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公开(公告)号：CN104293759A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410484596.7
申请日：2014-09-19
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
CPC classification number: C12N9/92 , C12P19/24 , C12Y503/01005
Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖异构酶基因、编码酶、重组载体及基因工程菌，以及葡萄糖异构酶基因工程菌在催化D-葡萄糖异构化制备D-果糖中的应用，本发明提供的高效表达耐高温葡萄糖异构酶的重组大肠杆菌，解决了一般的葡萄糖异构酶最适反应温度低的问题；应用该菌种生产葡萄糖异构酶具有产量高、工艺简单、便于工业化应用等优点，该菌株可以直接用于高果糖浆的生产，而不需细胞破碎；发酵结束后在85℃条件下对D-葡萄糖的总酶活达到715U/L，D-果糖的转化率达到55％，这为高果糖浆的大规模生产以及其作为重要的食品添加剂提供了良好的技术支持。
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公开(公告)号：CN111057698B
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN201911384083.8
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型L‑阿拉伯糖异构酶(LAI)及其突变体，及其在连续催化D‑半乳糖异构化制备D塔格糖(D‑tagatose)的应用。所述异构酶突变体，由SEQ ID NO.1所示所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第107位、(2)第199位、(3)第59位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的LAI及其突变体，85℃，700g/L D‑半乳糖反应体系下，产物得率最高达89.2％。将重组酶进行固定化并连续催化200批次，转化率均仍大于89％。本发明解决了现有酶催化制备D‑tagatose效率低下的难题，获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑tagatose工业化水平具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110904087B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201911383972.2
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体，以及其在制备塔格糖(D‑tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃，解决了现有酶无法在高温生产D‑tagatose的技术难题。使用本突变体生产D‑tagatose，底物浓度为600g/L时，产物得率最高可达79.7％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号：CN112206769A
公开(公告)日：2021-01-12
申请号：CN202010994370.7
申请日：2020-09-21
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
IPC: B01J23/42 , B01J23/44 , B01J23/46 , B01J23/755 , B01J35/00 , B01J37/02 , B01J37/16 , C07C29/141 , C07C31/18 , C07C31/26
Abstract: 本发明公开了一种多壁碳纳米管负载钌催化剂及其制备与应用，所述催化剂是以硝酸处理后的多壁碳纳米管为载体，以三氯化钌为前驱体，和/或以硼氢化钠为还原剂，在乙醇中浸渍还原获得的；钌质量负载量为1‑5％。本发明催化剂适用于木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖等多种糖的加氢过程，通用性好；并且能在较少的催化剂用量、较低的反应温度和压力条件下，实现底物的高转化率和产物高选择性，利于推广；稳定性好，利于回收，并且可以实现多次循环使用，循环利用至5批次后，糖醇的得率仍在95％以上，催化剂稳定性较好，综合利用成本大幅降低。
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公开(公告)号：CN110951717A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911384932.X
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的L-阿拉伯糖差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度75℃，其酶活与原始酶相比提高280％。使用本突变体生产D-tagatose，产物得率最高可达73.3％。将重组酶进行固定化并连续催化30批次，转化率均大于73％。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110951717B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN201911384932.X
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的L‑阿拉伯糖差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度75℃，其酶活与原始酶相比提高280％。使用本突变体生产D‑tagatose，产物得率最高可达73.3％。将重组酶进行固定化并连续催化30批次，转化率均大于73％。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110904088B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911384895.2
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，该突变体具有超高酶活和底物转化率，最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L，反应温度为85℃时，产物得率最高达67.14％。将重组酶进行固定化并连续催化300批次，转化率均大于67％。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题，获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111690629B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202010471544.1
申请日：2020-05-29
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开一种内切葡聚糖苷酶突变体、基因工程菌及其在降解纤维素中的应用。所述内切葡聚糖苷酶突变体是将SEQ ID No.3所示氨基酸序列第202位的赖氨酸突变为精氨酸。本发明内切葡聚糖苷酶突变体的比活力比野生酶显著提高1.4倍左右。以微晶纤维素为底物时，纤维素酶与突变酶的共同反应，反应催化效率较以纤维素酶单独降解底物显著提高了23.5％，可以看出突变酶显著提高了酶活力，可以降低工业应用的经济成本，为其在食品生物乙醇等工业生产领域提供了应用基础。
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公开(公告)号：CN110862980B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201911204720.9
申请日：2019-11-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度85℃，解决了现有酶无法在高温生产D‑psicose的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose，产物得率最高可达40.1％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号：CN111057697A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201911378513.5
申请日：2019-12-27
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种具备D-阿洛酮糖3-差向异构酶功能的耐高温TIM barrel蛋白突变体，及其在催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用。所述TIM Barrel蛋白突变体，由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的TIM Barrel蛋白酶突变体，该突变体具有超高酶活、较高最适反应温度和底物转化率，解决了现有酶催化制备D-psicose效率低下的技术难题。使用本突变体生产D-psicose，产物得率最高可达53.68％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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