C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/48 ,  G01N33/542 ,  C12Q

    CPC classification number: C07K14/43595 ,  C07K2319/00 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/485 ,  G01N33/542 ,  G01N2333/43595

    Abstract: A chimeric phosphorylation indicator is provided. A chimeric phosphorylation indicator can contain a donor molecule, a phosphorylatable domain, a phosphoaminoacid binding domain (PAABD), and an acceptor molecule. A chimeric phosphorylation indicator also can contain a phosphorylatable polypeptide and a fluorescent protein, wherein the phosphorylatable polypeptide is contained within the sequence of the fluorescent protein, or wherein the fluorescent protein is contained within the sequence of the phosphorylatable polypeptide. Also provided are polynucleotides encoding such chimeric phosphorylation indicators, as well as kits containing the indicators or the polynucleotides. In addition, a method of using the chimeric phosphorylation indicators to detect a kinase or phosphatase in a sample is provided.

    Abstract translation: 提供嵌合磷酸化指示剂。 嵌合磷酸化指示剂可以含有供体分子，可磷酸化结构域，磷酸氨基酸结合结构域（PAABD）和受体分子。 嵌合磷酸化指示剂还可含有可磷酸化多肽和荧光蛋白，其中可磷酸化多肽包含在荧光蛋白的序列内，或其中荧光蛋白包含在可磷酸化多肽的序列内。 还提供了编码这种嵌合磷酸化指示剂的多核苷酸，以及含有指示剂或多核苷酸的试剂盒。 此外，提供了使用嵌合磷酸化指示剂来检测样品中的激酶或磷酸酶的方法。

    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION BY C-KINASE
    3.
    发明申请
    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION BY C-KINASE 审中-公开
    通过C-激酶发射磷酸化的发射比率指标

    公开(公告)号：WO2005116267A3

    公开(公告)日：2006-11-23

    申请号：PCT/US2005018662

    申请日：2005-05-26

    Applicant: UNIV CALIFORNIA ,  VIOLIN JONATHAN D ,  NEWTON ALEXANDRA C ,  TSIEN ROGER Y ,  ZHANG JIN

    Inventor： VIOLIN JONATHAN D ,  NEWTON ALEXANDRA C ,  TSIEN ROGER Y ,  ZHANG JIN

    IPC: C12P21/04 ,  C07K14/435 ,  C07K14/47 ,  C12N9/12 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/48 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/542

    CPC classification number: C12N9/1205 ,  C07K14/43595 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/60 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/485 ,  G01N33/542 ,  G01N2333/43595

    Abstract: A chimeric phosphorylation indicator (CPI) as provided herein can contain a donor molecule, a phosphorylatabe domain, a phosphoaminoacid binding domain (PAABD), and an acceptor molecule. Where the phosphorylatable domain is phosphorylatable by protein kinase C (PKC), the CPI is a c-kinase activity reporter (CKAR). Donor and acceptor molecules may be, independently, fluorescent proteins such as non-oligomerizing fluorescent proteins. A CPI can contain a phosphorylatable polypeptide and a fluorescent protein; the phosphorylatable polypeptide may be contained within the sequence of the fluorescent protein, or the fluorescent protein may be contained within the sequence of the phosphorylatable polypeptide. The spatiotemporal properties of the PKC signal pathway may be tested with CKAR, calcium-sensing fluorophores and FRET-based translocation assays. Polynucleotides encoding such CPIs, and kits containing the indicators and/or the polynucleotides, are provided. A method of using the chimeric phosphorylation indicators to detect a kinase or phosphatase in a sample is provided.

    Abstract translation: 本文提供的嵌合磷酸化指示剂（CPI）可以含有供体分子，磷酰胺结构域，磷酸氨基酸结合结构域（PAABD）和受体分子。 当可磷酸化结构域由蛋白激酶C（PKC）磷酸化时，CPI是c-激酶活性报告物（CKAR）。 供体和受体分子可以独立地是荧光蛋白，例如非低聚荧光蛋白。 CPI可以含有可磷酸化的多肽和荧光蛋白; 可磷酸化多肽可以包含在荧光蛋白的序列内，或者荧光蛋白可以包含在可磷酸化多肽的序列内。 可以用CKAR，钙感应荧光团和基于FRET的易位测定来测试PKC信号通路的时空性质。 提供了编码这种CPI的多核苷酸，以及含有指示剂和/或多核苷酸的试剂盒。 提供了使用嵌合磷酸化指示剂来检测样品中的激酶或磷酸酶的方法。

    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION
    5.
    发明申请
    EMISSION RATIOMETRIC INDICATORS OF PHOSPHORYLATION 审中-公开
    排放比例指示剂

    公开(公告)号：WO02095058A2

    公开(公告)日：2002-11-28

    申请号：PCT/US0216955

    申请日：2002-05-24

    Applicant: UNIV CALIFORNIA ,  TSIEN ROGER Y ,  TING ALICE Y ,  ZHANG JIN

    Inventor： TSIEN ROGER Y ,  TING ALICE Y ,  ZHANG JIN

    IPC: G01N21/78 ,  C07K14/435 ,  C07K19/00 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N15/00 ,  C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/48 ,  G01N33/542 ,  C12Q

    CPC classification number: C07K14/43595 ,  C07K2319/00 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/42 ,  C12Q1/485 ,  G01N33/542 ,  G01N2333/43595

    Abstract: A chimeric phosphorylation indicator is provided. A chimeric phosphorylation indicator can contain a donor molecule, a phosphorylatable domain, a phosphoaminoacid binding domain (PAABD), and an acceptor molecule. A chimeric phosphorylation indicator also can contain a phosphorylatable polypeptide and a fluorescent protein, wherein the phosphorylatable polypeptide is contained within the sequence of the fluorescent protein, or wherein the fluorescent protein is contained within the sequence of the phosphorylatable polypeptide. Also provided are polynucleotides encoding such chimeric phosphorylation indicators, as well as kits containing the indicators or the polynucleotides. In addition, a method of using the chimeric phosphorylation indicators to detect a kinase or phosphatase in a sample is provided.

    Abstract translation: 提供嵌合磷酸化指示剂。 嵌合磷酸化指示剂可以含有供体分子，可磷酸化结构域，磷酸氨基酸结合结构域（PAABD）和受体分子。 嵌合磷酸化指示剂还可含有可磷酸化多肽和荧光蛋白，其中可磷酸化多肽包含在荧光蛋白的序列内，或其中荧光蛋白包含在可磷酸化多肽的序列内。 还提供了编码这种嵌合磷酸化指示剂的多核苷酸，以及含有指示剂或多核苷酸的试剂盒。 此外，提供了使用嵌合磷酸化指示剂来检测样品中的激酶或磷酸酶的方法。

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