公开(公告)号：CN103509815A

公开(公告)日：2014-01-15

申请号：CN201310362812.6

申请日：2013-08-16

申请人： 四川卧龙国家级自然保护区管理局 ,  四川农业大学

发明人： 李德生 ,  朱玲 ,  张和民 ,  王承东 ,  易悦 ,  刘骁

IPC分类号： C12N15/70 ,  A61K39/39

摘要： 本发明公开了一种重组大熊猫IL-2免疫佐剂的制备方法，本发明的重组大熊猫IL-2免疫佐剂一种效果显著且又提取简便，且能直接应用于生产及临床应用的重组大熊猫IL-2(gpIL-2)免疫佐剂，提高犬瘟热疫苗以及其他常规疫苗的免疫效果，控制疾病的发生与流行，保护大熊猫的健康。犬瘟热素有“毁灭性传染病”之称，已成为威胁大熊猫种群数量和生命安全的首要烈性传染病，严重影响了大熊猫的健康发展。本发明重组大熊猫IL-2(gpIL-2)免疫佐剂能显著增强犬瘟热疫苗免疫效果，对犬瘟热的防治具有重要意义。

公开(公告)号：CN103409453A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310362610.1

申请日：2013-08-16

申请人： 四川卧龙国家级自然保护区管理局 ,  四川农业大学

发明人： 李德生 ,  朱玲 ,  张和民 ,  王承东 ,  易悦 ,  刘骁

IPC分类号： C12N15/70 ,  A61K39/175 ,  A61K39/39 ,  A61P31/14

摘要： 本发明公开了一种重组大熊猫IL-6免疫佐剂的制备方法，包括以下步骤，A1大熊猫IL-6全基因克隆；A11大熊猫外周血淋巴细胞体外培养；A12总RNA提取；A13cDNA的合成；A14引物的设计与合成；A15目的基因的PCR扩增；A16目的基因PCR产物的TA克隆；A17重组质粒的初步鉴定；A2大熊猫白介素6的原核表达、多克隆抗体的制备；犬瘟热素有“毁灭性传染病”之称，已成为威胁大熊猫种群数量和生命安全的首要烈性传染病，严重影响了大熊猫的健康发展。本发明重组大熊猫IL-6免疫佐剂能显著增强犬瘟热疫苗免疫效果，对犬瘟热的防治具有重要意义。

公开(公告)号：CN102925587A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210271610.6

申请日：2012-08-02

申请人： 四川农业大学 ,  四川高金食品股份有限公司

发明人： 徐志文 ,  赵勤 ,  朱玲 ,  李淞 ,  周璐 ,  周远成

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒，按照每个试剂盒检测20个样品计，每次检测样品时设阳性、阴性对照，试剂盒组成：阳性对照模板；阴性对照样品；上游引物P1和下游引物P2浓度均为10pmol/ul，各30ul，每个样品各用0.5ul；2×Taq PCR Master Mix：300ul，每个样品用5ul；ddH2O：200ul，每个样品用3ul；矿物油：600ul，每个样品加10ul。本发明与现有技术相比有以下优点：灵敏度高，最低可以检测1pg病毒核酸；检测时间短。

公开(公告)号：CN106367538B

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN201611096845.0

申请日：2016-12-02

申请人： 四川农业大学

发明人： 朱玲 ,  龚双燕 ,  徐志文 ,  孙贤刚 ,  李小璟 ,  杨泽晓

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种用于鉴别诊断PCV2和PEDV病毒的引物，包括引物PEDV‑F、引物PEDV‑R、PCV2‑F和引物PCV2‑R；其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明通过对复合PCR反应体系和反应条件的优化，得到的用于鉴别诊断PCV2和PEDV病毒的方法。能够捕获更多信息且快速精确检测出微量核酸，提升了鉴别、检测的敏感性及特异性，能够快速、特异的检测猪流行性腹泻病毒及猪圆环病毒2型，大大提高了这两种病毒的检测效率。

公开(公告)号：CN118460682A

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202410936935.4

申请日：2024-07-12

申请人： 畜科生物工程有限公司 ,  四川农业大学 ,  生猪技术创新中心(重庆)

发明人： 吴放 ,  朱玲 ,  李叶 ,  葛良鹏 ,  曾秀 ,  刘作华 ,  孙静 ,  徐志文 ,  游冬 ,  周远成

IPC分类号： C12Q1/6844 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/70 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供了一种基于RAA和CRISPR‑Cas13d的PEDV检测方法、试剂盒及其应用，属于分子生物学诊断技术领域；本发明使用RAA引物和标准阳性质粒PMD‑19T‑PEDV M作为模板进行RAA扩增，扩增产物经过纯化后用于T7体外转录，将DNA模板转录成靶标ssRNA；将转录的ssRNA与Cas13d蛋白、crRNA和荧光RNA报告探针进行反应进行荧光信号检测。本发明将以RT‑RAA技术和CRISPR‑Cas13d技术结合，实现对PEDV临床样本的高灵敏度、低复杂性的可视化检测，具有操作简单、检测灵敏、结果可视化的优点，从而为提高生猪养殖行业检测PEDV，降低生物安全风险提供技术手段。通过体外合成用于扩增的标准阳性质粒pMD‑19T‑PEDV和RAA的引物，原核表达CRISPR/Cas13d蛋白、体外转录CrRNA，其应用于猪流行性腹泻病毒的检测。

