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公开(公告)号：CN116064579A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211091210.7
申请日：2022-09-07
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12N15/84 , C07K14/415 , A01H5/12 , A01H6/82
摘要： 本发明涉及一种影响烟草腺毛密度基因NsCINS、编码蛋白及其应用，其基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过构建NsCINS基因超量表达载体，转化至烟草中，获得NsCINS基因超表达的烟草植株，发现转基因烟草植株的腺毛密度显著增加，表明该基因与烟草腺毛密度密切相关。本发明有助于研究腺毛及香气形成的机制，为进一步高腺毛密度烟草新品种培育奠定技术基础。
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公开(公告)号：CN115354013A
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN202210986948.3
申请日：2022-08-17
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N5/04
摘要： 本申请属于烟草组织器官解剖技术领域，具体涉及一种烟草原生质体制备方法。该方法针对烟草根部细胞、或者烟叶细胞的原生质体制备分离应用，包括：准备酶解液、材料预处理、酶解提取、原生质体分离等步骤。在对现有植物细胞原生质体提取方法研究总结基础上，发明人结合烟草根组织、烟叶细胞的结构特点，结合次生代谢产生代谢组学研究需要，对酶解法制备原生质体过程中所需的生物酶类型和用量进行了进一步优化设计，构建了适合烟草根尖来源或者烟叶腺毛来源的原生质体制备方法。初步实验结果表明，制备所得原生质体数量多、活性高，同时由于相关提取方法简单快速、耗时较短，因此使得本申请具有较好的科研实用价值。
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公开(公告)号：CN113061619B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202110480192.0
申请日：2021-04-30
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草生物技术领域，具体涉及若干与烟气苯酚释放量相关的突变基因序列。与烟气苯酚释放量相关的突变基因TyrA为烟草阿罗酸脱氢酶基因，其碱基序列如SEQ ID NO.3所示。本申请中，发明人通过对烟草DHQ‑SDH1、TyrA基因的进一步研究，发现这两个基因与烟草酪氨酸和烟气苯酚释放量含量高度相关。基于此发现，进一步结合Tilling筛选技术，通过分析预测编码蛋白发生的有义突变，进行蛋白三级结构预测，同时结合实际大田实验验证，结果表明，这两个基因突变后，烟草中酪氨酸含量和烟气苯酚释放量发生了明显降低。基于这些研究结果，可为烟草低苯酚含量烟叶新品种培育奠定一定理论基础和技术基础。
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公开(公告)号：CN110819639B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN201911317235.2
申请日：2019-12-19
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程技术领域，具体涉及一个与烟草低温早花相关的NtDUF599基因及其应用的专利申请。该基因由711 bp碱基组成，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。该基因编码236个氨基酸，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。基于现有烟草基因工程进展和相关植物表型观察和鉴定，发明人对特定基因NtDUF599进行了深入研究，发现其与烟草低温早花现象高度相关。在将该基因沉默，并对转基因植株进行低温胁迫处理后，转基因植株的开花时间得到了明显提前，表明该基因与植株响应低温胁迫、植株的生殖生长均具有十分密切的关联。而基于此研究结果，可为进一步的烟草新品种培育奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN111004808B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201911317395.7
申请日：2019-12-19
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及一个烟草蛋白NtVHA‑a1及其应用专利申请。该基因由2454个碱基构成，其中特异性核酸片段为1042‑1371位碱基，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。烟草蛋白NtVHA‑a1氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，由817个氨基酸残基组成。在对烟草中生物胺类物质含量相关调控基因的研究过程中，发明人通过对特定烟草蛋白NtVHA‑a1的研究，发现其与烟草生物胺类物质、尤其是精胺含量高度相关。进一步基因功能验证过程中，在将该基因沉默后，烟草中精胺含量发生了明显降低。基于这一特性，可为烟草品质调控、烟草新品种培育奠定一定技术基础和提供一定参考借鉴。
