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公开(公告)号：CN116511516A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310753310.X
申请日：2023-06-26
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： B22F9/16 , C12P19/34 , C12Q1/6844 , B01J23/89 , A01N59/20 , A01N59/16 , A01P1/00 , C09K15/02 , C09K11/58 , B82Y20/00 , B82Y30/00 , B82Y40/00
摘要： 本发明公开了一种新型铜基纳米材料及其在抗氧化和抑菌方面的应用。首次以CSIA恒温扩增产物为模板，通过化学还原法合成了两种铜基纳米材料CSIA‑Cu@Pt和CSIA‑Cu@Ag。并且发现CSIA‑Cu@Pt具有类过氧化物酶活性，对TMB和H2O2的KM分别为0.01 mM和0.05 mM，Vmax分别是1.674×10‑7 M‑1 s和97.29×10‑7 M‑1 s；CSIA‑Cu@Ag具有抑菌活性，抑菌机制主要是由于纳米材料的加入引起了细菌内部的氧化应激，进而导致DNA的氧化损伤，引起细菌破裂。
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公开(公告)号：CN116445586A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310693286.5
申请日：2023-06-13
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12Q1/682 , C12Q1/6876 , C12Q1/689 , C12R1/01
摘要： 本发明提供一种基于荧光杂交链式反应的生物传感器，仅包括荧光杂交链式反应体系。本发明对两个发卡序列进行单一荧光基团标记，在发卡状态通过G碱基的淬灭能力淬灭荧光基团的荧光，触发子序列的存在触发杂交链式反应形成长双链产物，G碱基作用消失，实现荧光基团荧光的恢复。本发明只需单一荧光基团标记，不需要淬灭基团的修饰及其他纳米材料的加入，实现了简单、快速、经济效益高的荧光杂交链式反应。不仅如此，本发明提供的荧光杂交链式反应可应用于各种食品安全风险因子的检测，具有良好的通用性。
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公开(公告)号：CN116003498A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211335075.6
申请日：2022-10-28
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种非晶/结晶异相纳米酶的制备方法及应用。在95℃下，通过DNA配位驱动Fe2+自组装形成Fe‑DNA纳米酶。该策略是一种简单、可控的合成方法，避免了非晶材料或纳米酶的传统合成方法中所需的苛刻条件。所获得的Fe‑DNA纳米酶具有优异的pH和热稳定性、良好的室温存储性、显著的过氧化物酶活性、可忽略不计的氧化酶活性、和可降解性等特性，并已在生物传感中得到证实。本发明制备非晶/结晶异相纳米酶的方法简单、可控和成本低，非常适合于非晶/结晶异相纳米酶的制备，且获得的纳米酶可用于生物传感器的建立。
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公开(公告)号：CN114015748A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202210010868.4
申请日：2022-01-06
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6804 , C12Q1/10
摘要： 本发明构建了一种基于级联放大快速定量检测阪崎肠杆菌的生物传感器。该传感器通过磁富集、抗体‑核酸适体识别、EXPAR和DNAzyme信号积累实现阪崎肠杆菌的四重级联放大。首先，制备免疫磁珠用于磁富集；其次，磁分离从复杂基质中直接捕获靶标，随后添加核酸适体形成了抗体‑靶标‑融合核酸适体的免疫三明治夹心结构，保证传感器的高特异性；再次，通过EXPAR实现信号的指数放大；最后，通过产物中的富G序列形成类酶活性的四链体，催化显色信号输出。本方法具有高灵敏度、高特异性，快速简便，在2 h内即可实现对阪崎肠杆菌的定量检测，整个过程免提取，结果可视化，有效解决了传感器制备复杂、测定时间长的难题。
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公开(公告)号：CN113249377B
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202110723186.3
申请日：2021-06-29
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/10 , C12Q1/6851 , C12Q1/6834 , B82Y15/00 , B82Y40/00
摘要： 本发明公开了一种双链功能核酸纳米花的组装和形貌调控方法及其应用。利用oxyethyleneglycol bridge修饰引物通过PCR扩增获得的5’端带有粘性末端的扩增子，以此为模板实现双链功能核酸纳米花的组装，且通过核酸定量分析方法，计算发现纳米花对双链核酸的装载率高达86%‑98%；进而通过调节双链功能核酸纯化子浓度、Mg2+浓度、焦磷酸根浓度，实现功能核酸纳米花的形貌调控。此外，利用功能核酸纳米花优良的比表面积和核酸特异性，实现了功能核酸纳米花高效捕获单链核酸靶标。本发明调控核酸纳米材料形貌的方法简单、成本低廉，非常适用于单链核酸靶标的检测与生物医学应用。
