一种重组蛋白、核酸分子和重组噬菌体及其应用

    公开(公告)号:CN119751703A

    公开(公告)日:2025-04-04

    申请号:CN202411985306.7

    申请日:2024-12-31

    Abstract: 本发明涉及生物医药领域,特别是涉及一种重组蛋白、核酸分子和重组噬菌体及其应用。本发明提供了氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的重组蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示的重组蛋白及其在制备疫苗中的应用。注射利用该重组蛋白制备得到的疫苗能够有效预防冠状病毒感染。本发明选择PEDV S蛋白作为表位设计的候选抗原,选择两种与特异性S蛋白表位相连的靶向肽,选择M13KE噬菌体作为PEDV表位的递送载体,并利用动物实验,来评估PEDV疫苗的效果。结果显示:接种疫苗的小鼠的淋巴细胞对PEDV抗原表现出明显的增殖反应;接种疫苗的小鼠血清中IFN‑γ水平显著升高。

    复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用

    公开(公告)号:CN109820835B

    公开(公告)日:2021-04-02

    申请号:CN201910059452.X

    申请日:2019-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用。所述抗菌制剂包括载体细菌承载噬菌体的复合物,所述载体细菌为金黄色葡萄球菌,所述噬菌体为金黄色葡萄球菌烈性噬菌体。优选所述载体细菌为金黄色葡萄球菌SH‑5,所述噬菌体为噬菌体SLPW。所述抗菌制剂的制备方法,包括如下步骤:S1、噬菌体的纯化;S2、用载体细菌吸附噬菌体后,得到载体细菌承载噬菌体的复合物。本发明的复合型胞内抗菌制剂能够进入皮肤角质细胞内部,高效杀死细胞内感染的MRSA菌株;经细菌‑噬菌体复合物处理后的感染的角质细胞状态恢复迅速,细胞的促炎性细胞因子和细胞毒性显著下降。

    复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用

    公开(公告)号:CN109820835A

    公开(公告)日:2019-05-31

    申请号:CN201910059452.X

    申请日:2019-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种复合型胞内金黄色葡萄球菌抗菌制剂及其制备和应用。所述抗菌制剂包括载体细菌承载噬菌体的复合物,所述载体细菌为金黄色葡萄球菌,所述噬菌体为金黄色葡萄球菌烈性噬菌体。优选所述载体细菌为金黄色葡萄球菌SH-5,所述噬菌体为噬菌体SLPW。所述抗菌制剂的制备方法,包括如下步骤:S1、噬菌体的纯化;S2、用载体细菌吸附噬菌体后,得到载体细菌承载噬菌体的复合物。本发明的复合型胞内抗菌制剂能够进入皮肤角质细胞内部,高效杀死细胞内感染的MRSA菌株;经细菌-噬菌体复合物处理后的感染的角质细胞状态恢复迅速,细胞的促炎性细胞因子和细胞毒性显著下降。

    杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素及其制备和应用

    公开(公告)号:CN109666667A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201910060337.4

    申请日:2019-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种杀灭金黄色葡萄球菌的嵌合酶抗生素及其制备和应用。所述嵌合酶抗生素包括胞质转导肽CTP与金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶JDlys串联的重组蛋白CTP-JDlys。所述嵌合酶抗生素的制备方法包括:S1、设计引物,分别以裂解酶JDlys基因和胞质转导肽CTP基因为模板,扩增JDlys基因片段和CTP基因片段;S2、将扩增得到的JDlys基因构建重组质粒,将扩增得到的CTP基因插入至所述重组质粒中JDlys基因的5`端,构建含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒;S3、将所述含目标基因片段CTP-JDlys的重组质粒经表达、纯化后,获得嵌合酶抗生素蛋白CTP-JDlys。本发明提供的CTP-JDlys蛋白能进入皮肤角质细胞内高效治疗耐药金黄色葡萄球菌引起的小鼠皮肤脓肿。

    Dsb家族基因的应用
    6.
    发明授权

    公开(公告)号:CN117965641B

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202410280064.5

    申请日:2024-03-12

    Abstract: 本发明涉及基因功能的确定与应用,特别是涉及Dsb家族基因的应用。本发明基于转座子随机插入突变技术,发掘到与噬菌体复制直接相关的功能基因‑Dsb家族基因,尤其是DsbA。本发明发现DsbA基因缺失后发酵菌株呈现噬菌体感染的抗性,但是缺失株的生长特性没有发生改变,提示DsbA基因具备潜在调控噬菌体复制的能力,可在发酵菌控制噬菌体感染,提高发酵效率。进一步通过实验确定DsbA蛋白依赖自身的C49和C52两个关键氨基酸介导的二硫键修饰功能,促进穿孔素Holin蛋白利用自身的C17发生寡聚化,调控Holin蛋白在细菌内膜上的打孔能力,进而促进细菌裂解和子代噬菌体释放。

