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公开(公告)号：CN116970592B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202310848260.3
申请日：2023-07-11
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及热稳定性提高的氨肽酶突变体，属于基因工程、酶工程及食品工程技术领域。所述氨肽酶突变体是在SEQ ID NO：2所示的野生型氨肽酶基础上，发生如下突变中的至少一种获得的：T51C、S268C、A149C或A165C。其中，氨肽酶突变体T51C+S268C，在60℃保温30min后仍有36％的残余酶活，相较于原始氨肽酶提高了71.4％；氨肽酶突变体A149C+A165C最适反应温度提高了5℃，在60℃保温30min后仍有34.3％的残余酶活，相较于原始菌株提高了63.3％。有利于拓宽氨肽酶在食品加工技术领域高温条件下的应用。
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公开(公告)号：CN115125246B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210671303.0
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/65
摘要： 本发明通过对芽孢杆菌来源的启动子‑10区序列定向改造获得了一种强度提高的启动子突变体，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供包含该启动子突变体的表达载体、表达系统。本发明所述启动子突变体用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可以将绿色荧光蛋白GFP异源表达活性提高至170％，介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源蛋白的表达奠定基础。
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公开(公告)号：CN117384892A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202310900907.2
申请日：2023-07-20
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供一种蛋白酶K突变体及其制备方法，所述蛋白酶K突变体的氨基酸序列是在亲本蛋白酶K氨基酸序列的基础上第244位的甲硫氨酸(Met)替换为苯丙氨酸(Phe)。适宜条件下，本发明蛋白酶K突变体发酵液酶活力高达4325.54±51.76U/mL，与其亲本(3276.24U/mL)对比酶活力提高了32.03％左右。
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公开(公告)号：CN116970592A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202310848260.3
申请日：2023-07-11
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及热稳定性提高的氨肽酶突变体，属于基因工程、酶工程及食品工程技术领域。所述氨肽酶突变体是在SEQ ID NO：2所示的野生型氨肽酶基础上，发生如下突变中的至少一种获得的：T51C、S268C、A149C或A165C。其中，氨肽酶突变体T51C+S268C，在60℃保温30min后仍有36％的残余酶活，相较于原始氨肽酶提高了71.4％；氨肽酶突变体A149C+A165C最适反应温度提高了5℃，在60℃保温30min后仍有34.3％的残余酶活，相较于原始菌株提高了63.3％。有利于拓宽氨肽酶在食品加工技术领域高温条件下的应用。
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公开(公告)号：CN116218750A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202211257312.1
申请日：2022-10-14
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种底盘敲除菌株及其应用。所述解淀粉芽孢杆菌基因工程菌株，不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE，bpr，vpr，mpr，nprE，epr，胞外多糖基因簇eps，聚谷氨酸基因簇pgs和sacB基因构建底盘菌，并在此基础上异源表达角蛋白酶基因kerk、氨肽酶基因ywaD、碱性蛋白酶基因AprE，最终获得了一种解淀粉芽孢杆菌底盘菌株及能够高产角蛋白酶、氨肽酶以及碱性蛋白酶的生产菌株，为构建蛋白酶高产菌株提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN115191511A
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202210655242.9
申请日：2022-06-10
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供一种豌豆蛋白凝胶及其制备方法和应用，涉及食品领域。该制备方法包括以下步骤：用柠檬酸盐溶液溶解豌豆蛋白，充分水合，得到豌豆蛋白溶液；向豌豆蛋白溶液中加入谷氨酰胺转氨酶发生交联反应，得到酶交联产物；将酶交联产物加热后冷却，得到豌豆蛋白凝胶。经实验证明，利用柠檬酸盐溶液预处理豌豆蛋白相较于不添加柠檬酸盐预处理而言，与MTG反应制备的凝胶的交联度、平均粒径和和质构性能有着明显提升。本发明提供的该方法安全、简单且廉价，制得的豌豆蛋白凝胶具有优良的凝胶性能，拓宽了豌豆蛋白作为动物蛋白的替代蛋白在肉类似物中的应用。
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公开(公告)号：CN115011582A
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202210525603.8
申请日：2022-05-06
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P19/02 , C12P7/22 , C12R1/84 , C12R1/19
摘要： 本发明主要利用定点突变技术构建来源于特异腐质霉的β‑葡萄糖苷酶的突变体菌株，获得了一种葡萄糖耐受能力提高的β‑葡萄糖苷酶突变体A354P，其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。相同条件下，突变体A354P的比活力为36.71U/mg，较野生型提高了40.28％；而且突变体A354P可在600mmol/L葡萄糖的激活下最高达到190.29％的相对活力，相比野生型具有显著提高的葡萄糖耐受能力；突变体A354P对于虎杖苷也具有更强的水解能力。本发明中的突变体在生物燃料、食品保健和生物合成等领域具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN118853664A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410576406.8
申请日：2024-05-10
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75
摘要： 本发明属于微生物与基因工程技术领域，具体涉及一种低渗漏表达的木糖诱导型启动子Pxyl的突变体启动子PXC3及其应用。所述启动子PXC3是在来源于枯草芽胞杆菌的木糖诱导启动子Pxyl的+42区和+56区之间插入3个CRE元件获得，利用葡萄糖介导的CCR效应实现负调控蛋白阻滞RNA聚合酶的转录功能，使得添加特定比例葡萄糖的情况下能够更大限度的减弱诱导型启动子的渗漏表达。与此同时，在不添加葡萄糖只添加木糖的情况下，PXC3仍然保持与原始启动子Pxyl相当的转录水平。
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公开(公告)号：CN117106040A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202310830437.7
申请日：2023-07-06
申请人： 天津科技大学 , 山东合成远景生物科技有限公司
摘要： 本发明以涉及一种新型的转录调控因子BgaR突变体，属于代谢工程领域。所述突变体是在来源于产气荚膜梭菌野生型BgaR的基础上发生P120L，I123V，S187N和Y226C突变获得的，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明首次利用BgaR作为生物传感器中的识别元件构建乳糖生物传感器，使乳糖浓度与菌株的生长情况偶联，用于测定/表征细胞中的乳糖含量；并对BgaR进行优化，获得对乳糖灵敏度更高，响应范围更宽的乳糖生物传感器，BgaR突变后对乳糖的响应范围由5‑10g/L增加到0‑12g/L，乳糖浓度为12g/L时，表达BgaR突变体菌株的生长情况明显优于表达野生型BgaR菌株，是野生型BgaR的3.3倍，对乳糖检测及乳糖生产菌株的筛选具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115125245B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202210671295.X
申请日：2022-06-14
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/12 , C12N1/21 , C12R1/07
摘要： 本发明通过对芽孢杆菌来源的启动子‑10区序列定向改造获得了一种强度提高的启动子突变体，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供包含该启动子突变体的表达载体、表达系统。本发明所述启动子突变体用于控制基因表达，尤其应用于解淀粉芽孢杆菌代谢工程领域，可以将绿色荧光蛋白GFP异源表达活性提高至178％，介导解淀粉芽胞杆菌表达系统中异源蛋白的表达奠定基础。
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