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    一种肥胖相关基因的检测方法
    1.
    发明公开
    一种肥胖相关基因的检测方法 无效

    公开(公告)号：CN107974496A

    公开(公告)日：2018-05-01

    申请号：CN201710469563.9

    申请日：2017-06-20

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  崔俊生 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： C12Q1/6883 ,  C12Q1/6858

    CPC分类号： C12Q1/6883 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2600/16

    摘要： 本发明公开了一种肥胖相关基因的检测方法，具体步骤如下：利用检测者的口腔黏膜细胞提取DNA；以口腔黏膜细胞提取DNA为模板进行PCR反应；对肥胖6个相关基因设计了6对特异性引物；进行普通PCR扩增后将PCR扩增产物用1％的琼脂糖凝胶电泳；将1％的琼脂糖凝胶电泳目的条带用天跟的琼脂糖凝胶回收试剂盒回收；进行测序反应；测序反应产物纯化；变性，上3730测序仪测序；将测序结果用Chromas软件分析6个SNP基因型。本发明具有检测高效、特异性好等优点。

    一种化疗用药指导基因检测固相PCR试剂盒
    2.
    发明公开
    一种化疗用药指导基因检测固相PCR试剂盒 无效

    公开(公告)号：CN107663537A

    公开(公告)日：2018-02-06

    申请号：CN201710467678.4

    申请日：2017-06-20

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  高雅丽 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： C12Q1/6886

    CPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q2600/106 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2600/16

    摘要： 本发明公开一种化疗用药指导基因检测固相PCR试剂盒及检测方法，属PCR应用技术领域。本发明还涉及一种检测10种化疗用药指导检测引物组，其引物组由GSTP1 SNP-I105V A313G，MTHFR SNP-C677T，MDR1 G2677AT，XRCC1 SNP-R399Q，CDA G208A，MDR1 SNP-C3435T，CDA A79C，CYP1B1C SNP-4326C/G，ERCC1 SNP-C118T，DPYD IVS14_1G/A组成；本发明涉及的固相PCR扩增试剂盒，可一次性检测上述10种基因位点，只需在试剂盒重加入相应的核酸模板即可上机扩增，扩增完后的PCR产物采用Sanger测序，根据测序结果指导化疗用药指导。与现有技术相比，本发明采用特异性的引物序列，保证检测结果的可靠性；该检测方法操作简单，省时省力；检测通量大，试剂耗材成本低；可直接对提取的核酸检测；对检测平台和检测人员的要求低，能够在临床一线广泛推广。

    一种分选白细胞的免疫磁珠的制备方法及储存方法
    3.
    发明公开
    一种分选白细胞的免疫磁珠的制备方法及储存方法 无效

    公开(公告)号：CN107435039A

    公开(公告)日：2017-12-05

    申请号：CN201710443698.8

    申请日：2017-06-13

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  陆宝石 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： C12N5/078 ,  G01N33/543

    CPC分类号： C12N5/0634 ,  C12N2509/00 ,  G01N33/54326

    摘要： 本发明公开了一种分选白细胞的免疫磁珠的制备方法及储存方法，具体步骤如下：合成油酸-Fe3O4；Fe3O4/PVAc磁性微球制备；(Fe3O4/PVA)/SiO2磁性微球的制备；将0.4ml 3-氨丙基三乙氧基硅烷滴加到磁性微球(Fe3O4/PVA)/SiO2的乙醇悬浮液中，室温下搅拌7h氨基化，利用外加磁场从反应介质中分离出，并用乙醇溶液对其清洗五次备用；将氨基化的磁性纳米颗粒加入到50ml3％戊二醛的PBS溶液中，37℃下搅拌3h，通过氨基与醛基之间形成的Schiff碱在磁性颗粒表面修饰上醛基官能团，反应结束后利用外加磁场从反应介质中分离出颗粒，用PBS溶液反复冲洗产物，将颗粒分散在PBS溶液中，终浓度为8μg/μl；抗体的肼基化修饰；免疫磁珠的制备，储存方法为：置于4℃下保存。本发明具有稳定性好、特异性强等优点。

    一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒及其检测方法
    4.
    发明公开
    一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒及其检测方法 无效

    公开(公告)号：CN107083430A

    公开(公告)日：2017-08-22

    申请号：CN201710273268.6

    申请日：2017-04-25

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  李静 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12N15/11

    CPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2563/159 ,  C12Q2563/107

    摘要： 本发明公开了一种检测人类KRAS基因突变的试剂盒及其检测方法，与现有技术相比，本发明利用第三代PCR技术将待测样品微滴化成若干个微滴，每一个微滴都作为单独的样本进行检测，再配合使用一对特异性引物和相应的荧光探针，提高了检测的准确度，也使检测的特异性更高、更稳定，另外，ddPCR能够检测到1/100000以下浓度的目标分子；相比较与实时定量PCR，ddPCR的定量不需要通过与参照基因表达量进行比对就可以直接定量，绝对定量的结果也排除了内参基因、PCR设备、扩增效率等因素对检测的干扰，结果精确可信。本发明试剂盒检测的精确结果能够为KRAS基因突变相关癌症的诊断提供有力的参考依据，提高相关癌症的诊断效率。

