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公开(公告)号：CN115851679B
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202211227211.X
申请日：2022-10-09
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及通过重叠PCR技术进行迭代饱和突变获得酶活力提高的碱性蛋白酶酶突变体及其制备与应用。本发明利用重叠PCR技术对克劳氏芽孢杆菌来源的碱性蛋白酶基因apr进行迭代饱和突变，筛选出低温下高活力的突变体，并在解淀粉芽孢杆菌中进行高效表达和制备，解决了低温洗涤环境下碱性蛋白酶活性较低的问题。
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公开(公告)号：CN113604445B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202111068005.4
申请日：2021-09-13
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的酪氨酸酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)野生型的酪氨酸酶基因，利用易错PCR技术对野生型酪氨酸酶基因进行随机突变，得到酪氨酸酶突变体G43R，及其编码基因tyrm，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的酪氨酸酶。
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公开(公告)号：CN111676211B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202010414080.0
申请日：2020-05-15
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种抗自切和高比活力胰蛋白酶突变体，具体涉及通过分子改造和筛选获得胰蛋白酶的抗自切和高比活力突变体及其编码基因与应用，属于蛋白质和基因工程技术领域。本发明提供的胰蛋白酶突变体是在SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的基础上发生至少一个以下位点的突变获得的：R107H、R107L、R115S、R115T、K133A、K133A、K147D、K157E、K208P、K210A。比原始酶相比，具有更好的抗自切性能及更高的比活力，相对于野生型胰蛋白酶，抗自切性能提高0.67‑2.88倍，比酶活提高0.07‑2.98倍，改善了胰蛋白酶储存和使用过程中容易自切降低活力的问题。
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公开(公告)号：CN113945668A
公开(公告)日：2022-01-18
申请号：CN202111080194.7
申请日：2021-09-15
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明公开了一种基于气相色谱质谱联用(GC‑MS)靶向检测啮齿类动物体内非结合胆汁酸的方法及其试剂盒。具体地本发明中公开了啮齿类动物体内主要非结合胆汁酸进行GC‑MS靶向检测的特征离子。本发明实现了啮齿类动物体内8种非结合胆汁酸的GC‑MS分析，为啮齿类动物体内非结合胆汁酸的检测提供了可靠的高灵敏度和高重复性的方法。
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公开(公告)号：CN113604445A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202111068005.4
申请日：2021-09-13
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种酶活力提高的酪氨酸酶突变体及其制备。本发明通过分子生物学技术手段获得阿耶波多氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)野生型的酪氨酸酶基因，利用易错PCR技术对野生型酪氨酸酶基因进行随机突变，得到酪氨酸酶突变体G43R，及其编码基因tyrm，重新构建重组质粒，并实现了其在枯草芽孢杆菌中的高效表达，通过发酵、提取等技术获得高活力的酪氨酸酶。
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公开(公告)号：CN110144319B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201910332253.1
申请日：2019-04-24
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供了一种高效异源表达碱性蛋白酶的基因工程菌，是利用核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的启动子与信号肽组合与克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶基因aprE构建重组表达载体，并转入枯草芽孢杆菌宿主WB600中，最终电转到解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.11218中，获得重组基因工程菌。利用该基因工程菌发酵生产的重组碱性蛋白酶的摇瓶发酵活力达到20000U/mL，是原始启动子P43和信号肽SPSacB组合的2.8倍，在5L罐放大实验，该重组菌株酶活达到60000U/mL，为实现碱性蛋白酶的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111676211A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN202010414080.0
申请日：2020-05-15
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种抗自切和高比活力胰蛋白酶突变体，具体涉及通过分子改造和筛选获得胰蛋白酶的抗自切和高比活力突变体及其编码基因与应用，属于蛋白质和基因工程技术领域。本发明提供的胰蛋白酶突变体是在SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的基础上发生至少一个以下位点的突变获得的：R107H、R107L、R115S、R115T、K133A、K133A、K147D、K157E、K208P、K210A。比原始酶相比，具有更好的抗自切性能及更高的比活力，相对于野生型胰蛋白酶，抗自切性能提高0.67-2.88倍，比酶活提高0.07-2.98倍，改善了胰蛋白酶储存和使用过程中容易自切降低活力的问题。
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公开(公告)号：CN110106128A
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201910332240.4
申请日：2019-04-24
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明提供了一种生产重组碱性蛋白酶的基因工程菌，是利用核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的启动子与信号肽组合与克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶基因aprE构建重组表达载体，并转入枯草芽孢杆菌宿主WB600中，最终电转到解淀粉芽孢杆菌CGMCC No.11218中，获得重组基因工程菌。利用该基因工程菌发酵生产的重组碱性蛋白酶的摇瓶发酵活力达到18000U/mL，是原始启动子P43和信号肽SPSacB组合的2.52倍，在5L罐放大实验，该重组菌株酶活达到58000U/mL，为实现碱性蛋白酶的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105628631B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201511014228.7
申请日：2015-12-28
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： G01N21/31
摘要： 本发明涉及一种氢化可的松生物催化转化率的快速检测方法，利用发酵后的主产物氢化可的松、副产物表氢化可的松及底物RSA与浓硫酸反应显示不同颜色，根据朗伯比尔定律结合三维数据建模，通过可见光双波长检测，即可间接计算发酵液中氢化可的松的转化率。本发明操作简单快捷，测试时间短、试样用量小，容易实现并行操作，精确性高。重复性误差在10％以内；可检出氢化可的松的转化率在10％‑95％之间，检测方法操作简单快捷，单个样品的测试时间在20min之内，而薄层层析法及高效液相色谱法所需时间较长。
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公开(公告)号：CN108113994A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201810030947.5
申请日：2018-01-12
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： A61K31/7048 , A61P25/28
CPC分类号： A61K31/7048
摘要： 本发明属于医药技术领域。本发明提供了矢车菊素-3-O-葡萄糖苷在制备抑制β-淀粉样蛋白聚集的药物或保健品的用途，本发明的有益效果是矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为制备抑制β-淀粉样蛋白聚集的药物或保健品，可以有效抑制Aβ42的聚集及其构象变化过程，并降低聚集过程中所产生的细胞毒性。
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