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公开(公告)号：CN102925587A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210271610.6
申请日：2012-08-02
申请人： 四川农业大学 , 四川高金食品股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种猪嵴病毒RT-PCR检测试剂盒，按照每个试剂盒检测20个样品计，每次检测样品时设阳性、阴性对照，试剂盒组成：阳性对照模板；阴性对照样品；上游引物P1和下游引物P2浓度均为10pmol/ul，各30ul，每个样品各用0.5ul；2×Taq PCR Master Mix：300ul，每个样品用5ul；ddH2O：200ul，每个样品用3ul；矿物油：600ul，每个样品加10ul。本发明与现有技术相比有以下优点：灵敏度高，最低可以检测1pg病毒核酸；检测时间短。
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公开(公告)号：CN103409454A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310362712.3
申请日：2013-08-16
申请人： 四川农业大学 , 四川高金食品股份有限公司
CPC分类号： Y02A50/39
摘要： 本发明公开了一种JEV优势抗原表位E1-402aa重组质粒的制备方法及疫苗。小鼠首免后0d、21d和56d收集血清，应用小鼠细胞因子(IFN-γ)定量ELISA检测试剂盒对其进行检测，结果显示，pCI-E1-402aa疫苗组和JEV弱毒苗疫苗组免疫小鼠后，IFN-γ的水平显著升高，说明疫苗组均具有刺激Th1淋巴细胞分泌IFN-γ的能力，且IL-7具有增强Th1型免疫应答的作用。通过分析外周血细胞因子IL-4和IFN-γ的变化趋势，疫苗可以刺激机体产生的不同亚类细胞免疫反应的能力。
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公开(公告)号：CN115976108B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202310034864.4
申请日：2023-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/869 , C12N15/65 , C12N15/64 , C12N15/34 , C12N15/24 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61K38/20 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种表达PCV2、PCV3Cap蛋白的重组伪狂犬病毒载体、构建方法与应用，属于疫苗技术领域。该构建方法包括以下步骤：(1)将SEQ ID NO.1序列插入到pEGFP‑gI28k真核表达质粒中，获得pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒；(2)pEGFP‑gI28k‑2Cap‑3Cap‑IL4质粒和psgRNA‑gE质粒转染BHK‑21细胞，再接种PRV‑XJ‑ΔTK病毒液；(3)待细胞出现80％的病变并观察到发出绿色荧光的病毒蚀斑时，反复冻融，离心取上清，上清液中含有PRV真核表达载体rPRVXJ‑ΔgE/gI/TK‑2Cap‑3Cap‑IL4；(4)纯化载体。
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公开(公告)号：CN118006603A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410036555.5
申请日：2024-01-10
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas13a检测猪流行性腹泻病毒的试剂盒及其应用，属于分子生物学诊断技术领域。本发明的引物(SEQ ID NO.3和4)和CrRNA(SEQ ID NO.13)特异性强、敏感性好，含有上述引物和CrRNA的试剂盒操作简单、检测快速、结果可视化，使得本发明建立的基于RT‑RAA和CRISPR‑Cas13a技术的检测PEDV的方法可以用于PEDV的现场可视化检测，从而为提高生猪养殖行业检测PEDV水平，降低养殖场生物安全风险提供技术手段。
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公开(公告)号：CN117363587A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202210793566.9
申请日：2022-07-07
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/50 , C07K14/165 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61K39/245 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了表达猪德尔塔冠状病毒S蛋白的重组伪狂犬病毒及其应用。所述重组病毒为将德尔塔冠状病毒S蛋白的编码基因导入缺失了致病基因部分序列的伪狂犬病毒中得到的重组病毒。所述S蛋白可为序列2或序列2的第243‑692位氨基酸所示的蛋白质。所述伪狂犬病毒为缺失了序列表中序列4所示的第39‑918位核苷酸的TK基因部分序列的伪狂犬病毒。实验证明使用该重组病毒免疫试验动物后可以刺激试验动物产生特异性的抗体，可以用于制备或开发德尔塔冠状病毒所致疾病的疫苗或药物。
