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公开(公告)号：CN117480926A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311125741.8
申请日：2023-09-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C21/00
Abstract: 本发明公开了一种萝卜科学施用硝态氮肥的方法和应用，包括：(1)以萝卜在农业生产中所需的硝态氮浓度(10.0mM)为基准设置8种不同硝态氮浓度处理；(2)对萝卜材料进行表型鉴定、耐低氮相关品质指标和硝酸盐含量等性状统计分析；(3)对不同基因型萝卜的耐低氮能力进行综合评价，筛选获得耐低氮与氮敏感萝卜基因型。(4)5.0mM氮水平供应下，6个耐低氮萝卜基因型肉质根产量与品质基本保持不变，而硝酸盐含量比正常氮素供应条件下降低5.83％～8.12％。本发明实现在较低养分投入下保证萝卜优质高产，提高氮肥的利用效率，同时减少环境污染。
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公开(公告)号：CN117461560A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202211679868.X
申请日：2022-12-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定与繁殖芦笋超雄株的方法，属于蔬菜作物遗传育种技术领域。该方法基于芦笋基因组序列，开发出可以快速鉴定芦笋超雄株的分子标记，设计相应的引物(命名为Asp‑YY01F，Asp‑YY01R)进行PCR扩增，即可准确鉴定出超雄株；进而以嫩茎为外植体，通过愈伤组织诱导(MS+1.0mg/L 6‑BA+0.75 mg/L NAA+30g/L蔗糖)、不定芽(MS+2.0 mg/L 6‑BA+0.05 mg/L NAA+30g/L蔗糖)和不定根分化(1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.02 mg/L KT+0.5 g/L AC+30g/L蔗糖)，建立了相应的离体高频再生体系，可实现芦笋超雄株快速繁殖。本发明提供的分子标记能精准辨别超雄株和普通雄株，可用于植株苗期性别鉴定、全雄育种F1代种子纯度检测；超雄株离体再生繁殖系数高，性状稳定，可为芦笋全雄育种工作提供重要种质材料，加快芦笋全雄育种进程。
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公开(公告)号：CN111647522B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202010376156.5
申请日：2020-05-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了抑制多种植物真菌病害的昆虫病原线虫共生菌菌株及应用，该菌株为伯氏致病杆菌的高毒力菌株NN6，保藏编号：CCTCC NO:M 2020097，2020年4月29日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明伯氏致病杆菌NN6具有较强的抑制尖孢镰刀菌西瓜专化型和黄瓜专化型、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、灰葡萄孢、辣椒疫霉菌丝生长的能力，且随着体积浓度的增加而增高，抑菌效果显著。该菌株还具有抑制镰刀菌属孢子萌发的作用，抑制效果显著。该菌具有培养条件要求低、持效期长、来源环保无毒性等特点，对于保护生态环境和提高农产品的附加值上具有重要意义，加上抗菌谱更广这个优势，使其具有很好的市场开发应用前景。
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公开(公告)号：CN102978207B
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201210528077.7
申请日：2012-12-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，公开了萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记。本发明采用SRAP分子标记方法对高抗霜霉病萝卜亲本（NAU-dhp08）、高感霜霉病萝卜亲本（秋田半节青），以及抗、感亲本杂交配制的F2群体单株进行标记基因型分析，通过对F2单株抗性表型与标记基因型连锁分析，鉴定出370bp紧密连锁的抗性标记Em9/ga24370，抗性位点与标记间遗传距离为2.3cM。通过本发明提供的分子标记方法可用于萝卜霜霉病抗性育种中标记辅助选择，快速准确鉴定萝卜植株霜霉病抗性，克服了常规抗性鉴定方法工作量大、周期长、结果易受环境影响等局限，可以明显提高抗性基因型选择效率，加快萝卜高抗霜霉病新品种选育进程。
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公开(公告)号：CN102505044B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201110351885.6
申请日：2011-11-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种糯玉米杂交种遗传纯度的快速鉴定方法。其步骤是：提取糯玉米基因组DNA，利用筛选出的SRAP有效引物组合NAUSRem7/NAUSRpm1以及RAPD有效引物NAURP709、NAURP712进行PCR扩增，将扩增后的PCR产物分别进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳，拍摄DNA电泳图谱。通过比较和分析电泳图谱中的DNA片段序列差异形成的多态性扩增片段大小与位置差异，进行糯玉米F1杂交种‘苏玉糯2号’种子遗传纯度的鉴定。本发明的检测方法具有标记稳定，准确性高，不受被测样品生长阶段与环境影响，成本低，且在整个生长季节都可以进行等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102978207A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210528077.7
