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公开(公告)号：CN104854237A
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201380065298.8
申请日：2013-12-11
申请人： 霍夫曼-拉罗奇有限公司
发明人： S.苏科
IPC分类号： C12N9/12
CPC分类号： C12N9/1252 , C12N9/1276 , C12P19/34 , C12Y207/07007 , C12Y207/07049
摘要： 公开了与对应的未修饰的聚合酶相比具有增加的逆转录酶效率的DNA聚合酶。所述聚合酶可用在多种公开的引物延伸方法中。也公开了有关的组合物，包括重组核酸、载体和宿主细胞，它们可用于例如生产DNA聚合酶。
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公开(公告)号：CN104694628A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201510044869.0
申请日：2011-12-13
申请人： 生命技术公司
CPC分类号： C12Q1/686 , C07H21/00 , C07H21/02 , C12N9/1252 , C12N15/10 , C12Q1/6869 , C12Y207/07007
摘要： 本发明涉及利用通过多磷酸分解作用(APP)反应的活化聚合核酸。本发明涉及使用多磷酸分解试剂三磷酸酯、多磷酸酯、亚氨基二磷酸酯、硫代二磷酸酯(或者单硫代焦磷酸酯)和相关的化合物中的至少一种、通过多磷酸分解(APP)反应进行活化的方法。
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公开(公告)号：CN103025867B
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201180036355.0
申请日：2011-06-17
申请人： 霍夫曼-拉罗奇有限公司
IPC分类号： C12N9/12
CPC分类号： C12N9/1252 , C12Q1/6806 , C12Y207/07007
摘要： 公开了相对于对应的未修饰的聚合酶具有增强的3′-错配辨识力的突变型DNA聚合酶。突变型聚合酶可用于多种公开的引物延伸方法中。还公开了相关的组合物，包括可用于，例如，突变型DNA聚合酶生产的重组核酸、载体以及宿主细胞。
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公开(公告)号：CN104178467A
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201410361153.9
申请日：2014-07-24
申请人： 孙启明
CPC分类号： C12N9/1252 , C12Y207/07007
摘要： 本发明涉及一种T4噬菌体多核苷酸激酶(T4bacteriophage polynucleotide kinase，T4PNK)的表达和纯化，特别涉及一种T4噬菌体多核苷酸激酶(T4bacteriophage polynucleotide kinase，T4PNK)的可溶性表达及纯化方法。属生物化学领域。本发明通过载体构建将T4噬菌体多核苷酸激酶基因克隆到pGEX载体中，在低温条件下T4多核苷酸激酶与GST融合表达，蛋白表达量达到15％，可溶性达95％。
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公开(公告)号：CN103966183A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410180380.1
申请日：2014-04-30
申请人： 厦门安普利生物工程有限公司
CPC分类号： C12N9/1252 , C12Y207/07007
摘要： 本发明提出了一种提取纯化TaqDNA聚合酶的方法。其步骤为：1）工程菌的活化和表达：取TaqDNA聚合酶工程菌活化，IPTG诱导表达将所述表达的工程菌用溶菌酶室温处理后加入DTT，吐温-20，冰上处理一段时间后离心得到粗蛋白；缓慢加入二氧化硅颗粒，磁力搅拌器上搅拌，离心去除沉淀；上清液补足NaCl后流过已螯合Ni2+的Ni-NTA柱，再用5倍床体积洗涤缓冲溶液依次洗涤，最后用洗脱液洗脱目的蛋白，接收含目的蛋白的洗脱液；脱盐后即得到纯化的TaqDNA聚合酶；得到的TaqDNA聚合酶加入甘油使体积分数为50%，-20℃保存。本发明方法简单，酶活性损失小，回收蛋白的纯度、活性、回收量高。
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公开(公告)号：CN103509767A
公开(公告)日：2014-01-15
