脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用

    公开(公告)号:CN106880646A

    公开(公告)日:2017-06-23

    申请号:CN201710201902.5

    申请日:2017-03-30

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: A61K35/28 A61P3/04 C12N5/0775

    摘要: 本发明公开了脂肪来源间充质干细胞外泌体在制备治疗肥胖药物中的应用,所述脂肪来源间充质干细胞外泌体由如下方法制备而成:(1)将剥离的脂肪组织分散于消化液中,以产生细胞悬浮液;(2)离心细胞悬浮液,以形成细胞沉淀,分离沉淀,洗涤,得到含有脂肪来源间充质干细胞的血管基质成分;(3)在体外培养体系中对ADSC进行扩增培养,收集扩增培养后的上清液进行浓缩,向浓缩后的上清液中加入外泌体提取试剂,即提取得到脂肪来源间充质干细胞外泌体。本发明的脂肪来源间充质干细胞外泌体可以促进白色脂肪米色化,以实现产热驱动的能量消耗,从而抵抗肥胖的发生发展。

    一种人脂肪间充质干细胞库的构建方法

    公开(公告)号:CN106754685A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710034090.X

    申请日:2017-01-17

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明提供了一种人脂肪间充质干细胞库的构建方法,包括以下步骤:(1)采集脂肪组织,加入生理盐水离心;(2)去油层,清洗脂肪组织;(3)将清洗后的脂肪组织接种于完全培养基中,置于37℃、5%CO2条件下进行培养;(4)每隔5‑8天更换一次培养基,待细胞融合度为70‑80%时,用TrypLETM Select消化细胞;(5)传代培养;(6)质量检测;(7)冻存;(8)建库。本发明采用离心法去除油脂和红细胞,没有使用胶原酶消化,可以缩短操作时间,使工艺简单可行;也不会产生大量红细胞,不需要采用红细胞裂解液或低分子肝素钙去除红细胞,不会对人脂肪间充质干细胞造成潜在风险,同时还节约了成本。

    一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法

    公开(公告)号:CN106520691A

    公开(公告)日:2017-03-22

    申请号:CN201611261493.X

    申请日:2016-12-30

    申请人: 潍坊医学院

    发明人: 马晓君

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明公开了一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法,包括以下步骤:1)皮肤组织的获得;2)消化皮肤组织:向PBS溶剂中加入含有0.02%EDTA的0.05%胰蛋白酶溶液,在37℃消化10-20min,最后,加入含有10%FBS的培养基终止消化;3)皮肤干细胞获得;4)间充质干细胞培养:基础培养基为DMEM/F12,并加入青霉素、链霉素、谷氨酰胺、柠檬酸铁、烟酰胺、bFGF(基础成纤维细胞生长因子)、EGF(表皮细胞生长因子)和B27(抗原)添加剂,形成培养液。该分离及培养方法,分离容易,且能获得活性更高、数量更多的细胞,重现率很高。