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公开(公告)号：CN118697881A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410713525.3
申请日：2024-06-04
Applicant: 上海交通大学
IPC: A61K45/00 , A61K38/53 , A61K48/00 , A61K39/205 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16 , A61P35/00 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/52 , C12N5/10 , C12N5/077 , C12N15/63
Abstract: 本发明涉及一种RNF20基因在天然免疫相关疾病及制备病毒疫苗中的应用。本发明通过构建RNF20细胞质和细胞核定位模型，发现鸡RNF20双向调控天然免疫应答，并证明了RNF20基因作为靶点在预防和/或治疗天然免疫相关疾病中的用途。本发明还利用CRISPR‑Cas9系统构建了敲除RNF20基因的细胞系，并验证了该细胞系可以促进NDV‑GFP、AIV和VSV‑GFP病毒复制；且该RNF20基因敲除细胞系在疫苗制备中具有较高的表达效率和稳定性，可用于生产各类鸡疫苗，提高疫苗的生产效率和质量。
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公开(公告)号：CN117965641A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410280064.5
申请日：2024-03-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/70 , C12N15/74 , C12N15/75 , C12N9/02 , C12N15/53 , C12N1/21 , C12R1/19 , C12R1/125 , C12R1/225
Abstract: 本发明涉及基因功能的确定与应用，特别是涉及Dsb家族基因的应用。本发明基于转座子随机插入突变技术，发掘到与噬菌体复制直接相关的功能基因‑Dsb家族基因，尤其是DsbA。本发明发现DsbA基因缺失后发酵菌株呈现噬菌体感染的抗性，但是缺失株的生长特性没有发生改变，提示DsbA基因具备潜在调控噬菌体复制的能力，可在发酵菌控制噬菌体感染，提高发酵效率。进一步通过实验确定DsbA蛋白依赖自身的C49和C52两个关键氨基酸介导的二硫键修饰功能，促进穿孔素Holin蛋白利用自身的C17发生寡聚化，调控Holin蛋白在细菌内膜上的打孔能力，进而促进细菌裂解和子代噬菌体释放。
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公开(公告)号：CN110499314B
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN201910749622.7
申请日：2019-08-14
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/79 , C12N15/65
Abstract: 本发明涉及蛋白真核表达启动子与蛋白表达载体及其构建方法与应用。蛋白表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒，所述外源基因表达盒自上游至下游依次由蛋白真核表达启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成，所述连接片段含有AfeI识别序列。与现有技术相比，本发明的蛋白表达载体利用蛋白真核表达启动子驱动外源基因表达，该载体含有的启动子元件在禽源与人源细胞中均具有高效的蛋白表达效率，而且本载体的构建过程简便、快速、经济、高效。本发明的蛋白表达载体具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN111187782A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN202010064111.4
申请日：2020-01-20
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/50 , C07K14/165 , C12N15/866 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种猪Delta冠状病毒病毒样颗粒及其制备方法和应用，首先设计并扩增猪Delta冠状病毒结构蛋白基因，并利用结构蛋白基因构建重组穿梭质粒，利用重组穿梭质粒构建重组杆粒，将重组杆粒转染Sf9细胞，得到表达猪Delta冠状病毒结构蛋白的重组杆状病毒，将重组杆状病毒感染Sf9细胞，纯化，得到猪Delta冠状病毒样颗粒；本发明的制备方法使用无血清培养的Sf9细胞表达制备，结合蔗糖密度溶液超速离心获得PDCoV-VLP病毒样颗粒，该PDCoV-VLP病毒样颗粒具有完整性，免疫原性好，免疫动物产生抗体滴度和安全性高的优点，可用于猪Delta冠状病毒病毒病的预防，故具有良好的开发和应用前景。
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公开(公告)号：CN111141903A
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN202010044913.9
申请日：2020-01-16
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了三重同时检测镰刀菌毒素的胶体金免疫层析试纸条、其制备方法和应用，包括：将分别包被有ZEN-BSA、DON-BSA、FB1-BSA的检测线和羊抗鼠IgG抗体的控制线的硝酸纤维素膜、喷涂有FB1、DON、ZEN的单克隆抗体-胶体金颗粒标记物混合物的结合垫、样品垫和吸水垫按顺序依次粘贴于底板上，组装后切小条得到。本发明将三种镰刀菌毒素的检测整合在一个试纸条上，形成的多通道检测效率高，且所得试纸条特异性好、灵敏度高，操作简单，非专业人员也可使用，满足粮食储存销售机构、出入境检疫、海关、生产企业、监督部门等快速准确地判断FB1、DON和ZEN毒素具体含量的要求，便于基层推广和运用。