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公开(公告)号：CN113667684A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110516203.6
申请日：2021-05-12
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本申请属于烟草基因组功能解析技术领域，具体涉及一个烟草NtIMK2类受体蛋白激酶及其在抗旱中的应用。该基因长度为2511bp，碱基序列如SEQ ID No.1所示。将该基因超表达后，可用于增强植物耐旱性，将该基因沉默后，可增加植物对干旱的敏感性。前期在对烟草基因组解析基础上，结合相关磷酸化蛋白质组学、转录组、和miRNA‑seq等多组学整合分析，发现一个LRR类受体激酶（RLKs）NtIMK2基因的表达与干旱响应高度相关。为进一步确定该基因功能及其在植物干旱胁迫响应机制中作用，本申请中，发明人利用RNAi干涉及过表达技术，对NtIMK2基因在干旱胁迫中的功能进行了初步研究，结果表明，超表达NtIMK2基因时，能明显提高植物的抗旱能力。
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公开(公告)号：CN112813181A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110156904.3
申请日：2021-02-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及适用于雪茄烟不同组织基因表达分析的内参基因及其应用。本发明通过geNorm、NormFinder和BestKeeper三个分析软件对RPL8、RPL14A、RPS16、UBC27、UBC28、UBC35、AC10、EIF2、PSAP和CPI十个候选内参基因在雪茄烟不同发育时期不同组织(根、茎、叶、花萼、花冠、柱头、子房、雄蕊、雌蕊和种子)中的表达稳定性进行了分析。结果表明RPL14A和/或UBC27基因在雪茄烟不同发育时期不同组织中稳定表达，即RPL14A和/或UBC27基因能够作为雪茄烟不同组织荧光定量PCR的内参基因。本发明进一步提供了RPL14A基因和UBC27基因的qRT‑PCR引物，为雪茄烟不同组织基因表达的精确定量分析奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112760405A
公开(公告)日：2021-05-07
申请号：CN202110158037.7
申请日：2021-02-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/29 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及适用于盐胁迫条件下雪茄烟基因表达分析的内参基因及其应用。本发明通过geNorm、NormFinder和BestKeeper三个分析软件对RPL8、RPL14A、RPS16、UBC27、UBC28、UBC35、AC10、EIF2、PSAP和CPI十个候选内参基因在雪茄烟盐胁迫条件下的表达稳定性进行了分析。结果表明UBC28基因在雪茄烟不同条件盐处理组织中稳定表达，即UBC28基因能够作为qRT‑PCR的内参基因。本发明进一步提供了UBC28基因的qRT‑PCR引物，为雪茄烟盐胁迫条件下基因表达的精确定量分析奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107099540B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201710547702.5
申请日：2017-07-06
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一个影响烟草色素含量的NtFERL基因及其应用的专利申请。该基因包括2667bp碱基，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第2017‑2405位核苷酸是其特异性核心片段。本申请通过对烟草NtFERL基因的克隆、对应蛋白的分析，发明人发现该基因在烟草色素合成途径调控上具有重要的用途，与植物叶片中色素类物质含量高度相关。进一步通过病毒介导的基因沉默技术，发明人发现在将NtFERL基因沉默后，新的转基因植株中的色素类物质含量明显降低。利用这一特性，可为烟草的基因工程育种或其他植物新品种培育提供新的策略和路径。
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公开(公告)号：CN111019954A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911317412.7
申请日：2019-12-19
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及烟草基因及其应用专利申请。该基因碱基序列如SEQ ID NO.1所示，烟草蛋白ACTB由449个氨基酸残基组成。该蛋白与植物叶片中多酚类物质含量相关，降低该蛋白表达后，叶片中绿原酸含量明显降低。本发明通过对特定烟草蛋白ACTB的初步研究，发现其与烟草绿原酸含量高度相关，在将该基因沉默后，烟草中绿原酸含量明显降低。基于这一特性，可为烟草新品种培育一定的应用基础和参考借鉴。
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