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公开(公告)号：CN114177232A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202210027316.4
申请日：2022-01-11
申请人： 四川农业大学 , 成都禾正众邦动物药业有限公司
IPC分类号： A61K36/82 , A61K31/353 , A61P31/04 , A61K135/00 , A61K127/00
摘要： 本发明提供了一种茶叶多酚提取物的提取方法、提取的茶叶多酚提取物及其应用，属于细菌感染预防技术领域。本发明提供的基于老茶枝、老茶叶以及茶沫的茶叶多酚提取物的提取方法，能够使老茶枝、老茶叶以及茶沫中的多酚提取率高达16～26％，提取的茶叶多酚提取物中多酚含量达654～702mg/kg，EGCG含量达456～547mg/kg，能够充分利用茶产业资源，经济高效。同时，本发明提供的茶叶多酚提取物可在3d内使兔产气荚膜梭菌病的治愈率达到85％以上，可在3d内使牛产气荚膜梭菌病的治愈率达到100％，对兔产气荚膜梭菌病和牛产气荚膜梭菌病的治疗作用十分显著。
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公开(公告)号：CN109609520A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201910005128.X
申请日：2019-01-03
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N15/34 , C12N15/70 , A61K39/187 , A61P31/20
CPC分类号： C07K14/005 , A61K39/12 , A61K2039/53 , A61P31/20 , C12N15/70 , C12N2710/12022 , C12N2710/12034
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种非洲猪瘟的合成基因、建立方法以及mRNA疫苗，非洲猪瘟病毒mRNA疫苗，含有包被的非洲猪瘟的mRNA；非洲猪瘟病毒mRNA疫苗的制备方法为将重组K205R-IRES-A104R-IRES-E183L基因连接至pMD19-T载体，构成亲本pMD19-K205R-IRES-A104R-IRES-E183L质粒；将亲本质粒转化感受态细胞，扩增后提取质粒即克隆质粒，在克隆质粒中提取目的片段；将目的片段进行体外转录即得mRNA。本发明非洲猪瘟mRNA疫苗，填补现有的空白区域、用于预防ASFV感染；克隆质粒制备简单，成本较低，适用于产业化生产。
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公开(公告)号：CN107034172A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710347697.3
申请日：2017-05-17
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12N5/071
CPC分类号： C12N5/0686
摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，具体来说是一种适用于低血清Vero细胞系的建立方法，Vero细胞用梯度血清浓度培养液培养，解决的是Vero细胞在高血清环境中，培养成本高、血清成分损伤细胞等一系列缺点，适用于低血清Vero细胞系的建立，是培养出一种适应低血清环境的细胞系，具有省时、省力、减少血源性病原污染、降低成本等优点。现已成功应用于培养Vero细胞，并成功应用于疫苗生产、获得高质量高滴度的病毒培养液等多方面研究，本发明的适用低血清的Vero细胞系形态良好，增殖较快，可直接应用于商业化开发。
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公开(公告)号：CN106435035A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201611096843.1
申请日：2016-12-02
申请人： 四川农业大学
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143
摘要： 本发明公开了一种用于检测PRRSV和PEDV双重RT-PCR的方法及引物，该引物包括PRRSV引物对和PEDV引物对；PRRSV引物对包括引物PRRSV-P1和引物PRRSV-P2，所述PEDV引物对包括引物PEDV-P1和引物PEDV-P2；该方法通过对PRRSV的ORF7基因和PEDV的S基因序列设计特异性引物，保证扩增片段的准确性和引物的特异性；通过对反应体系中各组分的优化，实现了两种病毒在同一反应体系中的同时扩增。本发明建立的双重RT-PCR方法能快速有效地对PRRSV和PEDV进行诊断，对实际生产有重要意义。
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