基于CRISPR/Cas9技术将非糯性水稻株系改造成糯性株系的打靶载体和方法

    公开(公告)号:CN106119275A

    公开(公告)日:2016-11-16

    申请号:CN201610403848.8

    申请日:2016-06-07

    申请人: 湖北大学

    IPC分类号: C12N15/82 A01H5/00

    摘要: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9技术将非糯性水稻株系改造成糯性株系的打靶载体,其特征在于,包含sgRNA表达框和Cas9表达框,以及筛选标记,其中所述sgRNA表达框包含第一启动子以及由所述第一启动子控制转录的所述sgRNA编码序列,所述Cas9表达框包含第二启动子以及由所述第二启动子控制转录的Cas9编码序列;所述第一启动子和所述第二启动子为在水稻中组成型表达的相同或不同的强启动子;所述sgRNA编码序列由位于上游的位点靶向RNA的编码序列和位于下游的招募Cas9的RNA的编码序列组成,所述位点靶向RNA的编码序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了使用所述打靶载体将非糯性水稻株系改造成糯性水稻株系的方法。通过本发明,可简便并且有效实现该技术目的,并且大大节约了时间。

    一种调节启动子强度和表达模式的特异DNA分子

    公开(公告)号:CN105647924A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610113009.2

    申请日:2016-02-29

    IPC分类号: C12N15/113 C12N15/63

    摘要: 本发明公开了一种调节启动子强度和/或表达模式的特异DNA分子。本发明提供的特异DNA分子由RREP区段和/或PCA区段和/或UASGal4pBS区段和/或GAL1p△m2区段和/或ADH1t区段和/或GAL1p区段组成。所述RREP区段、所述PCA区段、所述UASGal4pBS区段和所述GAL1p△m2区段的核苷酸序列依次如序列6自5′末端起第4至12位、第19至27位、第31至208位和第215至660位所示,所述GAL1p区段和所述ADH1t区段的核苷酸序列依次为序列4自5′末端起第185至648位和序列1所示。所述特异DNA分子可调节启动子强度和/或表达模式,实现启动子的多样化。