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公开(公告)号：CN112592899A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011163297.5
申请日：2020-10-27
申请人： 中国农业科学院烟草研究所 , 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省烟草公司红河州公司 , 云南省烟草公司昆明市公司 , 云南省烟草公司玉溪市公司
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/558 , G01N33/58
摘要： 本发明提出了一种杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株可分泌番茄斑萎病毒的单克隆抗体，该单克隆抗体用于制备免疫金标速测卡，其方法如下，步骤1、对番茄斑萎病毒重组蛋白进行纯化，步骤2、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫兔，获得多克隆抗体，步骤3、将纯化的番茄斑萎病毒重组蛋白免疫小鼠，然后通过细胞融合、克隆化筛选制备得到该单克隆抗体，最后制备小鼠腹水，经过纯化得到鼠抗番茄斑萎病毒单克隆抗体，步骤4、通过配对筛选，得到配对的单克隆抗体和多克隆抗体用于所述免疫金标速测卡，借此，本发明具有可将该免疫金标速测卡应用于番茄斑萎病毒进行快速、现场和灵敏的检测的优点。
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公开(公告)号：CN114058737A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111231803.4
申请日：2021-10-22
申请人： 中国农业科学院烟草研究所 , 云南省烟草公司红河州公司 , 云南省烟草农业科学研究院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/113 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种用于检测植物番茄斑萎病毒的crDNA、crRNA、试剂盒和方法，所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas13a蛋白和荧光探针。所述方法包括：提取待测的植物样品总RNA，后通过逆转录获得cDNA；以所述cDNA为模板扩增获得DNA扩增产物；将所述的扩增产物、crRNA、Cas13a蛋白和荧光探针和无酶水构成的检测反应体系进行检测。本发明具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。
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公开(公告)号：CN114365751A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202111534831.3
申请日：2021-12-15
申请人： 云南省烟草公司玉溪市公司
摘要： 本发明公开一种烟草内源抗烟草花叶病毒提取物及其制备方法和应用，包括：步骤1，提取：取晾干的烟草根茎粉碎，多次浸煮后蒸馏得到浸膏；步骤2，纯化：将所得浸膏依次经过浓缩、上色谱柱、洗脱、蒸馏得到浓缩液；步骤3，干燥：将浓缩液干燥并粉碎过100目筛后收集分装。本发明采用烟田废弃物，经溶剂提取、色谱分离的方法形成烟草内源抗病毒组份规模化生产工艺和质量控制方法，并对其使用方法和范围进行了明确，为利用进一步系统研究烟草内源抗烟草病毒病提供物质基础和科学依据，开创了一种田间病毒病防治新渠道，有效保证了烟草内源抗烟草花叶病毒组份制备过程的有序性和连贯性的同时也有效祛除了烟碱对目标产物的干扰，方法简单，可操作性强。
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公开(公告)号：CN118255908A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410367834.X
申请日：2024-03-28
申请人： 云南省烟草公司玉溪市公司 , 昆明理工大学
摘要： 本发明属于烟草花叶病毒控制技术领域，具体涉及烟草内源多糖的制备方法及其在抗烟草花叶病毒中的应用。本发明提供烟草内源多糖的制备方法，包括如下步骤：S1：烟草废弃物粉碎、脱色和除杂；S2：烟草内源粗多糖提取；S3：烟草内源粗多糖浓缩；S4：烟草内源粗多糖脱蛋白；S5：烟草内源粗多糖纯化。本发明制备的烟草内源多糖能够防止烟草花叶病毒，经HPGPC测定为均一多糖，分子量为3061.328Da，提取率约为4.2％，有效成分进行了最大量富集，有效保证了抗烟草花叶病毒活性成分的应用。
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公开(公告)号：CN114365751B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202111534831.3
申请日：2021-12-15
申请人： 云南省烟草公司玉溪市公司
摘要： 本发明公开一种烟草内源抗烟草花叶病毒提取物及其制备方法和应用，包括如下步骤：步骤1，提取：取晾干的烟草根茎粉碎，多次提取后将提取液合并、过滤、减压浓缩成浸膏；步骤2，纯化：将所得浸膏依次经过冲洗、洗脱、蒸馏得到浓缩液；步骤3，干燥：将浓缩液干燥并粉碎过100目筛后收集分装。本发明采用烟田废弃物，经溶剂提取、色谱分离的方法形成烟草内源抗病毒组份规模化生产工艺和质量控制方法，并对其使用方法和范围进行了明确，为利用进一步系统研究烟草内源抗烟草病毒病提供物质基础和科学依据，开创了一种田间病毒病防治新渠道，保证了烟草内源抗烟草花叶病毒组份制备过程的有序性和连贯性的同时也有效去除了烟碱对目标产物的干扰。
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公开(公告)号：CN118108818A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410235453.6
申请日：2024-03-01
申请人： 云南省烟草公司玉溪市公司 , 昆明理工大学