申请日：2012-12-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种领域，公开了萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记。本发明采用SRAP分子标记方法对高抗霜霉病萝卜亲本（NAU-dhp08）、高感霜霉病萝卜亲本（秋田半节青），以及抗、感亲本杂交配制的F2群体单株进行标记基因型分析，通过对F2单株抗性表型与标记基因型连锁分析，鉴定出370bp紧密连锁的抗性标记Em9/ga24370，抗性位点与标记间遗传距离为2.3cM。通过本发明提供的分子标记方法可用于萝卜霜霉病抗性育种中标记辅助选择，快速准确鉴定萝卜植株霜霉病抗性，克服了常规抗性鉴定方法工作量大、周期长、结果易受环境影响等局限，可以明显提高抗性基因型选择效率，加快萝卜高抗霜霉病新品种选育进程。
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公开(公告)号：CN117106944A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202211679969.7
申请日：2022-12-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于蔬菜作物遗传育种与生物技术领域，提供了一种萝卜基于VRN1基因的抽薹性状功能标记及其应用。在抽薹性极显著差异萝卜种质6号染色体上RsVRN1基因启动子中鉴定到InDel序列差异，进而开发出InDel标记引物对：Nau‑VF：5’‑GTCAAACATATATGATCTATCTAGACCTTGC‑3’；Nau‑VR：5’‑GTTGAGAGAGAAACAGTGATGAAGGA‑3’。本发明所开发的基于VRN1基因的功能标记能实现对萝卜植株抽薹性进行快速准确鉴定。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸片段于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速准确鉴定萝卜种质抽薹性，有利于高效进行萝卜晚抽薹性状鉴定与标记辅助选择，加快萝卜晚抽薹优良新品种培育进程。
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公开(公告)号：CN116926106A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202211523455.2
申请日：2022-11-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜基因编辑技术及其应用，首次在萝卜‘NAU‑067’中通过根癌农杆菌介导的遗传转化实现萝卜RsPDS基因编辑。将培养4～5d无菌苗切取带柄子叶后置于MS固体培养基上预培养3d，根癌农杆菌侵染萝卜带柄子叶后在MS固体培养基上共培养3d，之后置于MS+0.75mg/L TDZ+0.35mg/L NAA+300mg/L Carb的固体培养基上诱导不定芽。以RsPDS基因为例，出芽后采用GUS染色初步分析是否为转基因阳性愈伤组织，采用改良CTAB法提取白化苗DNA，PCR扩增发现1株新叶全白化苗在靶位点2存在3个碱基缺失和单个碱基替换，1株白化嵌合株在靶位点1存在3个碱基插入和单个碱基替换。本发明建立起一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜功能基因编辑技术体系，为创制突变体、高效验证基因的生物学功能以及创制萝卜优异种质提供了重要技术支撑。
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公开(公告)号：CN114958904B
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210536365.0
申请日：2022-05-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。
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公开(公告)号：CN116790782A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202211442705.X
申请日：2022-11-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种基于非组培、快速验证萝卜盐胁迫响应基因功能的方法，包括：对萝卜种子进行催芽播种；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；在非组培条件下切除实生根，获得无根苗并浸入侵染液进行侵染；侵染后的无根苗移栽至营养土并诱导毛状根；通过表型筛选和PCR检测鉴定阳性复合植株；对复合植株进行盐处理，通过表型和超氧阴离子自由基含量(O2‑)测定来评价阳性复合植株的耐盐性。本发明不仅提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短发根时间，而且避免了无菌操作。成功验证了萝卜盐胁迫响应基因的功能，为萝卜本体基因功能验证提供技术参考。
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