申请号：CN201210214958.1
申请日：2012-06-27
申请人： 深圳市菲鹏生物股份有限公司
CPC分类号： C12N9/1252 , C12Y207/07007
摘要： 本发明公开了一种突变型Taq酶，还公开该酶的制备方法。本发明采用现代基因工程技术，将天然Taq酶氨基酸序列中的多个位点的氨基酸进行突变，具体为将天然Taq酶的第626位由谷氨酸突变为赖氨酸，第661位由丙氨酸突变为谷氨酸，第665位由异亮氨酸突变为苏氨酸，第667位由苯丙氨酸突变为亮氨酸，第707位由异亮氨酸突变为亮氨酸，并经重组表达后得到突变型Taq酶。该突变型Taq酶与未经改造的野生型Taq酶相比，上述定点突变使得酶的活性和热稳定性均有较大的提高，使其可更加适应工业生产及科研应用需求。
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公开(公告)号：CN103003418A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201180036364.X
申请日：2011-06-17
申请人： 霍夫曼-拉罗奇有限公司
IPC分类号： C12N9/12
CPC分类号： C12N9/1252 , C12P19/34 , C12Q1/6806 , C12Q1/686 , C12Y207/07007
摘要： 公开了相对于对应的未修饰的聚合酶具有增强的3′-错配辨识力的突变型DNA聚合酶。突变型聚合酶可用于多种公开的引物延伸方法中。还公开了相关的组合物，包括可用于，例如，突变型DNA聚合酶生产的重组核酸、载体以及宿主细胞。
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公开(公告)号：CN102282257A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201080004647.1
申请日：2010-01-15
申请人： 北海道三井化学株式会社 , 国立大学法人富山大学
CPC分类号： C12Q1/689 , C12N9/1252 , C12P19/34 , C12Q1/68 , C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Y207/07007
摘要： 根据本发明能够提供一种耐热性DNA聚合酶制品，所述制品在利用基因扩增反应的样品微生物的检测中无限地降低假阳性的风险，因此即使在样品微生物的量较少、从其中提取的DNA也为微量的情况下也能够对用于样品微生物检测的DNA进行选择性扩增，并且可以降低制造成本。进而，能够提供一种使用本发明的制品迅速简便地以高灵敏度对检测对象生物进行定量或定量鉴定的方法。
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公开(公告)号：CN108368151A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201680071876.2
申请日：2016-12-06
申请人： 生物辐射实验室股份有限公司
发明人： 龚小松
CPC分类号： C12N9/1252 , C07K2319/00 , C12N2740/13022 , C12Y207/07007
摘要： 提供了包含共价连接在一起的至少两种DNA聚合酶的多肽。与单体DNA聚合酶相比，这种多肽具有增加的稳定性并且可以具有减少的反应时间。具体地，提供了包含通过异源接头共价连接的第一DNA聚合酶和第二DNA聚合酶的多肽，其中第一或第二DNA聚合酶是逆转录酶或DNA依赖性聚合酶。
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公开(公告)号：CN107326079A
公开(公告)日：2017-11-07
申请号：CN201710614722.X
申请日：2012-08-10
申请人： 生命技术公司
CPC分类号： C12N9/1252 , C12Q1/6846 , C12Q1/686 , C12Y207/07007 , C12Q2521/101 , C12Q2527/125 , C12Q2563/159
摘要： 本公开内容提供了用于核酸聚合的组合物、方法、试剂盒、系统和装置。具体地，提供了允许核酸扩增的修饰的聚合酶及其生物活性片段。在一个方面，本公开内容涉及用于核酸测序、基因分型、拷贝数变异分析、双端测序和其它形式的遗传分析的修饰的聚合酶。在一些方面，本公开内容涉及用于产生用于各种下游过程的核酸文库或核酸模板的修饰的聚合酶。在一些方面，本公开内容涉及可跨聚合酶的种类或家族转移以提供具有改变的催化性质的新型聚合酶的同源氨基酸突变的鉴定。在一些方面，本公开内容提供了相较于参照聚合酶具有增强的催化性质的修饰的聚合酶。
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