-
公开(公告)号:CN118956785A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202410968134.6
申请日:2024-07-18
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶表面突变体及其应用。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶表面突变体是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的,包括以下至少一种氨基酸突变:D102E、E163K、E190K、L196F、K199N。本发明还提供了一种利用上述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体构建的合成香豆素类化合物的工程菌。所述阿魏酰辅酶A 6’‑羟化酶突变体具有较好的酶活性及稳定性,其酶活性提高了1.7倍以上,甚至可以提高至8.4倍;所以,上述工程菌能够实现东莨菪素、秦皮素、秦皮苷、东莨菪苷、秦皮乙素、秦皮甲素或菊苣苷等香豆素类化合物的高效生物合成,为香豆素类化合物的微生物合成提供了参考。
-
公开(公告)号:CN118460442A
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202410289151.7
申请日:2024-03-13
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种合成乳清酸的工程菌,利用CRISPR基因编辑技术在大肠杆菌基因组内整合了氨基甲酰磷酸合成酶carAB、天冬氨酸氨基甲酰转移酶pyrBI、二氢乳清酸酶pyrC和二氢乳清酸脱氢酶pyrD以增强下游途径,其次在宿主内整合天冬氨酸氨基转移酶aspC和嘧啶核苷酸脱氢酶pntAB提高前体供应量。上述基因工程菌与原始的需要导入质粒生产乳清酸重组工程菌相比,利用此工程菌生产乳清酸具有稳定性强、转换率高和生产成本低等优点。
-
公开(公告)号:CN118421584A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410281058.1
申请日:2024-03-12
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/52 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12P17/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种查尔酮合成酶突变体及应用。所述查尔酮合成酶突变体是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列发生氨基酸突变得到的,包括以下至少一种氨基酸突变:M64L、E192V、G231A、G256N、L268Y、S353T。所述查尔酮合成酶突变体具有较好的酶活性及稳定性,并将所述查尔酮合成酶突变体导入到大肠杆菌中,能够进一步提高柚皮素产量,为黄酮类化合物的微生物合成提供参考,所以,本发明还提供了一种上述查尔酮合成酶突变体在黄酮类化合物生物合成中的应用,其中,利用所述查尔酮合成酶突变体构建的工程菌,能够使柚皮素提高0.15倍以上,甚至可以提高1.4~2.2倍;还能够使芹菜素产量的可以提高0.13倍以上,甚至可以提高1.15~1.9倍。
-
公开(公告)号:CN118421491A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410603634.X
申请日:2024-05-15
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种生产异硫氰酸酯类的代谢工程菌株及其构建方法与应用。将自然界中天然存在于拟南芥中的异硫氰酸酯类合成途径,整合至酿酒酵母中,本发明提供了一种酿酒酵母工程菌株CEN.PK2‑1D,将途径酶基因作为打靶片段连同筛选标记Trp1打靶到酿酒酵母CEN.PK2‑1D‑SFN的多拷贝delta位点并反筛敲除Trp1基因后获得;所述打靶片段是由BACT4、MAM1、IPMI(LSU&SSU)、IPMDHI、BCAT3、CYP79F1、CYP83A1、ATR2、GSTF9、GGP1、SUR1、UGT74B1、ST5b和FMO‑GSOX1基因片段依次连接。所构建的工程菌株所产生的糖苷再与芥子酶反应生成SFN。再通过优化P450s的表达:CYP79F1共表达或融合表达ATR2/60tATR2,以此提高异硫氰酸酯化合物(莱菔硫烷)通量。本发明获得的工程菌株发酵生产莱菔硫烷的能力得到了大幅提高,具有较大的应用推广价值。
-
公开(公告)号:CN113584001B
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202110019048.7
申请日:2021-01-07
