高温下高效利用菊芋一步生产高纯果糖的耐高温菌株及应用

    公开(公告)号:CN106222101B

    公开(公告)日:2020-03-27

    申请号:CN201610601105.1

    申请日:2016-07-27

    IPC分类号: C12N1/19 C12N15/81 C12R1/645

    摘要: 本发明涉及高温下高效利用菊芋一步生产高纯果糖的耐高温菌株及应用,通过基因工程改造的方法将耐高温的马克思克鲁维酵母中预测的己糖激酶基因(KmHXK)敲除,抑制该酵母对包括葡萄糖和果糖的己糖的利用能力,在此基础上过表达预测的马克思克鲁维酵母的葡萄糖激酶(KmGLK)恢复该酵母对葡萄糖的利用能力。证明了KmHXK和KmGLK的功能,以此为基础构建的酵母菌株YGR003在较高温度(42℃)下,高效利用葡萄糖快速生长,但利用果糖的能力很弱。因此该酵母能够特异性利用和消耗葡萄糖果糖混合糖中的葡萄糖,又由于该菌株天然表达菊糖酶,可直接水解和利用菊糖和菊芋。在42℃条件下,YGR003能够同时利用350g/l菊芋粉,24h内生产232.6g/l纯果糖糖浆(检测不到葡萄糖),其生产速率高达9.7g/l/h。

    一种高效水解大豆异黄酮苷的方法

    公开(公告)号:CN106496332B

    公开(公告)日:2020-01-03

    申请号:CN201611019578.7

    申请日:2016-11-18

    摘要: 本发明涉及一种高效水解大豆异黄酮苷的方法,具体是使用基因工程方法将纤维素结合域基因与β‑葡糖苷酶基因在毕赤酵母中进行融合表达。获得的融合蛋白的纤维素结合域与纤维素通过疏水作用结合而实现葡糖苷酶的固定化。与其他的固定化方法相比,本发明所用方法无需对酶进行预先纯化,也无需其他试剂协助固定化,大大降低了固定化所需的时间和材料成本,并且易于酶的回收利用,有利于工业化大规模利用。而固定化的β‑葡糖苷酶具有很好的热稳定性及很好的大豆异黄酮苷水解能力。

    丙酮酸高温高产工程菌株及其应用

    公开(公告)号:CN106318879B

    公开(公告)日:2019-10-25

    申请号:CN201610836051.7

    申请日:2016-09-20

    IPC分类号: C12N1/19 C12P7/40 C12R1/645

    摘要: 本发明以耐热性马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)为平台,利用基因工程、代谢工程、分子生物学以及合成生物学的方法,构建一株丙酮酸脱羧酶和甘油‑3‑磷酸脱氢酶敲除的菌株,通过代谢调控恢复其生长从而提高丙酮酸的产率和生产速率,然后进一步提高菌株的木糖代谢能力,使其具备利用木糖生产丙酮酸的能力。最终解除工程菌株的葡萄糖效应,从而使工程菌株具备在高温下同时糖化木质纤维素和共利用葡萄糖和木糖并且共发酵生产丙酮酸。本发明获得的马克思克鲁维酵母菌株YZB058可以同时共利用葡萄糖和木糖在较高温度(42℃)下,生产丙酮酸。在42℃条件下,YZB058能够同时共利用40.97g/l葡萄糖和20.37g/l木糖在36h生产29.21g/l丙酮酸,其生产速率为0.81g/l/h,总得率为0.48g/g。

    一种纺锤体动点结合蛋白CENP-Z及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN102559687A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201010597491.4

    申请日:2010-12-16

    摘要: 本发明公开了一种纺锤体动点结合蛋白及其编码基因与应用。其目的是提供一种纺锤体动点结合蛋白及其编码基因与其在制备抑制肿瘤增殖药物中的应用。该蛋白是下述氨基酸序列之一:1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列;或2)将SEQ ID NO.1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而由SEQ ID NO.1衍生的且与CENP-E蛋白结合对细胞有丝分裂的行进具有调控功能的氨基酸序列。该蛋白通过与CENP-E的相互作用参与细胞有丝分裂的纺锤体检查点信号转导途径,可以其为活性成分作为药靶开发抑制肿瘤细胞增殖的药物。本发明的蛋白及其编码基因将在医学及制药领域发挥重要作用,应用前景广阔。

    去除错配DNA的方法、装置及装置的制备方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN115820625A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211552220.6

    申请日:2022-12-05

    IPC分类号: C12N15/10 C07K19/00

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种去除DNA合成中错配DNA的方法、装置及装置的制备方法和试剂盒,该除去合成的DNA样品中错配DNA的方法,包括:通过在DNA样品中添加错配融合蛋白,使错配融合蛋白与DNA样品中的错配DNA结合;使用包括无定形纤维素的离心柱去除错配DNA与错配融合蛋白;其中,错配融合蛋白为将纤维素结合域融合蛋白和错配结合蛋白进行融合表达后得到的。本发明提供的去除DNA合成中错配DNA的方法,纠错过程快捷,使用错配结合蛋白少。本发明的方法将纠错反应体积控制到10μl,可以减少材料成本同时便于自动化方面的应用,同时还能在很短的时间内完成纠错,本发明方法操作简单,快速简便。

    对木质纤维素来源抑制物耐受提高的耐热酵母菌株和应用

    公开(公告)号:CN112941097B

    公开(公告)日:2023-03-10

    申请号:CN202110353736.7

    申请日:2021-03-31

    摘要: 本发明通过对马克斯克鲁维酵母中一个注释为前折叠素(prefoldin)亚基4(KmPFD4))的基因在马克斯克鲁维酵母中进行了过表达获得一个菌株,该菌株对木质纤维素类生物质前处理过程中产生的抑制物耐受能力有明显提高。过表达菌株在含有抑制物混合物的培养基中培养延滞期比对照菌株明显缩短,分别为12h和24h,在厌氧培养中,乙醇的产量和生产速度比对照菌株分别提高了8.93%,和46.27%。这是首个通过过表达KmPFD4基因提高抑制物耐受的耐热酵母菌株,而该菌株的特性可以成为构建利用木质纤维素工程菌的重要出发菌株,其保藏号为:CGMCC No.21813。