一种高表达裂解多糖单加氧酶的重组菌及应用

    公开(公告)号:CN116731940A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202211655751.8

    申请日:2022-12-22

    Abstract: 本发明公开了一种高表达裂解多糖单加氧酶的重组菌及应用,所述重组菌是将裂解多糖单加氧酶Palpmo基因连接到质粒,再转化大肠杆菌Arctic Express(DE3)构建获得的。本发明利用滤纸作为底物,通过葡萄糖溶液检测试剂筛选宿主,原料简单易得,成本低,检测效率高效快速,实现了真菌来源裂解多糖单加氧酶在大肠杆菌中的高效异源表达,可溶性表达含量为原来的108%。将裂解单加氧酶与纤维素酶协同应用于高固相纤维素底物降解,以玉米芯为例,使得其葡萄糖产量从65.7g/L提升到83.2g/L,为原来的126%,可用于玉米芯工业生产葡萄糖,降低成本,缩短其水解时间。

    耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶、突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110904088A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201911384895.2

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶及突变体,及其在微生物催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖(D-psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体,该突变体具有超高酶活和底物转化率,最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L,反应温度为85℃时,产物得率最高达67.14%。将重组酶进行固定化并连续催化300批次,转化率均大于67%。本发明解决了现有酶催化制备D-psicose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D-psicose工业化水平具有重要意义。

    一种赤藓糖醇的制备方法

    公开(公告)号:CN109504733A

    公开(公告)日:2019-03-22

    申请号:CN201811551166.7

    申请日:2018-12-18

    Abstract: 本发明涉及一种赤藓糖醇的制备方法,包括如下步骤:选取糖浓度为50%~60%的木糖母液;以出芽短梗霉CGMCC3.00837为出发菌株,将菌株进行斜面培养,然后再进行一级种子培养和二级种子培养,最后获得出芽短梗霉种子液;将毕赤酵母通过斜面培养方式得到的斜面菌种进行一级种子培养和二级种子培养后,获得毕赤酵母种子液;将已制备的出芽短梗霉种子液和毕赤酵母种子液分别接入装有混菌发酵培养基的发酵罐中进行混菌发酵培养,混菌发酵后即得到赤藓糖醇。本发明以木糖母液为碳源,出芽短梗霉和毕赤酵母为菌种,直接通过发酵罐发酵方法制备赤藓糖醇。使用本发明的方法生产赤藓糖醇的产量可达35g/L-42g/L,转化率达到40%以上。

    一种L-阿拉伯糖异构酶异构体及其应用

    公开(公告)号:CN110951717B

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN201911384932.X

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的L‑阿拉伯糖差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度75℃,其酶活与原始酶相比提高280%。使用本突变体生产D‑tagatose,产物得率最高可达73.3%。将重组酶进行固定化并连续催化30批次,转化率均大于73%。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。

    耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶、突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110904088B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN201911384895.2

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体,及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体,该突变体具有超高酶活和底物转化率,最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L,反应温度为85℃时,产物得率最高达67.14%。将重组酶进行固定化并连续催化300批次,转化率均大于67%。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。

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