IPC分类号： C07K14/415 , A01N63/50 , A01P1/00 , C12Q1/18 , C12R1/94
摘要： 本发明属于烟草花叶病毒控制技术领域，具体涉及烟草内源蛋白及其制备方法和在抗烟草花叶病毒中的应用。本发明提供一种烟草内源蛋白，所述烟草内源蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明制备的烟草内源蛋白具有抗烟草花叶病毒、抑制烟草花叶病毒增殖和防治普通烟草花叶病毒的用途。此外，本发明的烟草内源蛋白利用田间烟草废弃物进行提取，经经SDS‑PAGE测定，提取的烟草内源蛋白纯度91％，提取率约为3.41％，有效成分进行了最大量富集，有效保证了抗烟草花叶病毒活性成分的应用。
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公开(公告)号：CN106508516A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610998906.6
申请日：2016-11-14
申请人： 云南省烟草公司玉溪市公司 , 云南省农业科学院农业环境资源研究所
发明人： 余砚碧 , 计思贵 , 张立猛 , 尹可锁 , 蔺忠龙 , 谷星慧 , 李家瑞 , 陈福寿 , 杨海林 , 周文兵 , 张翠萍 , 纳红艳 , 罗秀莲 , 李春林 , 张付斗 , 李迅东 , 张红梅
摘要： 本发明涉及一种杀虫剂和烟蚜茧蜂协调控制烟蚜的方法，属于烟草植保技术领域；所述的杀虫剂和烟蚜茧蜂协调控制烟蚜的方法包括以下具体步骤：1）烟草移栽时塘穴施药；2）间种向日葵，形成庇护区，保护烟蚜茧蜂；3）在烟蚜集中发生的烟田中，于烟株团棵期第一次释放烟蚜茧蜂，在烟株旺长期第二次和第三次释放烟蚜茧蜂；4）在烟田释放烟蚜茧蜂后，选择协调的杀虫剂施用时期，施用方式，施用杀虫剂种类、剂型，施用时间，施用空间。本发明提供一种杀虫剂和烟蚜茧蜂协调控制烟蚜的方法，最大化发挥烟蚜茧蜂对烟蚜的控制作用，降低杀虫剂对烟蚜茧蜂的影响。最终，降低烟田中农药使用量，减少农药对产品和环境的污染。
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公开(公告)号：CN113846125B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202111038749.1
申请日：2021-09-06
申请人： 云南省烟草农业科学研究院
摘要： 本发明涉及一种混合烟草发酵方法，该方法将枯草芽孢杆菌、红发夫酵母分别接种于LB琼脂培养基、YPD琼脂培养基上，分别在37℃培养24h、22℃培养5‑7天，得到枯草芽孢杆菌、红发夫酵母的单菌落；将单菌落分别接种到LB液体培养基、YPD液体培养基中，并分别于37℃培养20h、22℃培养28‑29h，得到枯草芽孢杆菌、红发夫酵母种子液并将其等体积混合得到混合菌液；之后对混合菌液离心并收集菌体洗涤；洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；往烟叶中加入菌悬液和根霉粉，在25℃下发酵7‑10天。本发明中枯草芽孢杆菌、红发夫酵母和根霉复配混合能够将烟叶中淀粉、蛋白质等对烟叶品质有负面影响的大分子降解为醇类、脂类、醛类及致香小分子物质，有效改善烟叶的品质。
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公开(公告)号：CN115058356B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210628009.1
申请日：2022-06-06
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 华南理工大学
摘要： 一种用于提升烟草品质的微生物发酵方法，包括以下步骤：(1)以烤烟作为接种源接种于烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h；(2)将步骤(1)中的菌液接入到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，循环15‑25个周期，获得稳定的烤烟微生物菌群；(3)将步骤(2)获得的微生物菌群接种到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，得到微生物菌群的种子液；(4)对步骤(3)获得的菌液进行离心并收集菌体；(5)对步骤(4)收集的菌体进行洗涤；(6)对步骤(5)洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；(7)往烟叶上喷施步骤(6)的菌悬液，发酵6‑8天。本发明利用从烤烟中富集驯化的微生物菌群进行烟叶发酵，能够多方面提升烟草的品质。
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公开(公告)号：CN113717185B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202110954519.3
申请日：2021-08-19
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 云南中烟工业有限责任公司
IPC分类号： C07D491/048 , A01N43/90 , A01P1/00 , A24D1/02
摘要： 本发明公开了一种喹啉生物碱化合物(Ⅰ)及其制备方法和应用。以雪茄烟根茎为原料，以高浓度甲醇、高浓度丙酮/水或高浓度乙醇/水提取，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏；浸膏用硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以氯仿‑丙酮溶液进行梯度洗脱；洗脱液的8:2部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所需的喹啉生物碱化合物。本发明还公开了上述化合物的用途，经活性测试表明，其具有较好的抑菌作用。本发明化合物结构新颖，且具有较好的抗菌活性。将该化合物用于卷烟接装纸，能够消除或降低卷烟接装纸中细菌滋生和繁殖的可能性。
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