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公开(公告)号：CN113061562B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202110317317.8
申请日：2021-03-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用钝齿棒杆菌发酵生产1,4‑丁二胺的方法，属于基因工程技术领域。通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将精氨酸脱羧酶编码基因经突变后与胍丁胺酶编码基因串联成功并在精氨酸高产菌株中过表达。摇瓶发酵结果表明，原始菌不具有生产有活性的精氨酸脱羧酶和胍丁胺酶的能力，而重组工程菌可以完成L‑精氨酸到1,4‑丁二胺的转化。同时基于此基因工程菌株具有高产L‑精氨酸的特性，成功采用一步发酵法以葡萄糖为底物生产1,4‑丁二胺。本发明方法生产1,4‑丁二胺，具有效率高、副产物L‑精氨酸、胍基丁胺和其他杂酸余量低的优点，后期对于产物1,4‑丁二胺的分离纯化更加容易。
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公开(公告)号：CN114717172B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210277913.2
申请日：2022-03-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种合成L‑缬氨酸的大肠杆菌及其构建方法与应用，涉及生物技术领域。本发明所述大肠杆菌命名为大肠杆菌W3110，于2022年03月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏编号为CCTCC M 2022293。所述重组大肠杆菌以大肠杆菌为出发菌株，过表达转录调控因子，得到所述重组大肠杆菌。本发明所述的合成L‑缬氨酸的重组大肠杆菌在5L发酵罐微溶氧条件下发酵测试菌株，L‑缬氨酸产量达到92g/L，菌体OD为106。
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公开(公告)号：CN113073074B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202110388765.7
申请日：2021-04-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成核黄素的基因工程菌及其应用，属于生物发酵技术领域，本发明通过敲除了编码purR的基因，敲低了编码glnR和tnrA的基因，并且采用过表达了来源于玻璃颤菌的血红蛋白，解除发酵过程中的溶氧限制，降低发酵过程中的能源消耗，提高核黄素产量；采用本发明构建的工程菌株RF1‑aPaGaTgV的核黄素产量在摇瓶阶段提高了50.78％，达到2.51g/L。在5‑L发酵水平，采用本发明构建的RF1‑aPaGaTgV的核黄素的最高产量提高了45.51％，达到10.71g/L。
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公开(公告)号：CN114958693A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210770685.2
申请日：2022-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一株枯草芽孢杆菌、一种重组枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物发酵技术领域。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)RF1‑6是以核黄素高产菌株RF1作为出发菌株，经过基因改造和诱变，筛选得到的核黄素产量最高的突变株，保藏编号为CCTCCNO：M2022565。与核黄素高产菌株RF1相比，核黄素产量能够提高22.8％。
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公开(公告)号：CN114891710A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210604061.3
申请日：2022-05-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过重构辅酶再生系统强化重组大肠杆菌催化合成胆绿素的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过从Clostridium tetani中获得血红素加氧酶，以E.coliBL21(DE3)作为底盘细胞，pETDuet为表达载体构建重组大肠杆菌，实现该酶的表达。强化大肠杆菌中谷氨酸脱氢酶的表达，引入辅酶NADPH再生系统，成功构建重组菌株E.coliBL21/pETDuet‑gdhAEc‑hoCt，实现E.coli来源的GdhA和C.tetani来源的HO共表达。该重组菌在无需额外添加辅酶NADPH条件下，即可进行全细胞催化血红素合成胆绿素，转化率高达71.5％，为胆绿素的高效生产提供了新途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111718882B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202010501734.3
申请日：2020-06-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用离子转运蛋白促进谷氨酸棒杆菌合成氨基酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明以L‑谷氨酸生产菌株谷氨酸棒杆菌G01和L‑精氨酸生产菌株钝齿棒杆菌SDNN403为出发菌株，在其中过表达功能性摄钾蛋白CglK和阳离子转运ATP酶CTAP，分别得到了生产L‑谷氨酸的重组菌GC‑K，和生产L‑精氨酸的重组菌CC‑K。使得L‑谷氨酸的产量较出发菌株提高了31.5％，使得L‑精氨酸的产量较原始菌株提高了36.1％。
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公开(公告)号：CN111534474B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202010237129.X
申请日：2020-03-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了重组枯草芽孢杆菌及其在生产ε‑聚赖氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高效转化L‑赖氨酸生产ε‑聚赖氨酸的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5‑pls，将此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5‑pls添加至含有L‑赖氨酸的反应体系中反应4h，即可使反应液中ε‑聚赖氨酸的产量以及转化率分别高达195.1mg/L和17.4％，因此，利用此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5‑pls生产ε‑聚赖氨酸具有生产周期短、产量高的优势。
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公开(公告)号：CN111849848B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ‑氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21‑pET28a(+)‑YafC‑Gad，并用于生物转化生产γ‑氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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公开(公告)号：CN111394291B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202010227468.X
申请日：2020-03-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用重组谷氨酸棒杆菌发酵生产L‑谷氨酸的方法，属于生物技术领域。本发明提供了一种可低产L‑丙氨酸、L‑酪氨酸、L‑缬氨酸、L‑胱氨酸和L‑甲硫氨酸等副产物的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum G01/pXMJ19‑cg2115，将此菌株接种至5‑L发酵罐中发酵48h所获得的发酵液中L‑丙氨酸、L‑酪氨酸、L‑缬氨酸、L‑胱氨酸和L‑甲硫氨酸的含量分别仅有0.15g/L、0.185g/L、0.369g/L、0.02g/L和0.277g/L，分别较野生型谷氨酸棒杆菌G01降低了98.1％、96.1％、86.1％、99.4％和91.4％。
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公开(公告)号：CN111593038B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202010584474.0
申请日：2020-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种稳定性提高的谷氨酰胺酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域，本发明提供的谷氨酰胺酶突变体是将罗伊氏乳杆菌来源的谷氨酰胺酶亲本的第37位的酪氨酸突变为了半胱氨酸，谷氨酰胺酶突变体突变体在44℃时半衰期达到12h，其稳定性相对于突变前的谷氨酰胺酶提高了50％。
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