用于隐孢子虫种属与蓝氏贾第虫检测的多重悬浮芯片及其制备方法

    公开(公告)号:CN101440396B

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN200810051728.1

    申请日:2008-12-31

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明提供了一种用于隐孢子虫种属与蓝氏贾第虫检测的多重悬浮芯片,包括诊断引物和与微球耦联的特异性寡聚核苷酸探针,其中,寡聚核苷酸探针序列为隐孢子虫种或属特异或贾第虫种特异性的基因中的序列。结合了多重PCR技术与液相杂交技术,能有效的消除假阳性,在保证精准特异性的同时,其敏感性比普通的PCR技术提高10-1000倍。可以同时对隐孢子虫属、微小隐孢子虫及蓝氏贾第虫等水源性的两种原虫进行鉴定和检测,具有高特异性、高灵敏度、快速、低成本易于推广等特点。

    隐孢子虫属及微小隐孢子虫种特异PCR检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101353690B

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN200810050956.7

    申请日:2008-07-11

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明提供一种隐孢子虫属及微小隐孢子虫种特异PCR检测试剂盒,包括DNA裂解液、PCR反应液、隐孢子虫属和微小隐孢子虫种特异性引物及阳性对照微小隐孢子虫基因组DNA,利用PCR的特异性检测方法,根据分析属特异及种特异的诊断序列设计属和种特异引物,通过优化扩增条件来提高其敏感性,电泳分析直接观察扩增结果。本发明试剂盒设计严谨,简单易操作,灵敏性高,特异性强,能同时鉴定属特异和种特异隐孢子虫感染,结果判定准确客观。

    一种外源基因在球虫类原虫——隐孢子虫体内表达的转染系统

    公开(公告)号:CN101235371A

    公开(公告)日:2008-08-06

    申请号:CN200710056372.6

    申请日:2007-11-30

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种以球虫类原虫——隐孢子虫病毒为转染载体和以DNA为转染载体的转染系统。利用隐孢子虫病毒RNA或含隐孢子虫的基因启动子的DNA作转染载体,在隐孢子虫体内进行外源基因的表达。包括用以隐孢子虫病毒RNA为载体和以DNA为载体的转染系统。球虫类原虫--隐孢子虫病毒基因组小、稳定、感染率高,每个细胞可达5×103,而且隐孢子虫为真核生物,外源基因在隐孢子虫体内表达出的蛋白具有活性。该转染系统含有多克隆位点,为通用型转染载体,多种外源基因可在隐孢子虫体内表达,为研究球虫类原虫的分子生物学和细胞生物学提供了转染系统。

    牛贾第虫、隐孢子虫多重PCR检测试剂盒及其方法

    公开(公告)号:CN108796106A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810693144.8

    申请日:2018-06-29

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: C12Q1/6893 C12Q1/686 C12Q2600/16 C12Q2537/143

    Abstract: 本发明公开一种牛贾第虫、隐孢子虫多重PCR检测试剂盒及其方法,根据十二指肠贾第虫TPI基因、微小隐孢子虫18S rRNA基因与安氏隐孢子虫18S rRNA基因的部分保守序列设计引物,建立三重PCR检测方法,通过优化PCR反应的退火温度等反应条件来提高其灵敏性和准确性,扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳后观察结果方便、快捷。本发明扩增的三种目的片段在琼脂糖凝胶电泳中大小差异显著,易于区分,且敏感性可达到1×103/g粪便,高于三种寄生虫已报导的镜检法与常规PCR检测方法,适合于临床实践中样本的检测。本发明检测方法可以同时快速检测牛的十二指肠贾第虫、微小隐孢子虫与安氏隐孢子虫,具有操作简单、灵敏度高、特异性强等特点。同时为实验用实牛的质量标准提供技术支持。

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