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公开(公告)号：CN109180822A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811353476.8
申请日：2018-11-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌B细胞优势表位串联蛋白，同时本发明涉及一种猪链球菌B细胞优势表位串联疫苗的制备方法，第三方面，本发明公开了B细胞优势表位串联基因和融合蛋白在制备疫苗中的应用，本发明通过软件筛选出猪链球菌保护性抗原GAPDH、MRP和DLDH的B细胞优势表位并以氨基酸序列为GGGG的柔性片段进行串联，将上述串联片段构建重组表达载体进行原核表达，纯化表达的融合蛋白并与弗氏佐剂制成疫苗制剂，经小鼠免疫效力评价表明该疫苗能够对2型猪链球菌提供高效的免疫保护效力，相对于传统灭活疫苗和弱毒疫苗，本发明提供的基因工程疫苗具备制备流程方便安全，生产效率高，所得产物纯度高、稳定性好、产量高、安全性高等优点。
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公开(公告)号：CN102539499B
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201210002405.X
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/30 , G01N33/577 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开了一种复合纳米修饰丝网印刷电极及检测伏马毒素B1的方法。所述丝网印刷电极的工作电极上涂覆有多壁碳纳米管-胶体金-壳聚糖混合物膜层。制备过程为：将多壁碳纳米管活化，制备胶体金，利用壳聚糖将多壁碳纳米管和胶体金混合均匀；将混合物涂覆在工作电极表面，37℃干燥成膜，即得。本发明检测伏马毒素B1的方法是鉴于待测样品若有FB1毒素，则与抗FB1抗体竞争结合，使与电极上的FB1-OVA结合的抗体量减少，并由此使电极上HRP-羊抗鼠二抗的量也减少，并影响电流变化值ΔI；然后根据FB1标准品绘制的标准曲线来判定谷物检测样品中FB1的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，灵敏度强。
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公开(公告)号：CN102198265B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201110068767.4
申请日：2011-03-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的应用噬菌体裂解酶降解猪链球菌生物被膜的方法，采用表达菌BL21-lys表达分子量为55kDa的裂解酶LySMP，经过Ni柱纯化得到裂解酶，并在体外用该裂解酶降解利用细胞培养板培养得到的猪链球菌生物被膜。本发明在杀灭猪链球菌SS2-4和SS2-H的同时，也可以破坏生物被膜的结构以达到彻底清除生物被膜的作用。
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公开(公告)号：CN102565163A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210002341.3
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/333 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开了一种丝网印刷电极及其制备方法和检测玉米赤霉烯酮的方法。所述丝网印刷电极的工作电极区域涂覆有Nafion-多壁碳纳米管-胶体金-壳聚糖混合物膜层。制备时将多壁碳纳米管活化后和Nafion混合；制备胶体金，利用壳聚糖将Nafion-多壁碳纳米管和胶体金混合均匀；将混合物涂覆工作电极的工作区域上，37℃干燥成膜。本发明检测ZEN的方法是鉴于待测样品若有ZEN毒素，则与抗ZEN抗体竞争结合，使与电极上ZEN-OVA结合的抗体量减少，由此使电极上HRP-羊抗鼠二抗量也减少，并影响ΔI；然后根据ZEN标准品绘制的标准曲线来判定谷物检测样品中ZEN的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，灵敏度强。
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公开(公告)号：CN1952647A
公开(公告)日：2007-04-25
申请号：CN200610028327.5
申请日：2006-06-29
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种MGB探针多重荧光定量PCR检测大肠杆菌O157的方法，构建重组质粒，设计合成引物和Taqman－MGB探针，进行二重荧光定量PCR，将大肠杆菌O157的rfbE、vt2的一段保守序列进行PCR扩增，获得目的片断，再将目的片断与PMD 18－T Vector连接，得到重组质粒，将重组质粒转化DH5a感受态大肠杆菌细胞，扩大培养，获得高浓度的质粒，将此高浓度质粒作10倍比稀释，作为标准样品，将标准样品和待测样品共同作二重荧光定量PCR，标准样品形成标准曲线，根据标准曲线可计算出待检样品中大肠杆菌O157的含量。本发明使用MGB探针，具有更高的敏感性和特异性，能快速、准确地检测样本中的大肠杆菌O157含量，可同时检测大肠杆菌O157的两个特异性毒力基因，是一种快速、准确的大肠杆菌O157检测方法。
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