公开(公告)号：CN118272583A

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202410581336.5

申请日：2024-05-11

申请人： 四川农业大学 ,  畜科生物工程有限公司 ,  生猪技术创新中心(重庆)

发明人： 徐志文 ,  游冬 ,  葛良鹏 ,  周远成 ,  朱玲 ,  丁玉春 ,  吴梦 ,  刘作华 ,  曾秀

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种检测或辅助检测猪伪狂犬病毒的方法。该方法包括如下步骤：以待测样本的总DNA为模板，以SEQ ID NO:7所示的上游引物和SEQ ID NO:10所示的下游引物组成的RAA引物对进行RAA扩增，得到RAA扩增产物；对RAA扩增产物进行T7体外转录，得到转录产物；采用EQ ID NO:2所示的crRNA‑2、ssRNA荧光报告分子UUUUUU和EsCas13a蛋白对转录产物进行CRISPR切割，得到切割反应产物；通过检测切割反应产物的荧光判定待测样本是否含有猪伪狂犬病毒。本发明所提供的RAA引物对和crRNA‑2可以检测猪伪狂犬病毒。本发明具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN115725785B

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202211007445.3

申请日：2022-08-22

申请人： 四川农业大学

发明人： 徐志文 ,  朱玲 ,  王玉顺

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种快速高效的荧光RT‑RAA检测RVA的方法，属于生物检测技术领域。本发明提供了一种RT‑RAA荧光法检测RVA的引物，所述引物包括如SEQ ID NO.2和SEQ IDNO.5所示的引物，本发明还提供了一种RT‑RAA荧光法检测RVA的试剂盒，所述试剂盒包括SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的引物，该引物可利用RT‑RAA荧光检测方法快速高效的检测样品中的RVA，且灵敏度高，重复性好。

公开(公告)号：CN116942720A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202311219836.6

申请日：2023-09-21

申请人： 畜科生物工程有限公司 ,  四川农业大学 ,  眉山市食品药品检验检测中心(眉山市药品不良反应监测中心)

发明人： 漆信桥 ,  张明芝 ,  周梦佳 ,  李刚 ,  李英伦 ,  徐志文 ,  朱玲 ,  唐华侨 ,  周远成

IPC分类号： A61K36/284 ,  A61P31/04

摘要： 本发明公开了一种苍术提取物应用于抑制细菌生物膜及抑制细菌生物膜形成的组合物，属于生物膜领域，所述苍术提取物为苍术乙醇提取物，抑制细菌生物膜形成的组合物含有苍术提取物，所述苍术提取物为苍术乙醇提取物，所述苍术乙醇提取物为苍术乙醇提取物氯仿部位。本发明苍术提取物在不抑制菌生长的情况下，可以抑制生物被膜的形成。

公开(公告)号：CN115976108A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202310034864.4

申请日：2023-01-10

申请人： 四川农业大学

发明人： 朱玲 ,  杨雁婷 ,  徐志文

IPC分类号： C12N15/869 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/34 ,  C12N15/24 ,  A61K39/12 ,  A61K39/295 ,  A61K38/20 ,  A61P31/20

摘要： 本发明公开了一种表达PCV2、PCV3Cap蛋白的重组伪狂犬病毒载体、构建方法与应用，属于疫苗技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)将SEQ ID NO.1序列插入到pEGFP‑gI28k真核表达质粒中，获得pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒；(2)pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒和psgRNA‑gE质粒转染BHK‑21细胞，再接种PRV‑XJ‑ΔTK病毒液；(3)待细胞出现80％的病变并观察到发出绿色荧光的病毒蚀斑时，反复冻融，离心取上清，上清液中含有PRV真核表达载体rPRVXJ‑ΔgE/gI/TK‑2Cap‑3Cap‑IL4；(4)纯化载体。

公开(公告)号：CN114015805A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111191385.0

申请日：2021-10-13

申请人： 四川农业大学 ,  畜科生物工程有限公司

发明人： 徐志文 ,  周远成 ,  朱玲 ,  聂民财 ,  邝山

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了检测盖塔病毒的荧光RT‑RAA引物、试剂盒及其应用。本发明所保护的基于荧光RT‑RAA的检测盖塔病毒的试剂盒包括检测盖塔病毒的组合物即序列表中序列2所示的引物RT‑RAA‑F2、序列表中序列3所示的引物RT‑RAA‑R2和序列表中序列4所示探针。实验证明，该试剂盒能够快速高效的检测GETV，在39℃恒温反应30min即可完成检测，灵敏度为8拷贝/反应的GETV SC201807病毒质粒转录本和20TCID50/反应的GETV SC201807病毒RNA，特异性好，准确性高，可以为猪盖塔病毒的临床样品的检测提供技术支撑。