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公开(公告)号：CN101283674A
公开(公告)日：2008-10-15
申请号：CN200810123895.2
申请日：2008-06-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速获得萝卜单倍体的育种方法，属于植物遗传育种领域。包括：32.5℃恒温培养箱热激处理48h的小孢子培养获得子叶型胚状体，25℃、4000Lx、16h·d－1的光照下培养5～7d，待胚状体转绿后接到继代培养基、生根培养基上萌发与植株再生，再利用根尖细胞染色体计数法或利用流式细胞仪进行再生植株倍性鉴定。通过本发明方法成功获得萝卜单倍体再生植株，使小孢子的胚状体诱导率提高到17.03个/105。本发明利用小孢子培养方法获得中国萝卜的单倍体植株，染色体加倍后得到纯合自交系，可用于萝卜遗传改良与新品种选育。
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公开(公告)号：CN101017151A
公开(公告)日：2007-08-15
申请号：CN200710020044.0
申请日：2007-02-09
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N27/447 , G01N21/78 , G01N21/84 , C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种基于PCR技术的番茄杂交种纯度检测方法，属于生物技术领域。本发明以商品杂交种番茄“苏粉8号”为对象，开展分子标记的筛选，鉴定出在杂种中能够同时产生父母本特异条带的1个RAPD与1个SSR标记引物。RAPD标记引物产生母本特异标记NAURP409800，父本特异标记NAURP4091100；SSR标记引物产生母本特异标记NAUSSRTOM47140与父本特异标记NAUSSRTOM47148。两个标记可有效用于鉴定番茄杂交种种子的纯度，同时两个标记可以相互验证，确定商品种的遗传纯度，利于番茄杂交种种子高效准确的质量控制，加快了番茄商品种子的质量检测进程。
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公开(公告)号：CN117106944A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202211679969.7
申请日：2022-12-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于蔬菜作物遗传育种与生物技术领域，提供了一种萝卜基于VRN1基因的抽薹性状功能标记及其应用。在抽薹性极显著差异萝卜种质6号染色体上RsVRN1基因启动子中鉴定到InDel序列差异，进而开发出InDel标记引物对：Nau‑VF：5’‑GTCAAACATATATGATCTATCTAGACCTTGC‑3’；Nau‑VR：5’‑GTTGAGAGAGAAACAGTGATGAAGGA‑3’。本发明所开发的基于VRN1基因的功能标记能实现对萝卜植株抽薹性进行快速准确鉴定。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸片段于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速准确鉴定萝卜种质抽薹性，有利于高效进行萝卜晚抽薹性状鉴定与标记辅助选择，加快萝卜晚抽薹优良新品种培育进程。
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公开(公告)号：CN116926106A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202211523455.2
申请日：2022-11-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜基因编辑技术及其应用，首次在萝卜‘NAU‑067’中通过根癌农杆菌介导的遗传转化实现萝卜RsPDS基因编辑。将培养4～5d无菌苗切取带柄子叶后置于MS固体培养基上预培养3d，根癌农杆菌侵染萝卜带柄子叶后在MS固体培养基上共培养3d，之后置于MS+0.75mg/L TDZ+0.35mg/L NAA+300mg/L Carb的固体培养基上诱导不定芽。以RsPDS基因为例，出芽后采用GUS染色初步分析是否为转基因阳性愈伤组织，采用改良CTAB法提取白化苗DNA，PCR扩增发现1株新叶全白化苗在靶位点2存在3个碱基缺失和单个碱基替换，1株白化嵌合株在靶位点1存在3个碱基插入和单个碱基替换。本发明建立起一种基于CRISPR/Cas9系统的萝卜功能基因编辑技术体系，为创制突变体、高效验证基因的生物学功能以及创制萝卜优异种质提供了重要技术支撑。
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公开(公告)号：CN114958904B
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210536365.0
申请日：2022-05-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790782A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202211442705.X
申请日：2022-11-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种基于非组培、快速验证萝卜盐胁迫响应基因功能的方法，包括：对萝卜种子进行催芽播种；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；在非组培条件下切除实生根，获得无根苗并浸入侵染液进行侵染；侵染后的无根苗移栽至营养土并诱导毛状根；通过表型筛选和PCR检测鉴定阳性复合植株；对复合植株进行盐处理，通过表型和超氧阴离子自由基含量(O2‑)测定来评价阳性复合植株的耐盐性。本发明不仅提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短发根时间，而且避免了无菌操作。成功验证了萝卜盐胁迫响应基因的功能，为萝卜本体基因功能验证提供技术参考。
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公开(公告)号：CN114958904A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210536365.0
申请日：2022-05-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速获得萝卜转基因材料的方法，包括：对萝卜种子进行消毒种植无菌苗；活化携带目的基因的发根农杆菌；制备侵染液；获取无根苗外植体并浸入菌液进行侵染；经过共培养和脱菌培养30d后，通过表型筛选、PCR检测和qRT‑PCR分析鉴定阳性毛状根；切取阳性毛状根放置于愈伤组织培养基上诱导愈伤组织，获得转基因愈伤组织。本发明提高了发根农杆菌诱导萝卜毛状根的效率，缩短了发根时间，成功诱导了转基因愈伤组织，能够进行萝卜部分本体基因功能验证。
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公开(公告)号：CN113373099A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110891500.9
申请日：2021-08-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种卡巴尼氏致病杆菌NN7，其保藏编号为CCTCC NO：M 2021760，于2021年6月24日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明还公开了卡巴尼氏致病杆菌（Xenorhabdus cabaniltasii）NN7菌株在制备生防菌剂中的应用。本发明中卡巴尼氏致病杆菌NN7菌株对尖孢镰刀菌西瓜专化型1号生理小种的抑制能力显著强于伯氏致病杆菌NN6菌株，在西瓜枯萎病的防治方面具有更优异的开发潜力。
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公开(公告)号：CN111424111A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010484886.7
申请日：2020-06-01
Applicant: 南京农业大学 , 南京莱福佳农业科技有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法。萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C,由上游引物RsNBS135C-F和下游引物RsNBS135C-R扩增萝卜基因组DNA得到。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸序列于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速、直接鉴定萝卜种质中目标抗性基因位点，有利于高效可靠地利用抗根肿病目标基因、加快根肿病抗性遗传改良进程。
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公开(公告)号：CN111088260A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010046089.0
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物生物技术与分子育种领域，涉及萝卜盐胁迫响应过程中显著变化基因RsNHX1，具体涉及萝卜耐盐基因RsNHX1及应用，萝卜耐盐基因RsNHX1的核苷酸序列如SEQ ID N O.1所示，含有所述的耐盐基因RsNHX1的转运蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明填补萝卜耐盐基因RsNHX1的空白，提供萝卜耐盐基因RsNHX1的cDNA序列，采用RT-qPCR技术分析盐胁迫下不同时间RsNHX1基因的表达特性，进一步设计克隆引物构建pCAMBIA2301-RsNHX1过表达载体和抑制表达载体，转化拟南芥后kan+筛选，以及盐处理表型鉴定。
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