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公开(公告)号：CN110872344A
公开(公告)日：2020-03-10
申请号：CN201911131748.4
申请日：2019-11-19
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K1/113 , C07K1/02 , C07K16/44 , G01N33/68 , C07C231/02 , C07C233/73
Abstract: 本发明公开了一种氯霉素完全抗原及其制备方法与应用。本发明氯霉素完全抗原，为半抗原与载体蛋白的偶联物；其中，所述半抗原的结构式如下式Ⅰ所示： 它的制备方法，包括如下步骤：先合成所述半抗原；然后将所述半抗原活化，与所述载体蛋白进行偶联，即得到所述氯霉素完全抗原。一种氯霉素抗体，它通过上述的氯霉素完全抗原制备。本发明氯霉素完全抗原或氯霉素抗体在如下1)或2)中的应用：1)检测样品中氯霉素；2)制备成检测样品中氯霉素的酶联免疫试剂盒、试纸条和免疫亲和色谱柱中至少一种；其中，所述样品为水体和/或食品。本发明氯霉素完全抗原能够用于羊驼抗体制备的氯霉素完全抗原，为进一步筛选高质量的氯霉素纳米抗体奠定条件。
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公开(公告)号：CN107328932A
公开(公告)日：2017-11-07
申请号：CN201710493752.X
申请日：2017-06-26
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/543 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K1/107 , C07K16/44 , C07K16/06
CPC classification number: G01N33/94 , C07K1/1077 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/06 , C07K16/44 , C07K19/00 , G01N33/54353
Abstract: 本发明公开了一种检测双氢青蒿素的方法及所用半抗原、抗原、抗血清和抗体。本发明所提供的双氢青蒿素的检测方法，包括利用抗血清或抗体实现双氢青蒿素的检测；抗血清和抗体分别为利用式(Ⅱ)所示化合物与载体蛋白的偶联物作为免疫原制备得到的抗血清和抗体；载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白；双氢青蒿素的检测方法采用酶联免疫吸附方法进行。实验证明，本发明的式(Ⅱ)所示化合物可以作为半抗原，与载体蛋白偶联后得到的抗原免疫动物，可以得到特异性针对双氢青蒿素抗原的抗体，且灵敏度高，双氢青蒿素检测IC50值可达1.16ng/mL。
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公开(公告)号：CN101949921B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201010253930.X
申请日：2010-08-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/535 , G01N33/577 , C07K16/44 , C12N5/20 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种酶标物及其应用。该重金属酶标物，是络合物与酶形成的交联物；所述络合物为螯合剂与载体蛋白的偶联物与重金属形成的络合物。本发明所提供的制备铜离子酶标物的制备方法简单，合成成本低，HRP活性损失小。用本发明方法制备的酶标物所建立的ELISA检测方法具有很高的灵敏度。本发明的制备铜离子ELISA检测用酶标物的方法对其他重金属ELISA检测用酶标物的成功制备具有重要的参考价值，由该方法建立的铜离子快速免疫检测方法将有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102627628B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201210060248.8
申请日：2012-03-08
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07D401/04 , C07D401/14 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K1/113 , C07K16/44 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种氯虫苯甲酰胺抗原及其制备方法与应用。该氯虫苯甲酰胺抗原如式C所示，是氯虫苯甲酰胺与载体蛋白通过酰胺键连接形成的偶联物。本发明提供的制备氯虫苯甲酰胺抗原的方法，能够方便、快捷地获得氯虫苯甲酰胺抗原，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。用本发明方法制备的氯虫苯甲酰胺抗原进行免疫得到的抗体的特异性好、最低检测限值低。本发明的制备氯虫苯甲酰胺抗原的方法及由该方法获得的氯虫苯甲酰胺抗原在氯虫苯甲酰胺的快速免疫检测应用中将有广阔的前景。式C。
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公开(公告)号：CN102199211B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201110090869.6
申请日：2011-04-12
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K16/38 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N21/31 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法及其专用酶联免疫试剂盒。本发明所提供的酶联免疫试剂盒含有豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体；所述豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体，是由保藏编号为CGMCC No.4617的豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体杂交瘤细胞株CpTI 3D6分泌产生的。本发明应用抗CpTI多克隆抗体及酶标记抗CpTI单克隆抗体，采用双抗夹心ELISA方法进行试剂盒制备，并应用制备的试剂盒鉴定转基因作物真伪，具有快速、灵敏的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103233020A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN101694494B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN200910236140.8
申请日：2009-10-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K17/14 , G01N33/543 , G01N33/577 , G01N21/31 , B81C99/00 , B81B7/02
Abstract: 本发明公开了一种制备修饰有抗体的微悬臂梁的方法。该方法，由如下步骤组成：1)通过巯基化将抗抗体连接到带有金膜的微悬臂梁上，得到修饰有抗抗体的微悬臂梁；2)通过抗体与抗抗体的相互结合作用，将抗体连接到所述修饰有抗抗体的微悬臂梁上，得到修饰有抗体的微悬臂梁。结果表明，本发明所制备的修饰有抗体的微悬臂梁的方法与现有的方法相比具有反应步骤少、操作时间短、避免因巯基化反应对抗体活性的损失、使抗体定向结合从而暴露更多的抗原作用位点的优点。因此，本发明的方法及产品在微悬臂梁免疫传感技术领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103194460B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310133843.4
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/21 , C07K14/325 , A01N47/44 , A01P7/04 , C12N15/70 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-2064位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry3Bb（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry3Bb基因（N-Cry3Bb基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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公开(公告)号：CN103233020B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310122670.6
申请日：2013-04-10
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry34B的制备方法。该方法包括如下步骤：1）将SEQ ID №.1所示的DNA插入pET28a表达载体中，得到重组表达载体；2）将所述重组表达载体导入大肠杆菌BL21（DE3），得到重组菌；3）培养所述重组菌，并进行诱导表达，收集菌体；裂解菌体，即得。本发明应用基因工程方法在国内首次合成Bt Cry34B基因，并首次制备出了Bt Cry34B融合蛋白，为进一步探讨该蛋白的检测方法、生理功能及其作用机制、降解机制打下了基础。
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公开(公告)号：CN103233021A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310133824.1
申请日：2013-04-17
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/32 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12N15/70 , C07K14/325 , C07K19/00 , A01N57/16 , A01N63/02 , A61P7/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法。该方法涉及一种经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2的基因，具体如序列表中序列1所示。本发明所提供的苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白的制备方法，包括如下步骤：1）将含有序列1的第109-1269位或整个序列1所示DNA片段的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry35Ba2（序列2）。在大肠杆菌中，本发明所提供的经过密码子优化的苏云金芽孢杆菌晶体蛋白Bt Cry35Ba2基因（N-Cry35Ba2基因）表达所得蛋白并未因密码子优化而影响其蛋白活性。
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