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公开(公告)号:CN117487731A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311380049.X
申请日:2023-10-24
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明公开了一种产D‑泛酸工程菌及其构建方法与应用,本发明DPA11A(pTrc99A‑panBpanC)工程菌为出发菌株,通过突变来源谷氨酸棒杆菌的panB基因,加强关键限速酶的异源表达提高泛酸的产率,同时共表达丙酮酸摄取蛋白加速了胞外丙酮酸的再次摄取,减少碳分流以提高D‑泛酸产量。本发明方法所构建的重组菌DPA11A*01通过摇瓶发酵生产的D‑泛酸产量提升约为6.64g/L,相比出发菌株DPA11A,提高了约81.3%,具有工业化生产的应用前景。
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公开(公告)号:CN114149981B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202111494426.3
申请日:2021-12-09
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明属于酶工程技术领域,公开了一种催化能力提高的泛酸合成酶突变体及其应用,该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO .2所示。与谷氨酸棒杆菌来源的野生型泛酸合成酶相比,本发明所得的泛酸合成酶突变体S31K酶活提高了70%。
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公开(公告)号:CN115386511A
公开(公告)日:2022-11-25
申请号:CN202210913412.9
申请日:2022-07-25
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明公开了一种高产他克莫司低产子囊霉素的筑波链霉菌ZJXM0001及其应用,将筑波链霉菌ZJXM0001接种至发酵培养基,在26‑30℃、180‑240rpm下培养144‑192h,获得含他克莫司的发酵液,发酵液分离纯化,获得他克莫司;本发明通过UV、ARTP诱变和抗性筛选的方法得到一株高产他克莫司且副产物子囊霉素明显降低的筑波链霉菌ZJXM0001菌株;在温度28℃,转速200rpm,培养时间180h下相对原始筑波链霉菌菌株S1,筑波链霉菌ZJXM0001菌株的他克莫司产量提高了236%,低产副产物子囊霉素,在温度26℃,其他条件不变的情况下,较原始菌株提升166%,无子囊霉素产生,本发明方法对于后续的纯化、提取及工业化有着重要的意义。
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公开(公告)号:CN114231553A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111602169.0
申请日:2021-12-24
申请人: 浙江工业大学
IPC分类号: C12N15/75 , C12N15/10 , C12N9/88 , C07K14/245 , G01N21/64
摘要: 本发明公开了一种基于荧光探针Rho‑IDA‑CoII的信号肽文库的高通量筛选方法。与传统的筛选方法相比,使用荧光探针标记定量法能准确测定50~500 ng范围内的组氨酸标签融合蛋白,不会受到复杂样品及环境污染导致的高背景荧光,应用范围广。通过荧光高通量筛选法,从枯草芽孢杆菌表达腈水合酶信号肽文库中,筛选得到能分泌表达活性腈水合酶的枯草芽孢杆菌重组子,其培养上清液中检测到腈水合酶活性为12.97±0.77 U/mL。本发明的可分泌表达腈水合酶的重组子可应用于工业生产腈水合酶及其下游应用。
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公开(公告)号:CN111057698B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201911384083.8
申请日:2019-12-28
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明涉及一种新型L‑阿拉伯糖异构酶(LAI)及其突变体,及其在连续催化D‑半乳糖异构化制备D塔格糖(D‑tagatose)的应用。所述异构酶突变体,由SEQ ID NO.1所示所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第107位、(2)第199位、(3)第59位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的LAI及其突变体,85℃,700g/L D‑半乳糖反应体系下,产物得率最高达89.2%。将重组酶进行固定化并连续催化200批次,转化率均仍大于89%。本发明解决了现有酶催化制备D‑tagatose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑tagatose工业化水平具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110904087B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201911383972.2
申请日:2019-12-28
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体,以及其在制备塔格糖(D‑tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃,解决了现有酶无法在高温生产D‑tagatose的技术难题。使用本突变体生产D‑tagatose,底物浓度为600g/L时,产物得率最高可达79.7%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号:CN112206769A
公开(公告)日:2021-01-12
申请号:CN202010994370.7
申请日:2020-09-21
申请人: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
IPC分类号: B01J23/42 , B01J23/44 , B01J23/46 , B01J23/755 , B01J35/00 , B01J37/02 , B01J37/16 , C07C29/141 , C07C31/18 , C07C31/26
摘要: 本发明公开了一种多壁碳纳米管负载钌催化剂及其制备与应用,所述催化剂是以硝酸处理后的多壁碳纳米管为载体,以三氯化钌为前驱体,和/或以硼氢化钠为还原剂,在乙醇中浸渍还原获得的;钌质量负载量为1‑5%。本发明催化剂适用于木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖等多种糖的加氢过程,通用性好;并且能在较少的催化剂用量、较低的反应温度和压力条件下,实现底物的高转化率和产物高选择性,利于推广;稳定性好,利于回收,并且可以实现多次循环使用,循环利用至5批次后,糖醇的得率仍在95%以上,催化剂稳定性较好,综合利用成本大幅降低。
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公开(公告)号:CN111334436A
公开(公告)日:2020-06-26
申请号:CN202010126500.5
申请日:2020-02-28
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明涉及一种中国被毛孢原生质体制备与再生方法,所述方法是通过以氯化钾溶液为渗透压稳定剂,以商品酶Driselase from Basidiomycetes sp,Lysing Enzyme from Trichoderma harizianum和Yatalase作为复合酶进行酶解,能够制备得到含量高的中国被毛孢原生质体并成功再生,同时通过优化再生培养基实现原生质体再生时间的缩短,且操作简单,便于推广实施,具有较好应用前景。
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公开(公告)号:CN109182201B
公开(公告)日:2020-06-23
申请号:CN201811153696.6
申请日:2018-09-30
申请人: 浙江工业大学
IPC分类号: C12N1/20 , C12P13/00 , C12P13/06 , C12P13/14 , C12P13/22 , C12P13/08 , C12P13/20 , C12P13/12 , C12R1/01
摘要: 本发明涉及一株河生肠杆菌生物Ⅰ型(Lelliottia amnigena)ZJB‑17002及其应用,河生肠杆菌生物Ⅰ型ZJB‑17002对催化N‑苯乙酰‑DL‑氨基酸制备L‑氨基酸对映体选择性值达到99%,对催化2‑N‑苯乙酰基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]‑DL‑丁酸制备2‑氨基‑4‑[羟基(甲基)磷酰基]‑L‑丁酸对映体选择性值达到99%。
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公开(公告)号:CN110951717A
公开(公告)日:2020-04-03
申请号:CN201911384932.X
申请日:2019-12-28
申请人: 浙江工业大学
摘要: 本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的L-阿拉伯糖差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度75℃,其酶活与原始酶相比提高280%。使用本突变体生产D-tagatose,产物得率最高可达73.3%。将重组酶进行固定化并连续催化30批次,转化率均大于73%。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
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