    Dsb家族基因的应用
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117965641A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410280064.5

    申请日:2024-03-12

    Abstract: 本发明涉及基因功能的确定与应用,特别是涉及Dsb家族基因的应用。本发明基于转座子随机插入突变技术,发掘到与噬菌体复制直接相关的功能基因‑Dsb家族基因,尤其是DsbA。本发明发现DsbA基因缺失后发酵菌株呈现噬菌体感染的抗性,但是缺失株的生长特性没有发生改变,提示DsbA基因具备潜在调控噬菌体复制的能力,可在发酵菌控制噬菌体感染,提高发酵效率。进一步通过实验确定DsbA蛋白依赖自身的C49和C52两个关键氨基酸介导的二硫键修饰功能,促进穿孔素Holin蛋白利用自身的C17发生寡聚化,调控Holin蛋白在细菌内膜上的打孔能力,进而促进细菌裂解和子代噬菌体释放。

    一种猪链球菌B细胞优势表位串联疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN109180822A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811353476.8

    申请日:2018-11-14

    Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌B细胞优势表位串联蛋白,同时本发明涉及一种猪链球菌B细胞优势表位串联疫苗的制备方法,第三方面,本发明公开了B细胞优势表位串联基因和融合蛋白在制备疫苗中的应用,本发明通过软件筛选出猪链球菌保护性抗原GAPDH、MRP和DLDH的B细胞优势表位并以氨基酸序列为GGGG的柔性片段进行串联,将上述串联片段构建重组表达载体进行原核表达,纯化表达的融合蛋白并与弗氏佐剂制成疫苗制剂,经小鼠免疫效力评价表明该疫苗能够对2型猪链球菌提供高效的免疫保护效力,相对于传统灭活疫苗和弱毒疫苗,本发明提供的基因工程疫苗具备制备流程方便安全,生产效率高,所得产物纯度高、稳定性好、产量高、安全性高等优点。

    一种大肠杆菌噬菌体微囊化微球及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN119745826A

    公开(公告)日:2025-04-04

    申请号:CN202411979410.5

    申请日:2024-12-31

    Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,特别是涉及一种大肠杆菌噬菌体微囊化微球及其制备方法和应用。本发明提供了一种大肠杆菌噬菌体微囊化微球,包括以下原料:海藻酸钠溶液、乳清蛋白溶液、氯化钙溶液、羧甲基纤维素溶液和大肠杆菌噬菌体溶液。本发明具体实施例对微囊化微球进行了一系列指标的评价,结果显示:该微囊化微球的粒径约为2.040mm,为比较规则的球形;相对于传统的海藻酸钠微球,该微囊化微球具有更强的疏水效果和更好的热稳定性;并且海藻酸钠、乳清蛋白和羧甲基纤维素的包裹使噬菌体在体外模拟胃液中90min存活率提升约500倍;在模拟肠液中,微囊化微球能够在2h内将包裹的噬菌体完全释放。

    葡萄球菌裂解酶LysNM及其编码基因在制备抗菌剂中的应用

    公开(公告)号:CN119733037A

    公开(公告)日:2025-04-01

    申请号:CN202411951321.X

    申请日:2024-12-27

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及葡萄球菌裂解酶LysNM及其编码基因在制备抗菌剂中的应用。本发明提供了葡萄球菌裂解酶LysNM及其编码基因在制备抗菌剂中的新应用。体外实验结果表明:葡萄球菌裂解酶LysNM在体外的杀菌效率达到98.80%;葡萄球菌裂解酶LysNM在血浆中稳定性较好;葡萄球菌裂解酶LysNM几乎不影响细胞增殖,且对细胞没有毒性;葡萄球菌裂解酶LysNM几乎不会引起促炎性细胞因子的表达。体内实验结果表明:葡萄球菌裂解酶LysNM在小鼠体内使用具备良好的安全性,并且在感染细菌后立即使用葡萄球菌裂解酶LysNM进行治疗,小鼠存活率能够达到70%。

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