    一种高效的人皮肤组织多能干细胞的制备方法
    6.
    发明公开
    一种高效的人皮肤组织多能干细胞的制备方法 无效

    公开(公告)号：CN106884004A

    公开(公告)日：2017-06-23

    申请号：CN201710176129.1

    申请日：2017-03-23

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  陆宝石 ,  李航 ,  吴远航 ,  苏军

    IPC分类号： C12N5/074

    CPC分类号： C12N5/0625 ,  C12N2509/00

    摘要： 本发明公开了一种高效的人皮肤组织多能干细胞的制备方法，具体步骤为：包被瓶制备：包被瓶置4℃冰箱中保存备用；皮肤干细胞制备：取脸颊或下巴皮肤组织，去除脂肪组织；组织块置于无菌平皿中，过夜消化；对真皮层小块消化；将上述细胞悬液用过滤器过滤；留用贴壁细胞；培养箱中培养；用吸管反复吹打瓶底，使细胞脱落；将上述细胞按1:3的比例分瓶传代，继续培养，细胞传至2‑5代，即可。本发明具有细胞得率高、分化效率高等优点。

    一种单核细胞增生李斯特菌免疫磁珠的制备方法
    9.
    发明公开
    一种单核细胞增生李斯特菌免疫磁珠的制备方法 无效

    公开(公告)号：CN107389917A

    公开(公告)日：2017-11-24

    申请号：CN201710494245.8

    申请日：2017-06-26

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  陆宝石 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： G01N33/531 ,  G01N33/543

    CPC分类号： G01N33/531 ,  G01N33/5434

    摘要： 本发明公开了一种单核细胞增生李斯特菌免疫磁珠的制备方法，具体步骤如下：抗原制备；抗体制备；多克隆抗体纯化；磁珠制备；磁性壳聚糖微球制备；多克隆抗体与氨基化修饰的磁性壳聚糖微球的偶联：加入EDC·HCL溶液，戊二醛、兔抗单增李斯特菌多克隆抗体溶液，用的PBS溶液稀释至2ml，室温孵育5-15min；在外加磁场下，去除上清，使用PBS溶液反复多次清洗，直至上清蛋白为0，弃上清；加入氨基化修饰的磁性壳聚糖微球2倍体积的5％BSA溶液，孵育，使偶联抗体的磁性壳聚糖微球封闭；在外加磁场作用下，弃上清，使用含0.05％Tween-20的PBS溶液清洗偶联多克隆抗体的免疫磁珠多次，然后在室温下真空干燥上述免疫磁珠24h，即可。本发明具有高效、灵敏性好等优点。

    一种CD133免疫磁珠的制备方法
    10.
    发明公开
    一种CD133免疫磁珠的制备方法 无效

    公开(公告)号：CN107389916A

    公开(公告)日：2017-11-24

    申请号：CN201710493624.5

    申请日：2017-06-26

    申请人： 安徽安龙基因医学检验所有限公司

    发明人： 韦玉军 ,  李航 ,  陆宝石 ,  苏军 ,  吴远航

    IPC分类号： G01N33/531 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N33/574 ,  G01N33/50

    CPC分类号： G01N33/531 ,  G01N33/5073 ,  G01N33/54326 ,  G01N33/54346 ,  G01N33/57484 ,  G01N33/577 ,  G01N2446/90

    摘要： 本发明公开了一种CD133免疫磁珠的制备方法，具体步骤如下：磁珠的制备；磁性壳聚糖微球制备：称取10克壳聚糖加到200ml 2％乙酸溶液中浸泡过夜，使之溶解；取1g Fe3O4纳米磁珠加入其中，室温下，300r/min条件下搅拌；加入200ml液体石蜡油，40℃下，300r/min条件下搅拌；温度升高至50℃，加入40ml甲醛，300r/min条件下，搅拌；向混合溶液中加入20ml 50％体积浓度的戊二醛，170r/min，60℃条件下搅拌，调节pH为10，搅拌2-6h；反应结束后向反应体系中加入100ml石油醚，充分搅拌，用布氏漏斗进行抽滤，获得磁性壳聚糖微球颗粒，然后再用乙醇充分搅拌洗涤，去除乙醇后再用蒸馏水洗涤，在50℃条件下真空干燥；磁性壳聚糖微球的羧基化；羧基化的免疫磁珠与抗体的偶联。本发明具有稳定性好、灵敏度高等优点。