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种alpha‑L‑鼠李糖苷酶、其制备方法及应用。具体涉及一种新型alpha‑L‑鼠李糖苷酶的氨基酸序列、编码上述氨基酸序列的核苷酸序列、含有上述核苷酸序列的重组载体和重组宿主、利用上述重组宿主制备alpha‑L‑鼠李糖苷酶的方法以及所述alpha‑L‑鼠李糖苷酶在宝霍苷I生产中的应用。本发明所提供的alpha‑L‑鼠李糖苷酶具有催化效率高、热稳定性好、特异性高等优点。朝藿定C经葡萄糖苷酶快速催化水解后,再利用本发明中所提供的alpha‑L‑鼠李糖苷酶进一步催化水解其C3位置外侧鼠李糖苷键生成宝霍苷I,底物转化率高达99.5%、转化效率高、无副产物、步骤简单、反应时间短、污染小、适合工业化生产。
-
公开(公告)号:CN117679402A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202410034885.0
申请日:2024-01-10
Applicant: 北京化工大学
IPC: A61K31/145 , A61P1/04 , A61P29/00
Abstract: 本发明公开了莱菔素在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用,属于生物医药领域。本发明通过细胞实验和动物实验,发现莱菔素可以治疗溃疡性结肠炎,有效发挥抗炎活性,包括缓解体重下降、腹泻、便血和肠道损伤等,可以有效发挥抗炎作用。因此,本发明证实了莱菔素可以用于有效治疗溃疡性结肠炎,为溃疡性结肠炎的治疗提供了新的药物原料和科学依据。
-
公开(公告)号:CN114480232B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202011154682.3
申请日:2020-10-26
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种生产丙二酸的工程菌,包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体,其中,所述质粒载体中导入了编码木糖脱氢酶、木糖酸脱水酶、醛缩酶、丙二酸单酰辅酶A还原酶和醛脱氢酶的基因。上述工程菌还包括过表达来自大肠杆菌的乙酰辅酶A羧化酶,敲除大肠杆菌体内木糖本身的代谢途径以及副产物途径中的醛还原酶基因来实现丙二酸的增产。本发明还提供一种上述生产丙二酸的工程菌的构建方法和应用。利用上述生产丙二酸的工程菌,以木糖为碳源来生产丙二酸,实现了丙二酸的从头合成,扩大了木糖的工业化应用。
-
公开(公告)号:CN114045276B
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202111322894.2
申请日:2021-11-09
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域,公开了一种比酶活提高的中性玉米赤霉烯酮降解酶突变体。该突变体具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,或该突变体是在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列基础上缺失、替换、插入或/和添加一个至几个氨基酸的保守性突变而获得的保守性变异体。本发明提供的中性玉米赤霉烯酮降解酶突变体的比酶活是野生型的3.3倍,可以广泛应用于真菌毒素玉米赤霉烯酮的酶降解。
-
公开(公告)号:CN114517173B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202011297790.6
申请日:2020-11-19
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种合成高谷氨酸的工程菌,其特征在于,包括:宿主菌和转入该宿主菌的质粒载体,该质粒载体中导入了编码赖氨酸酮戊二酸还原酶、酵母氨酸脱氢酶和α‑氨基己二酸半醛脱氢酶的基因。所述宿主菌还敲除ldcC和cadA基因,整合dapA突变基因与lysC突变基因为T7强启动子,敲除了pgi基因,还整合了谷氨酸棒杆菌中多功能酶的编码基因ddh到dapD基因所在位置,并在ddh基因的上游整合T7强启动子。所述重组质粒载体上还连接有MscCG基因。本发明还提供一种上述合成高谷氨酸的工程菌的构建方法和应用。利用上述合成高谷氨酸的工程菌,以葡萄糖为碳源来生产高谷氨酸,实现了高谷氨酸的高效生物合成。
-
公开(公告)号:CN115491368A
公开(公告)日:2022-12-20
申请号:CN202211140011.0
申请日:2022-09-20
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成4‑羟基苯乙酮和云杉苷的方法,合成途径中包含5个酶,分别为酪氨酸解氨酶(TAL),阿魏酸脱羧酶(FDC1),阿魏酸脱羧酶突变体(将阿魏酸脱羧酶46位的缬氨酸突变为谷氨酸)(FDC1_V46E简称为FDC1*),(S)1‑苯乙醇脱氢酶(ped)和糖基转移酶(UGT72E2)。将这些酶所编码的基因分别在宿主中表达,结果得到可以分别利用对香豆酸,对羟基苯乙烯,对羟基‑1‑苯乙醇和对羟基苯乙酮生产对羟基苯乙烯,对羟基‑1‑苯乙醇,对羟基苯乙酮和云杉苷的生产宿主。将上述5个酶所编码的基因导入宿主菌中实现了对羟基苯乙酮和云杉苷的从头合成。本发明极具工业化生产前景。
-
-
-
-
-
-
-
-
-