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公开(公告)号:CN115216478B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202210618518.6
申请日:2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor: 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒,进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中,成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团,成功改造巴氏杆菌;且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株,表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降;同时,能使细胞因子IL‑6,TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降,减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比,保护效率更高,安全性也更好,能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号:CN117535212A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202210941651.5
申请日:2022-08-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C12N15/52 , C12N15/56 , C07K14/24 , A61K35/742 , A61P31/04 , A23K10/18 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一株具有广谱抗菌作用的枯草芽孢杆菌工程菌株及其构建方法与应用。该枯草芽孢杆菌工程菌株是通过将优化的mcyABCD基因和mcjABCD基因分别插入宿主枯草芽孢杆菌的Amye和SigF位点,获得的可同时生产微菌素Y和微菌素J25的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株;其中,优化的mcyABCD基因序列如SEQ ID NO.1所示,优化的mcjABCD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的枯草芽孢杆菌WYA25S工程菌株在正常生长(无诱导,无抗性)的情况下,对沙门氏菌等菌株具有抑菌作用,且在生长过程中不产生芽孢,具有生长可控性和菌株安全性,其应用前景好。
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公开(公告)号:CN115927426B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202210877323.3
申请日:2022-07-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及多杀性巴氏杆菌基因缺失突变株的筛选系统及其应用,属于生物技术领域,本发明首先构建含有多杀性巴氏杆菌glgB和opa基因敲除盒与lacZ基因的重组表达载体,将所述重组表达载体导进改造目的菌株C48‑1株,分别通过利用温度敏感系统与蓝白斑筛选,方便高效地筛选出突变株。该方法实现了多杀性巴氏杆菌基因的成功敲除,并能够大幅度地减少了筛选突变株的时间和精力,达到高效快速地筛选突变株。
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公开(公告)号:CN114836460B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202210553568.0
申请日:2022-05-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种表达微菌素Y的枯草芽孢杆菌工程菌株及其制备和应用,属于基因工程技术和生物技术领域,本发明首先将mcyA和mcyBCD的基因序列调整为相同方向,并且用SD和起始密码子序列相连获取mcyABCD改造基因,然后以PHT43作为载体,通过枯草芽孢杆菌对改造后的mcyABCD基因进行表达并成功表达MccY,其表达产物具有良好的鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌的杀菌活性,为MccY在养殖业生产实践中的应用提供了更经济便捷的模式。
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公开(公告)号:CN115747126A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202211015993.0
申请日:2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用,属于微生物技术、药物和基因工程领域,本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化,使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达,并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中,得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株,该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下,对MccJ25具有较高的表达水平,并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性,为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号:CN113527476A
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110714355.7
申请日:2021-06-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H5亚型禽流感病毒新纳米抗体及其应用,所述抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。并将抗体基因通过连接肽与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因连接,构建表达载体,诱导融合蛋白表达,来促进抗H5禽流感病毒纳米抗体融合蛋白在表达系统中的可溶表达,从而解决了抗H5禽流感纳米抗体蛋白在原核系统呈不可溶的难题,提高了准确性和重复性。可用于探测、诊断、预防或治疗禽流感病毒,特别是H5亚型禽流感病毒。对鸡H5禽流感的监测具有重大的意义。
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公开(公告)号:CN113009156A
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN202110300708.9
申请日:2021-03-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬IFN‑α生物学活性的方法,属于蛋白活性检测技术领域。本发明将犬ISRE启动子片段插入带有绿色荧光蛋白的质粒中,构建表达绿色荧光蛋白的重组质粒,通过检测绿色荧光蛋白的表达情况来判断ISRE启动子的激活情况,从而检测犬α‑IFN生物学活性。本发明利用绿色荧光蛋白报告基因检测犬α‑IFN生物学活性的方法与传统检测方法MDCK‑VSV相比,避免了VSV病毒感染人的风险,提高了生物安全性。本发明操作简单,可重复性高,成本低,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119185524A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411150185.4
申请日:2024-08-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N1/19 , A61K39/385 , A61P31/16 , A61K39/39 , A61P37/04 , C12R1/84
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体公开了一种免疫原性复合物,包含:含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白的抗原和含有载体蛋白的纳米颗粒载体;所述载体蛋白为Ferritin蛋白;所述纳米颗粒载体与所述抗原之间通过SpyCatcher‑SpyTag共价连接。本发明提供的含有H7N9禽流感病毒的HA蛋白和Ferritin蛋白的免疫原性复合物,该免疫原性复合物的抗原特性显著增强,可以诱导更高滴度的中和抗体。将其制备成疫苗,通过免疫验证实验,证明由免疫原性复合物制备得到的疫苗能有效提高抗原蛋白对机体的体液免疫和细胞免疫效果,为防控H7N9亚型高致病性禽流感的流行提供了新的方案。
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公开(公告)号:CN115747126B
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202211015993.0
申请日:2022-08-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生产微菌素J25的枯草芽孢杆菌重组整合工程菌株、构建方法及应用,属于微生物技术、药物和基因工程领域,本发明通过对mcjABCD基因序列和表达原件的优化,使得MccJ25可以在枯草芽孢杆菌中成功表达,并将mcjABCD基因同时整合至枯草芽孢杆菌基因组两个位点中,得到一株可以高效生产MccJ25的枯草芽孢杆菌W25AS2工程菌株,该菌可以在无抗性、无诱导、双位点共表达且无芽孢生成的条件下,对MccJ25具有较高的表达水平,并且表达产物对于肠炎沙门氏菌具有良好的杀菌活性,为MccJ25的生产应用开发了新的应用模式。
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公开(公告)号:CN117683126A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311480016.2
申请日:2023-11-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体蛋白的活性、亲和性、特异性均优异,该纳米抗体蛋白具有较好的可溶性,利于表达和纯化,本发明还公开了该抗H5亚型禽流感病毒纳米抗体蛋白、用途、表达载体、菌株和药物以及试剂盒。
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