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公开(公告)号：CN113252658A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110716945.3
申请日：2021-06-28
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种基于金纳米识别适配体冗余碱基的方法，以展青霉素PAT原始适配体链为例。其中PAT原始适配体序列是本申请人首次发现的PAT高亲和性核酸序列，在此基础上利用DNA结构预测软件mfold预测78‑mer的PAT适配体的二级结构，通过逐渐剔除侧翼碱基得到一系列截短适配体。然后，依据适配体与金纳米和靶标PAT之间的亲和力不同，通过在高盐条件下金纳米无核酸序列保护会发生聚沉伴随颜色变化，进而实现适配体冗余碱基的识别。同时结合定点突变和圆二色谱技术（CD）确定了PAT适配体的冗余碱基和核心序列。本申请利用AuNPs比色法具有肉眼可判定、不需要大型仪器设备的优势，可以扩展应用于其他的靶标适配体的截短研究。
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公开(公告)号：CN113249449A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110718435.X
申请日：2021-06-28
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/6851
摘要： 本发明公开了一种基于延伸发光引物的实时定量PCR测定Kd值的方法。以展青霉素PAT为例，采用单一荧光基团标记，基于配体‑受体相互作用来测定PAT与截短核酸适配体之间的亲和常数Kd。本发明首次构建了基于延伸发光引物的实时定量PCR方法并应用于Kd值的检测，利用引物核酸构型的变化实现荧光信号的放大。本发明与已公布的Kd值测量方法比较结果证实本方法测得Kd值的有效性。依托本方法测定，本发明简单归纳出PAT适配体冗余序列截短导致的解离常数Kd值的变化规律。本发明极大地降低了普通Kd值测定方法的成本费用，并且易操作，可行性强，为适配体Kd值的测量提供了一个新的方法。
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公开(公告)号：CN113174388A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110715709.X
申请日：2021-06-28
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种功能核酸纳米杆与功能核酸纳米花的制备及形貌转换方法。以PCR反应处于指数扩增期的扩增子为模板可以制备得到双链的功能核酸纳米杆，且通过焦磷酸根的调控可以实现从功能核酸纳米杆到功能核酸纳米花的形貌转换；以PCR反应处于平台期的扩增子为模板可以制备得到双链的功能核酸纳米花，通过纯化去除焦磷酸镁可以实现从功能核酸纳米花到功能核酸纳米杆的形貌转换。本发明制备的双链功能核酸纳米材料，其成本低廉、制备方法简单，非常适用于不同形貌纳米材料的商业化制备与应用。
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公开(公告)号：CN112522379B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202110180390.5
申请日：2021-02-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/686
摘要： 本发明提供一种功能核酸磁生物传感器，包括：（1）BS‑PCR扩增体系，（2）功能核酸磁层析分析体系。本发明通过巧妙地设计引物，使得在双链靶标存在下可对靶标进行超快扩增，并使扩增产物两端各带一个单链寡核苷酸。进一步利用构建的侧流磁层析试纸进行磁信号输出和分析，突破了目前功能核酸检测试纸信噪比高，信号分子不稳定的瓶颈，解决了传统PCR反应速度慢，产物难于可视化的难题，实现了对双链靶标的快速、高灵敏、可视化检测。不仅如此，本发明提供的磁传感器具有出色的长期重复磁信号读取的稳定性。
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公开(公告)号：CN112522379A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202110180390.5
申请日：2021-02-08
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12Q1/686
摘要： 本发明提供一种功能核酸磁生物传感器，包括：（1）BS‑PCR扩增体系，（2）功能核酸磁层析分析体系。本发明通过巧妙地设计引物，使得在双链靶标存在下可对靶标进行超快扩增，并使扩增产物两端各带一个单链寡核苷酸。进一步利用构建的侧流磁层析试纸进行磁信号输出和分析，突破了目前功能核酸检测试纸信噪比高，信号分子不稳定的瓶颈，解决了传统PCR反应速度慢，产物难于可视化的难题，实现了对双链靶标的快速、高灵敏、可视化检测。不仅如此，本发明提供的磁传感器具有出色的长期重复磁信号读取的稳定性。
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