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公开(公告)号:CN117487832A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311404387.2
申请日:2023-10-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,公开了一种禽用CpG生物合成质粒的构建与佐剂活性检测方法。具体公开了一种禽用CpG生物合成质粒,所述禽用CpG生物合成质粒包括CpG基序和Kan抗性基因。本发明构建和纯化得到一种含CpG基序的质粒,其单独使用或与其他佐剂联合使用可以有效增强抗原免疫原性。
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公开(公告)号:CN118147030A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410321892.9
申请日:2024-03-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/117 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种提高禽用CpG产量的方法。本发明提供了一种大豆蛋白胨的应用量范围为16~30g/L,酵母粉的应用量范围为8~20g/L,甘油为8~25g/L的培养基。使用该培养基培养CpG合成工程菌,可以有效提高CpG的产量。此外,通过将溶氧量维持在30%,通过采取指数流法加补料策略进行高密度发酵,以及30℃到42℃的变温培养策略,进一步的提高了CpG的产量,最高能达到853mg/L的最高质粒产量,平均质粒产量达到538mg/L。对比摇瓶培养的质粒产量,本发明的发酵工艺将质粒产量提高了50~100倍。
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公开(公告)号:CN102735853B
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201210186169.1
申请日:2012-06-07
Applicant: 广州市华南农大生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/86
Abstract: 本发明公开了一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法,包括如下步骤:使用猪流感灭活疫苗免疫猪,免疫后21~28日后采血分离血清;去除血清中的非特异性成分,得到待检血清;将猪流感灭活抗原稀释,配制浓度为4HA单位猪流感抗原稀释液;将待检血清作倍比稀释,依次加入4HA单位猪流感抗原稀释液、1%红细胞,进行血凝抑制实验,以完全抑制4HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。该方法大大缩短了测定时间,操作误差小,可控性强,批间差异小,同时也减少了用动物攻毒保护试验来检验效力时常常因为实验动物级别不同,检测结果常有的误差。
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公开(公告)号:CN102735853A
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201210186169.1
申请日:2012-06-07
Applicant: 广州市华南农大生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/86
Abstract: 本发明公开了一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法,包括如下步骤:使用猪流感灭活疫苗免疫猪,免疫后21~28日后采血分离血清;去除血清中的非特异性成分,得到待检血清;将猪流感灭活抗原稀释,配制浓度为4HA单位猪流感抗原稀释液;将待检血清作倍比稀释,依次加入4HA单位猪流感抗原稀释液、1%红细胞,进行血凝抑制实验,以完全抑制4HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。该方法大大缩短了测定时间,操作误差小,可控性强,批间差异小,同时也减少了用动物攻毒保护试验来检验效力时常常因为实验动物级别不同,检测结果常有的误差。
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公开(公告)号:CN115216478B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202210618518.6
申请日:2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor: 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒,进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中,成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团,成功改造巴氏杆菌;且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株,表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降;同时,能使细胞因子IL‑6,TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降,减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比,保护效率更高,安全性也更好,能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号:CN115216478A
公开(公告)日:2022-10-21
申请号:CN202210618518.6
申请日:2022-06-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor: 陈爱华 , 梁昭平 , 冯赛祥 , 江金飞 , 梁铭治 , 桑运芬 , 周梦若 , 赵一珊 , 孙娟 , 张广文 , 许斯祺 , 谢倩梅 , 代绘琳 , 刘宇彤 , 林敏 , 秦苗苗
Abstract: 本发明公开一种禽多杀性巴氏杆菌内毒素减毒灭活疫苗菌株的构建方法及应用。本发明通过构建表达LpxE基因的重组质粒,进行电击转化到禽多杀性巴氏杆菌中,成功获得内毒素减毒菌株。本发明采用优化后的LpxE基因特异性的去除也野生型菌株上部分类脂A1位上的磷酸基团,成功改造巴氏杆菌;且内毒素致凝活性显著高于野生型菌株,表明脂多糖结构改造后内毒素毒性下降;同时,能使细胞因子IL‑6,TNF‑α和趋化因子CXCL2的含量显著下降,减少MH‑S细胞促炎因子的产生。采用内毒素减毒菌株制备的灭活疫苗与野生型菌株灭活疫苗相比,保护效率更高,安全性也更好,能更好地应用于禽多杀性巴氏杆菌病的防治中。
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公开(公告)号:CN103223164B
公开(公告)日:2014-08-20
申请号:CN201310128363.9
申请日:2013-04-15
Applicant: 华南农业大学 , 广州市华南农大生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种水包油包水型佐剂疫苗及其制备方法,该佐剂疫苗,其由内部水相、用于包覆内部水相的中间油相以及用于包覆中间油相的外部水相组成,外部水相中的各组分包括:复合表面活性剂、亲水性表面活性剂、生理盐水;中间油相中的各组分包括:亲油性表面活性剂、稳定剂、矿物质油;内部水相中的各组分包括:免疫增强剂溶液、亲水性表面活性剂、灭活抗原液。本发明W/O/W型佐剂疫苗比传统W/O型油佐剂疫苗能更早诱导免疫反应,可使实验动物获得更早的保护性抗体,且疫苗吸收良好,在接种部位引起的炎症反应小;比现有的W/O/W剂型疫苗稳定性好,抗体产生速度快。
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公开(公告)号:CN103223164A
公开(公告)日:2013-07-31
申请号:CN201310128363.9
申请日:2013-04-15
Applicant: 华南农业大学 , 广州市华南农大生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种水包油包水型佐剂疫苗及其制备方法,该佐剂疫苗,其由内部水相、用于包覆内部水相的中间油相以及用于包覆中间油相的外部水相组成,外部水相中的各组分包括:复合表面活性剂、亲水性表面活性剂、生理盐水;中间油相中的各组分包括:亲油性表面活性剂、稳定剂、矿物质油;内部水相中的各组分包括:免疫增强剂溶液、亲水性表面活性剂、灭活抗原液。本发明W/O/W型佐剂疫苗比传统W/O型油佐剂疫苗能更早诱导免疫反应,可使实验动物获得更早的保护性抗体,且疫苗吸收良好,在接种部位引起的炎症反应小;比现有的W/O/W剂型疫苗稳定性好,抗体产生速度快。
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公开(公告)号:CN102166354A
公开(公告)日:2011-08-31
申请号:CN201110091512.X
申请日:2011-04-12
Applicant: 广州市华南农大生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: A61K39/205 , A61K39/39 , C07K14/145 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种预防狂犬病的灭活疫苗,是以狂犬病病毒dG株灭活抗原与蒙特那.胶(MONTANIDETM GEL PR 01)佐剂混合制成。本发明的有益效果是:(1)使用携带双糖蛋白基因(G)狂犬病病毒作为疫苗毒株,该毒株培养滴度高,不低于1.0×108FFU/mL,无需浓缩,简化生产工艺,节约生产成本;(2)该疫苗免疫原性好,免疫一次后14天产生坚强免疫力,持续一年,有效预防犬狂犬病发生,便于应用;(3)经济实用,与进口狂犬病灭活疫苗相比,成本价格仅为进口狂犬病灭活疫苗1/3-1/4,减轻使用负担,便于推广应用;(4)本疫苗成功大量推广后,将极大改善我国狂犬病防控压力,对我国公共卫生有极大积极意思。
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